GESTIÓN DE MUESTRAS BIOLÓGICAS

Muestras
sanguíneas

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 / 1. Introducción y contextualización práctica 3

/ 2. Generalidades de la sangre. Composición 4

/ 3. Tipos de muestras sanguíneas 4

/ 4. Técnicas de extracción sanguínea 5

/ 5. Caso práctico 1: “Consideraciones previas a la extracción” 6

/ 6. Aditivos. Anticoagulantes y conservantes 6

/ 7. Obtención de muestras de suero 7

/ 8. Posibles complicaciones. Prevención de errores 7

/ 9. Tipos de pruebas según las áreas del laboratorio 8

9.1. Análisis de la muestra. El hemograma 9

/ 10. Caso práctico 2: “Hemocultivos” 10

/ 11. Resumen y resolución del caso práctico de la unidad 11

/ 12. Bibliografía 12

© MEDAC ISBN: 978-84-19758-37-8

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 Conocer la composición de la sangre: el plasma y los componentes formes o
celulares.

Diferenciar los tipos de muestras sanguíneas y los métodos de extracción.

Valorar los aspectos previos a la extracción de sangre y los asociados a alteraciones

de la composición de la sangre.

Descubrir la función y las características de los aditivos usados en las muestras

sanguíneas: anticoagulantes y conservantes.

Conocer el proceso de obtención de muestras de suero y los distintos análisis de

sangre, como el hemograma.

/ 1. Introducción y contextualización práctica

Las muestras de sangre son las más comunes en los laboratorios de análisis clínicos, ya que las técnicas empleadas
son sencillas y la información obtenida tras su análisis es de especial relevancia para determinar el estado de salud
de los pacientes.

Las muestras de sangre pueden ser extraídas de una

vena, una arteria o de la zona blanda del dorso del dedo,
implicando diferentes técnicas que serán vistas a lo largo
de este tema junto con los tipos de análisis asociados a
las muestras de sangre.

Escucha el siguiente audio. En él se plantea el caso

práctico que debes desarrollar.

Encontrarás la resolución del mismo en el apartado

‘Resumen y resolución del caso práctico de la unidad’.
Fig.1. Composición de la sangre. Se verá en detalle en el siguiente punto.

Audio intro. “Análisis de muestras de

sangre”
https://bit.ly/2XIP7Yc
 TEMA 10. MUESTRAS SANGUÍNEAS
Gestión de muestras biológicas /4

/ 2. Generalidades de la sangre. Composición

La sangre es el tejido líquido que circula por todo el organismo y está compuesto por el plasma y por los elementos
formes que incluyen las células sanguíneas. Su color rojo se debe a la presencia de los glóbulos rojos, que contienen
hemoglobina.

El plasma sanguíneo es el líquido de color amarillento que está formado por un 95% de agua y un resto de sustancias en
solución y suspensión, como iones (Na, K, Ca, Cl…), componentes orgánicos (aminoácidos, glucosa y ácidos grasos)
y proteínas plasmáticas (albúminas, globulinas y factores de coagulación como el fibrinógeno y la protrombina).
Estas proteínas las veremos con más detalle en el audio de esta pantalla. Las células que forman la sangre se originan,
a partir de células madre, en el tejido hematopoyético de la médula ósea. El proceso de formación, maduración y
transferencia a la circulación sistémica de estas células se conoce como hematopoyesis. A continuación, se describen
los tres tipos celulares:

• Los glóbulos rojos, eritrocitos o hematíes: Constituyen el tipo celular más abundante en la sangre (99%). Son
células sin núcleo que duran unos 120 días y tienen forma de discos bicóncavos con capacidad de circular por
capilares estrechos (8 micras de diámetro medio). Su función consiste en transportar oxígeno a través de la
proteína conocida como hemoglobina, desde los pulmones a los tejidos. Además, la hemoglobina participa en
el transporte de dióxido de carbono desde los tejidos a los pulmones.

