LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA

CUADERNILLO DE ENSAYOS 6°
LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA, BIOLOGICA Y MICROBIOLOGICA

CONTENIDOS MINIMOS
 ENSAYO DE LABORATORIO N° 1

TEMA: IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLECULAS

OBJETIVOS:
1. Comprobar la presencia de algunas moléculas de importancia biológica
en muestras frescas.
2. Identificar algunas biomoléculas utilizando reactivos químicos.
3. Comparar los principales grupos de compuestos orgánicos con relación a su composición
química y función.

INTRODUCCIÓN
Toda materia viva está compuesta por un grupo reducido de moléculas combinadas
entre sí: el agua y las sales minerales, los hidratos de carbono (o carbohidratos), los
lípidos, las proteínas, los ácidos nucleicos, las enzimas, las vitaminas y las
hormonas.
Algunas de estas moléculas funcionan como parte estructural de las células y los
tejidos del cuerpo de los organismos.

CARBOHIDRATOS
Son el combustible para la célula (proveedores de energía), y la celulosa es un
componente estructural de las plantas.
Los carbohidratos se clasifican como:
 Monosacáridos o azucares simples, los cuales pueden tener de tres a siete átomos
de carbono en su estructura. La glucosa es el ejemplo más conocido de las hexosas
(azúcar de seis átomos de carbono).
 Disacáridos o azucares dobles, los cuales están constituido por dos
monosacáridos, como por ejemplo la sacarosa que está conformada por una
glucosa unida a una fructosa.
 Polisacáridos los cuales forman largas cadenas de monosacáridos como es el caso
del almidón que se encuentran en los vegetales.

LIPIDOS
Son grupos heterogéneos de compuestos que poseen una consistencia grasosa o
aceitosa, siendo más o menos insolubles en agua y solubles en disolventes orgánicos
(como por ejemplo: éter, cloroformo, benceno, etc.). Entre los lípidos de importancia
biológicas se encuentran las grasa neutras, fosfolipidos, esteroides, carotenoides y
ceras. Estas moléculas son combustibles biológicos importantes, sirven de
componentes estructurales de las membranas celulares.
Los lípidos más abundantes en los seres vivos son las grasas neutras.

PROTEINAS
Las proteínas son moléculas complejas formadas por unidades más simples llamadas
aminoácidos, los cuales están unidos por enlaces pepiticos. Estos compuestos son
esenciales en la química de la vida y son componentes estructurales de las células y
tejidos. El crecimiento adecuado, la restauración y el mantenimiento del organismo
dependen del abastecimiento de estas sustancias. Las proteínas son específicas de
cada especie, varían un poco de una especie en otra, es el principal factor de las
diferencias que median entre una especie y otra.
 ACIDOS NUCLEICOS

Las células contienen dos variedades de moléculas conocidas como acido nucleícos:
el acido desoxirribonucleico (ADN) y el acido ribonucleico (ARN). Ambos participan en
la transmisión, de información genética y en la determinación de las proteínas que
una célula debe producir. El ADN es el material hereditario de las células y contienen
instrucciones para la producción de todas las proteínas que el organismo necesita.
Los ácidos nucleícos son polímeros de nucleótidos. Los nucleótidos son unidades
moleculares que constan de un azúcar de cinco carbonos (pentosa), ya sea ribosa o
desoxirribosa; un grupo fosfato; y una base nitrogenada.

MATERIALES

Tubo de ensayo Reactivo de Biuret Pera

Gradillas Lugol Aceite
Vasos de precipitado Butanol Maicena
Probetas goteros Sudan IV Huevo
Capsula de petri Leche Pipetas de 1ml
Soportes Papa Reactivo de Feeling
Rayador de verduras Reactivo Fehling Varilla de vidrio

PROCEDIMIENTO

1.- Prueba para determinar la presencia de almidón:

a) coloque una pequeña muestra de papa rayada en un tubo de ensayo y añada 1ml de
agua.
b) Agregue 2 o 3 gotas de Lugol y agite.
c) Observe el color que desarrolla la reacción.
d) Repita el procedimiento usando
una pequeña cantidad de maicena.
Registra en tu cuaderno los resultados.