• Los glóbulos blancos o leucocitos: Contienen núcleo, a diferencia de los eritrocitos y plaquetas, y participan
en la defensa frente a los agentes patógenos, formándose y destruyéndose de manera continuada.

» Granulocitos o leucocitos granulados: Contienen gránulos y, según su naturaleza, se diferencian

neutrófilos (violetas), eosinófilos (rojos) y basófilos (azules intensos).

» Agranulocitos o leucocitos agranulados: No tienen gránulos, y se diferencian los linfocitos (con núcleos
grandes y poco citoplasma) y los monocitos (con núcleos en forma de riñón).

Los neutrófilos y los monocitos fagocitan agentes extraños; los eosinófilos y los basófilos actúan en reacciones
alérgicas, y los linfocitos, a través de la inmunidad específica.

• Plaquetas o trombocitos: Son discos redondos (2-4 micras) sin núcleo, que duran entre 8 y 12 días, y ayudan
a la coagulación mediante la formación de un tapón plaquetario.

Audio 1. “Proteínas plasmáticas”

https://bit.ly/3cYttcJ

/ 3. Tipos de muestras sanguíneas

Las muestras de sangre se utilizan para análisis de rutina que apoyan el diagnóstico o el seguimiento de patologías
en pacientes. Pueden clasificarse según su procedencia (venosa, arterial o capilar), lo que implica el uso de diferentes
métodos de extracción (que veremos con más detalle a lo largo de este tema). A continuación, nombraremos los
tipos de muestras sanguíneas:

• Muestra de sangre venosa: Es la sangre que procede del torrente sanguíneo y que se extrae, a través de la
punción venosa, con aguja acoplada a una jeringa o aguja conectada a tubos con anticoagulante (sistema
vacutainer), lo cual permite la extracción por presión positiva. Este tipo de sangre es oscura y mate.

• Muestra de sangre arterial: Se trata de la extracción de sangre arterial, que se utiliza para medir la presión
parcial de oxígeno, dióxido de carbono y pH. Este tipo de sangre es roja, espumosa y brillante.
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• Muestras de sangre capilar: Esta clase de sangre procede de arteriolas, vénulas y capilares, y se usa para
determinaciones analíticas en niños pequeños, en los que la punción venosa puede ser difícil. Además, este
tipo de extracción implica pequeñas cantidades de sangre, para evitar anemia por pérdida significativa de
sangre. También puede emplearse en adultos para controlar la glucemia.

Fig.2. Cada tipo de muestra presenta unas

características que deben ser consideradas
una vez obtenidos los resultados de la
determinación analítica.

/ 4. Técnicas de extracción sanguínea

La sangre es una de las muestras biológicas más usadas en los estudios analíticos, debido a la facilidad de su extracción
y a la información que se obtiene de su análisis.

La extracción de sangre puede realizarse por distintos métodos, los más empleados son la punción o extracción
venosa, la arterial y la capilar.

• Extracción venosa: Obtener sangre por este método implica la selección de una vena del miembro superior,
las más frecuentes son las venas cubital mediana y cefálica. Ahora bien, la extracción en la vena cefálica es la
más propensa a formar hematomas, y punzarla puede provocar dolor.

• Extracción arterial: La arteria radial se usa para la mayoría de las punciones arteriales y tiene una circulación
colateral, nutriéndose de la arteria cubital. Para este tipo de extracción se utiliza el test de Allen.

• Extracción capilar: En esta tipología, el procedimiento consiste en

seleccionar la zona de punción (por ejemplo, la superficie palmar
de cualquier dedo o superficie plantar del talón), desinfectar la
zona, realizar la punción con lanceta desechable, recoger la sangre
descartando la primera gota que brote y almacenar las gotas
que fluyan por capilaridad, cerrar el contendor correctamente
(invirtiéndolo cuando este contenga anticoagulante) y presionar la
zona de punción con gasa estéril para evitar hemorragia. Fig.3. Extracción capilar.

Sabías que...
El test de Allen se realiza antes de la punción en la extracción arterial para
valorar la circulación colateral del paciente. De ser positiva, hay riesgo de
isquemia.
 TEMA 10. MUESTRAS SANGUÍNEAS
Gestión de muestras biológicas /6

/ 5. Caso práctico 1: “Consideraciones previas a la

extracción”
Planteamiento: En la extracción de muestras biológicas, el personal responsable debe conocer cuáles son los
aspectos más relevantes que se deben considerar antes de llevar a cabo el procedimiento, para garantizar el éxito.

Nudo: Describe alguna de las consideraciones previas a la extracción de sangre que deben tenerse en cuenta.

Desenlace: La extracción de muestras de sangre es fundamental para garantizar la correcta determinación analítica.
Por este motivo, hay que tener en cuenta una serie de aspectos que influyen en el resultado final. A continuación, se
presentan algunos de estos factores:

• Dependiendo de la postura del paciente a la hora de realizar la extracción, la composición de la sangre

cambia. Por ejemplo, la extracción de sangre en pacientes encamados (con posición horizontal que supone
un movimiento de agua desde el compartimento intravascular al intersticial) presenta una reducción del
volumen del componente plasmático y aumenta la concentración de los componentes macromoleculares y
celulares.

• La extracción de sangre tras una transfusión

sanguínea puede producir cambios de
concentración de ciertas magnitudes, como
potasio, lactato deshidrogenasa, etc. Además,
en pacientes cateterizados, se recomienda la
extracción en el brazo opuesto al menos una hora
después de la infusión de sueros y ocho horas más
tarde de la nutrición parental.

• Las extracciones tras intervenciones, ya sean de

tipo diagnósticas o terapéuticas, pueden producir
interferencias en el análisis de las muestras, ya
sea por un aumento de los reactantes de fase
aguda sintetizados en respuesta a procesos
inflamatorios o por cambios hormonales causados Fig.4. El éxito obtenido en los resultados tras la determinación analítica
por la ansiedad o estrés emocional. está sujeto a una serie de consideraciones previas a la extracción.

/ 6. Aditivos. Anticoagulantes y conservantes

Como ya hemos visto, la sangre tiene una composición determinada y, entre sus componentes, destacan algunos
poco estables. Estos componentes requieren de aditivos o de agentes estabilizantes, que permitan estabilizar la
muestra, para su correcta determinación analítica.

Estas sustancias que preservan la muestra de sangre, los aditivos, pueden ser de diferentes tipos, en función de
su mecanismo de acción. Por este motivo, los aditivos se seleccionan para determinados análisis, es decir, según el
destino de la muestra. Entre los más usados, destacan los agentes estabilizantes, los geles separadores del suero y
los anticoagulantes.

• Los agentes estabilizantes: Preservan un componente sanguíneo específico. Entre los más empleados están
los relacionados con el ARN, que reducen su degradación y permiten su estudio. Aquellas muestras tratadas
con estos aditivos pueden almacenarse varios días a temperatura ambiente o a 4 °C o, incluso, almacenarse
durante años a -20 o -80 °C.
 TEMA 10. MUESTRAS SANGUÍNEAS
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• Los geles separadores del suero: Facilitan la separación de suero y

coágulo tras la centrifugación. El suero debe separarse de la sangre
total para evitar cambios, principalmente bioquímicos, en las
muestras.

• Los anticoagulantes: Como su nombre indica, son sustancias

químicas que intervienen impidiendo la coagulación de la sangre,
por lo que facilitan la manipulación, el fraccionamiento y el análisis
de la muestra. Entre las características de los anticoagulantes, se
diferencian: no producir hemólisis, evitar la agregación plaquetaria y Fig.5. Los tubos donde se recogen las muestras
no alterar el tamaño de los hematíes y la morfología de los leucocitos. sanguíneas pueden contener los aditivos
Los más comunes son EDTA, heparina y citrato. necesarios para estabilizar sus componentes.