2.- Prueba para azucares (monosacáridos):

a) Raye un poco de pera y coloque una porción en un tubo de ensayo.

b) Agregue al tubo 10 gotas de agua y 1ml de reactivo de Fehling.
c) Coloque el tubo en un vaso precipitado con agua hirviendo por 30 segundos y
observe el color que desarrolla la reacción.
Registra en tu cuaderno los resultados.
3.- Prueba para proteínas:

a) Rompa suavemente un huevo de gallina y recoja la clara (ovoalbumina) en un vaso

precipitado:
b) Diluya la ovoalbumina: por cada 2 partes de ovoalbumina agregue una parte y
luego revuelva suavemente con una varilla de vidrio para agitación, hasta que
 parezca homogénea.
c) Coloque 1ml de ovoalbumina diluida en un tubo de ensayo y agregue unas 5 a 7
gotas de reactivo de Biuret suavemente.
d) Observe el color que desarrolla la reacción.
e) Tome otro tubo de ensayo y repita usando 2ml de leche: agregue 5 a 7 gotas de
reactivo de Biuret y observe el color de la reacción.
Registre sus resultados en cuaderno.

4.- Prueba para lípidos. (Solubilidad de las grasas)

a) Coloque 10ml de aceite en un tubo de ensayo.

b) Agregue 2ml de butanol, agite bien y observe que sucede.
c) En otro tubo de ensayo, coloque 10ml de aceite y trate de mezclarla con 10ml de agua.
d) Observe que sucede.
En la primera prueba que realizamos con la papa rayada y la maicena dio como resultado
un color morado, con la sustancia de Lugol ya que esta determina si hay presencia de
almidón o si es un polisacárido.

En la segunda prueba se realizada de la presencia de monosacáridos en la cual

utilizamos pera le agregamos reactivo de Benedict se torno de color turquesa.

En la prueba con el azúcar se le añadió Benedict en la cual se torno un color naranja.

En la tercera prueba de presencia de proteínas usamos la albumina del huevo de gallina

en el cual usamos dos partes: en una parte agregamos agua y color que dio resultado fue
un color lila. En la segunda parte de la albumina agregamos Biuret se puso de color
morado en la cual se dio dos fases.
En otro tubo de ensayo utilizamos leche y le agregamos Biuret y se observo que dio un color
blanco.

HIDRATOS DE CARBONO
 Hidratos de Carbono

1. Introducción

La palabra ‘Hidrato de Carbono’ deriva históricamente de que la glucosa, el primer

carbohidrato sencillo que se obtuvo puro, tiene la fórmula molecular C 6H12O6 y en un principio
se creyó que era un “hidrato de carbono, C 6(H2O)6”. Este punto de vista se abandonó muy
pronto pero su nombre persistió.
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Ahora su término se usa para referirse a un conjunto de compuestos que son

polihidroxialdehídos, polihidroxicetonas o compuestos que, por hidrólisis se convierten en
ellos, comúnmente llamados “azúcares”.
Las plantas sintetizan estos compuestos durante la fotosíntesis. Luego muchas moléculas de
glucosa se enlazan químicamente en la planta para almacenarse como celulosa o almidón. Se
ha estimado que más del 50% del peso seco de la biomasa terrestre consiste en polímeros de
glucosa. El consumo y metabolismo de los carbohidratos proporciona la mayor fuente
energía que necesitan los organismos.
Los carbohidratos se clasifican generalmente en dos grupos: simples y complejos. Los
azúcares simples (o monosacáridos) son carbohidratos como la glucosa y la fructosa que no
se pueden convertir por hidrólisis en azúcares más pequeños. Los carbohidratos complejos
están formados por dos o más azúcares simples enlazados.
La sacarosa (azúcar de mesa) es un disacárido formado por una glucosa enlazada con una
fructosa. La celulosa es un polisacárido estructurado con varios millares de unidades de
glucosa enlazadas. La hidrólisis de un polisacárido lo rompe en sus monosacáridos
constituyentes. Existen varios sistemas para realizar hidrólisis, en las células lo hacen las
enzimas.
Las propiedades químicas y físicas de los carbohidratos varían de acuerdo a su composición,
por lo que se han diseñado pruebas específicas para su detección y cuantificación.