/ 7. Obtención de muestras de suero

El suero es el componente de la sangre que permanece tras retirar el coágulo sanguíneo, cuya composición es similar
al plasma, pero sin las proteínas de coagulación. Mientras que el plasma sanguíneo se utiliza para medir parámetros
relacionados con la coagulación, el suero se usa, por ejemplo, para electroforesis de proteínas.

El suero puede obtenerse, por lo general, sin aditivos, aunque, en algunos casos, la adición de activadores o de gel
separador facilita su obtención.

Una vez se extrae la sangre, tiene lugar una serie de procesos que puede
afectar a ciertos parámetros bioquímicos, proteolíticos o hidrolíticos, dando
lugar a una disminución de glucosa en suero o aumento de amoníaco. Por
ello, la separación del suero debe realizarse a los 30 minutos (con un límite
máximo de 2 horas) de la obtención de la sangre, cuando se haya formado
el coágulo, y centrifugar la muestra para obtener el suero durante unos 10
minutos a una fuerza de 850 a 1.000 g, con los tubos bien cerrados durante
todo el proceso.

El suero puede mantenerse a temperatura ambiente no más de 8 horas, Fig.6. La centrífuga es el equipamiento de
momento en el que es necesario mantenerlo a 4 °C. Si, por el contrario, se laboratorio indispensable para procesar
quiere conservar el suero más de 48 h, debe congelarse a -20 °C o -80 °C. muestras sanguíneas y separar el suero.

/ 8. Posibles complicaciones. Prevención de errores

Tras el procesamiento de las muestras de sangre, pueden aparecer sustancias que no son propias de su composición,
llamadas sustancias interferentes, que pueden provocar errores o interferir en el resultado del análisis.

A continuación, definiremos los tipos de procesos o causas que alteran la composición de las muestras de sangre
y que, en función del estudio y la información que se requieran, determinarán que las muestras sean válidas o no.

• Hemólisis: Es el proceso por el cual los hematíes se destruyen, liberando su contenido en el plasma y alterando,
por tanto, la composición final de la muestra sanguínea. Este proceso puede deberse a factores intrínsecos al
paciente, como determinadas patologías, o a factores extrínsecos relacionados con la extracción, el transporte
o el procesamiento. Estos últimos son los que pueden evitarse, siguiendo las pautas necesarias para lograr el
éxito en la determinación analítica.

• Ictericia: Es el término que se usa en muestras de sangre con un exceso de bilirrubina, lo que produce una
interferencia de color, dando lugar a muestras de color amarillo intenso.
 TEMA 10. MUESTRAS SANGUÍNEAS
Gestión de muestras biológicas /8

• Lipemia: Se emplea para definir a muestras de suero o plasma que contienen exceso de lípidos, principalmente
colesterol o triglicéridos. En ciertas ocasiones, la muestra presenta apariencia turbia, mientras que, en otras,
debe ser analizada para conocer la presencia de altos niveles de lípidos.

Fig.7. El personal de laboratorio debe conocer las posibles

interferencias en las muestras de sangre. Orden: suero normal /
suero hemolizado / suero lipémico / suero ictérico.

Recuerda...
Es importante que recordemos en este punto que un procesamiento
preanalítico adecuado debe evitar la hemólisis y la coagulación.

/ 9. Tipos de pruebas según las áreas del laboratorio

Las muestras sanguíneas resultan ser versátiles en cuanto a la cantidad de pruebas que se pueden realizar con ellas.
A continuación, vamos a explicar algunas de las principales según las áreas del laboratorio:

• Bioquímica: Los parámetros bioquímicos se pueden obtener con suero o plasma (lo estudiaremos en detalle
en el siguiente punto). En clínica, se suele utilizar el plasma por su rápida obtención, mientras que el suero se
destina a pruebas especiales en laboratorios de referencia, como vimos en el punto 7.

• Biología molecular: La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es la prueba más frecuente a la hora de
detectar microorganismos que se encuentran en la sangre. Es una técnica en la cual se amplifica el material
genético del patógeno para poder confirmar su existencia. La muestra más habitual es sangre entera con
EDTA refrigerada.