ENSAYO DE LABORATORIO N° 2
TEMA: HIDRATOS DE CARBONO

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2. Objetivos:
- Comprobar experimentalmente propiedades químicas características de los
hidratos de carbono.

3. Métodos:
3.1. Comportamiento en disoluciones acuosas
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En general, los azúcares son muy solubles en agua y con frecuencia forman jarabes
sobresaturados cuando sus disoluciones se concentran por ebullición o evaporación.

Materiales:
1. Glucosa (stevia)
2. Sacarosa (azúcar común)
3. Almidón
4. Balanza
5. 3 Vasos de precipitados de 100 ml
6. Agua destilada

Procedimiento:
Prepare soluciones al 1 % P/V de glucosa (se puede utilizar stevia), sacarosa (azúcar
común) y almidón. Observe las disoluciones, analice y resérvelas para los siguientes ensayos.
3.2. Hidrólisis ácida

Materiales:
1. 2 Tubos de ensayo
2. 2 Pipetas de 5 ml
3. HCl concentrado
4. Gotero
5. Platina calefactora
6. NaOH 20% P/V
7. Cinta de pH

Procedimiento:
Coloque en dos tubos de ensayo 3 ml de la solución de sacarosa y almidón, respectivamente.
Agregue 5 gotas de HCl concentrado a cada uno. Caliente a baño maría durante 20 minutos.
Luego de enfriar, neutralice con NaOH 20 % P/V, utilizando una cinta de pH para su
identificación. Observe y reserve para los siguientes ensayos.

3.3. Poder reductor (reconocimiento de las funciones aldehído y cetona)

Una característica química principal de los hidratos de carbono es la presencia de un grupo

carbonilo (aldehído o cetona), por lo cual, el poder reductor es una de las propiedades que se

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 emplea en su determinación. Sin embargo, no todos los azúcares tienen esta propiedad, ya
que el poder reductor de los carbohidratos está condicionado a la presencia de un grupo
aldehído libre o un grupo cetónico adyacente a un grupo hidroximetil (que permite su
taumerización a aldosa en medio básico).

3.3.1. Reacción de Fehling: En presencia de carbohidratos con poder reductor el

complejo ion cúprico (del hidróxido cúprico) es reducido en ambiente alcalino para
formar óxido cuproso. De esta manera, a partir de una solución inicial de color azul
(CuSO4) debido al Cu2+ (oxidado) se obtiene un precipitado color rojo ladrillo (Cu 2O)
por el Cu+ (reducido). Como el hidróxido cúprico es insoluble en agua, se encontró
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una forma de acoplarlo a una molécula orgánica. Por eso el reactivo de Fehling se
compone de dos soluciones: La solución A es de color celeste y está formada por
sulfato cúprico pentahidratado (CuSO4∙5H2O); y la solución B es incolora y contiene
NaOH como medio básico tartrato de sodio y potasio (como estabilizador del Cu2+).
Para su uso se mezclan partes iguales de las dos soluciones, obteniéndose una
solución de color azul.

3.3.2 Reacción de Tollens: En presencia de oxidantes suaves, y aún al aire, los aldehídos se
oxidan con facilidad, debido a la existencia del hidrógeno en su grupo funcional (R-
C=O), transformándose en ácidos carboxílicos. La prueba de Tollens se basa en esta
identificación ya que el azúcar reductor que contiene aldehídos, reduce al catión Ag + a
plata metálica (Ag0) que se deposita en la superficie del recipiente formando un
espejo característico.