• Hematología: Se realizan principalmente frotis sanguíneos, a partir de una muestra capilar, y hemogramas
(en detalle en el siguiente punto) a partir de sangre entera con EDTA.

• Inmunología: En el caso de las pruebas rápidas clínicas, se utilizan distintas muestras (plasma, suero,
sangre entera, etc.), mientras que, para las serologías, la muestra de elección es el suero conservado en sus
temperaturas óptimas. Los análisis inmunohematológicos necesitan sangre entera con EDTA, no es necesario
que sea sangre recién extraída, pero sí refrigerada.
 TEMA 10. MUESTRAS SANGUÍNEAS
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• Microbiología: Los hemocultivos son el estudio microbiológico que se realiza en sangre para detectar
la presencia de microorganismos, principalmente bacterias. Es una técnica poco habitual: se requieren
condiciones asépticas para la extracción, un gran volumen de muestras y unos requisitos de conservación y
transporte muy específicos, siguiendo siempre las pautas marcadas por el laboratorio.

Fig.8. En el área de Inmunología, los estudios más frecuentes

son aquellos destinados a la compatibilidad para transfusiones
sanguíneas.

9.1. Análisis de la muestra. El hemograma

Como ya hemos comentado en el anterior punto, a partir de las muestras sanguíneas, se pueden analizar un gran
número de sustancias que nos indican el estado de salud. Los estudios más comunes son la bioquímica sanguínea y
el hemograma.

La analítica o rutina de bioquímica es el estudio de la concentración de sustancias químicas en la sangre.

Entre estas sustancias, se distinguen: glucosa (monosacárido relacionado con la producción de energía), urea, ácido
úrico (componentes nitrogenados producto del metabolismo de proteínas y purinas, respectivamente), creatinina
(producto de desecho de los músculos), colesterol (lípido implicado en la formación de células y algunas hormonas),
triglicéridos (lípidos que almacenan calorías y que aportan energía), transaminasas (enzimas que intervienen en
la producción de aminoácidos), fosfatasa alcalina (enzima que elimina grupos fosfatos de ciertas moléculas cuyos
valores elevados pueden indicar enfermedades del hígado), calcio, hierro, potasio, sodio y bilirrubina (sustancia
segregada en el hígado para digerir grasas y eliminada a través de las heces).

El hemograma es el estudio cuantitativo que determina la concentración de los elementos formes de la sangre
(elementos celulares de la sangre: glóbulos rojos, glóbulos blancos y las plaquetas), así como la morfología y
estructura de estos. A continuación, se presentan los principales parámetros y componentes analizables en un
hemograma:

• Glóbulos rojos, glóbulos blancos (linfocitos con función inmunitaria) y plaquetas.

• Hemoglobina (Hb): Proteína de los hematíes, cuya función es transportar oxígeno o dióxido de carbono.

• Hematocrito (Hto): Proporción de glóbulos rojos en la sangre.

• Volumen corpuscular medio (VCM): Es el valor que indica el tamaño promedio de los glóbulos rojos.

• Hemoglobina corpuscular media (HCM): Es el valor que mide el tamaño y el color de la hemoglobina.
 TEMA 10. MUESTRAS SANGUÍNEAS
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• Velocidad de sedimentación globular: Medida que indica actividad inflamatoria en el organismo.

Sabías que...
Debemos saber que los tubos o contenedores de las muestras sanguíneas
variarán en función del estudio o análisis que se pretenda llevar a cabo.

Vídeo 1. “Tubos de recogida de muestras

de sangre”
https://bit.ly/3Sox9EY

/ 10. Caso práctico 2: “Hemocultivos”

Planteamiento: Como se ha comentado en puntos anteriores, el hemocultivo se define como la técnica de estudio
de una muestra de sangre desde una perspectiva microbiológica. Para un correcto diagnóstico, este tipo de estudios
debe completarse con el de otros fluidos, como líquido cefalorraquídeo, orina, muestras del tracto respiratorio, etc.

Nudo: Desarrolla el diseño de un hemocultivo, contemplando los siguientes aspectos: extracción, número de
extracciones, volumen de extracción, frascos usados y transporte.

Desenlace: Para realizar un hemocultivo, se tendrán en cuenta los siguientes aspectos:

• La extracción se debe ser de diferentes lugares a partir de punción venosa, sin intervalo entre las extracciones.
Primero se deposita la sangre en los frascos anaerobios y luego en los aerobios, invirtiendo los frascos para
mezclar la sangre con el medio de cultivo.

• Número de extracciones: Entre 2 o 3 es lo óptimo.

• Volumen de extracción: En adultos, es común 10 ml por toma; en neonatos y niños de hasta 1 año, 2 ml por
toma, y en niños mayores de 1 año, se extraen 4 ml por toma.

• Frascos usados para el hemocultivo: 10 ml de caldo de cultivo en cada frasco. En adultos, hay que poner 5
ml de sangre en cada frasco (anaerobio y aerobio); en neonatos y niños menores de un año, 1 ml, y en niños
mayores de 1 año, hay que añadir 2 ml en cada frasco.

• El transporte de las muestras debe hacerse lo antes posible y solo a temperatura ambiente, durante cortos
períodos. Los hemocultivos nunca deben refrigerarse ni congelarse.

Fig.9. Los hemocultivos son análisis realizados con muestras de

sangre que aportan información microbiológica.
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/ 11. Resumen y resolución del caso práctico de la unidad

La sangre está compuesta por el plasma sanguíneo y por los componentes celulares: eritrocitos, glóbulos blancos
y plaquetas. Dependiendo del tipo de muestra de sangre que se quiera extraer, se diferencian diversas técnicas:
punción venosa, arterial y capilar.

Por otro lado, las muestras sanguíneas pueden ser analizadas para obtener información bioquímica (analítica),
microbiológica (hemocultivos) o cuantitativa de los componentes celulares (hemograma). En función de los
resultados que se pretende obtener y, por tanto, del tipo de análisis, se usarán aditivos (anticoagulantes, gel de
separación de suero o agentes estabilizantes) contenidos en los tubos para garantizar su manipulación y transporte.

MUESTRAS SANGUÍNEAS

Posibles Tipos de
Obtención de
Composición Tipos de Técnicas de complicaciones. pruebas según
Aditivos muestras de
de la sangre muestra extracción Prevención de las áreas del
suero
errores laboratorio

Eritrocitos Sangre Venosa Estabilizantes Hemólisis Bioquímica

venosa
Leucocitos Sangre Arterial Geles Ictericia Parámetros
arterial separadores bioquímicos
Trombocitos Capilar del suero Lipemias
Sangre Biología
capilar Anticoagulantes molecular

PCR

Hematología

Frotis
Hemogramas
RBC, WBC,
plaquetas
Hb
Hto
VCM
HCM
VSG

Fig.10. Esquema resumen del tema.

Resolución del caso práctico de la unidad

En este caso práctico, se nos presenta una situación muy común que puede estudiarse partiendo del análisis de la
muestra de sangre del paciente, concretamente de una analítica o de un análisis bioquímico. Como hemos visto en
este tema, a partir de este estudio, se obtiene información sobre la concentración de sustancias químicas, entre ellas
la glucosa. Cuando hablamos de diabetes, se trata de la falta de la hormona insulina y, por tanto, de altos niveles
de glucosa en sangre. Los niveles de glucosa plasmática en ayunas deben estar por debajo de 99. Así, cuando estén
entre 100 y 125, se considera prediabetes, y por encima de 126, diabetes.
 TEMA 10. MUESTRAS SANGUÍNEAS
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/ 12. Bibliografía
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Recuperado de: https://www.revista-portalesmedicos.com/revista-medica/test-de-allen/

Reiriz Palacios, J. (s. f.). Sistema inmune y la sangre. Infermera Virtual. Col·legi Oficial d’Infermeres i Infermers de Barcelona.