Materiales:
3.4. Hidrólisis ácida

Materiales:
1. 2 Tubos de ensayo
2. 2 Pipetas de 5 ml
3. HCl concentrado
4. Gotero
5. Platina calefactora
6. NaOH 20% P/V
7. Cinta de pH

Procedimiento:
Coloque en dos tubos de ensayo 3 ml de la solución de sacarosa y almidón, respectivamente.
Agregue 5 gotas de HCl concentrado a cada uno. Caliente a baño maría durante 20 minutos.
Luego de enfriar, neutralice con NaOH 20 % P/V, utilizando una cinta de pH para su
identificación. Observe y reserve para los siguientes ensayos.

3.5. Poder reductor (reconocimiento de las funciones aldehído y cetona)

Una característica química principal de los hidratos de carbono es la presencia de un grupo

carbonilo (aldehído o cetona), por lo cual, el poder reductor es una de las propiedades que se
emplea en su determinación. Sin embargo, no todos los azúcares tienen esta propiedad, ya

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 que el poder reductor de los carbohidratos está condicionado a la presencia de un grupo
aldehído libre o un grupo cetónico adyacente a un grupo hidroximetil (que permite su
taumerización a aldosa en medio básico).

3.3.1. Reacción de Fehling: En presencia de carbohidratos con poder reductor el

complejo ion cúprico (del hidróxido cúprico) es reducido en ambiente alcalino para
formar óxido cuproso. De esta manera, a partir de una solución inicial de color azul
(CuSO4) debido al Cu2+ (oxidado) se obtiene un precipitado color rojo ladrillo (Cu 2O)
por el Cu+ (reducido). Como el hidróxido cúprico es insoluble en agua, se encontró
una forma de acoplarlo a una molécula orgánica. Por eso el reactivo de Fehling se
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compone de dos soluciones: La solución A es de color celeste y está formada por

sulfato cúprico pentahidratado (CuSO4∙5H2O); y la solución B es incolora y contiene
NaOH como medio básico tartrato de sodio y potasio (como estabilizador del Cu2+).
Para su uso se mezclan partes iguales de las dos soluciones, obteniéndose una
solución de color azul.

3.3.3 Reacción de Tollens: En presencia de oxidantes suaves, y aún al aire, los aldehídos se
oxidan con facilidad, debido a la existencia del hidrógeno en su grupo funcional (R-
C=O), transformándose en ácidos carboxílicos. La prueba de Tollens se basa en esta
identificación ya que el azúcar reductor que contiene aldehídos, reduce al catión Ag + a
plata metálica (Ag0) que se deposita en la superficie del recipiente formando un
espejo característico.

Materiales:

1. Gradilla para tubos de ensayo,

2. 14 tubos de ensayo,
3. Platina calefactora
4. Reactivos: Fehling y Tollens (Tollens: solución de nitrato de plata (AgNO3)
amoniacal, se obtiene agregando amoníaco a una solución de nitrato de plata)
5. Sustancias: glucosa, fructosa (se puede utilizar un trozo de fruta), lactosa,
sacarosa, sacarosa hidrolizada, almidón, almidón hidrolizado (soluciones
preparadas anteriormente en la sección 3.2).
Procedimiento: En los tubos de ensayo colocar 1 ml de solución al 1 % P/V de los
diferentes azúcares; agregar a cada uno 0,5 ml de reactivo de Fehling; calentar
suavemente; observar y registrar en la tabla; analizar los resultados.

Posteriormente preparar nuevamente los tubos de ensayo con las diferentes

sustancias pero agregando a cada uno 0,5 ml de reactivo de Tollens; calentar
suavemente; observar y registrar en la tabla; analizar los resultados.

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 1 2 3 4 5 6 7
Glucosa 1 ml
Sacarosa 1 ml
Sacarosa 1 ml
hidrolizada
Almidón 1 ml
Almidón 1 ml
hidrolizado
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Fructosa 1 ml
Lactosa 1 ml
Resultado
Fehling (+/-)
Observaciones

Resultado
Tollens (+/-)
Observaciones

3.4 Polisacáridos – Test de Lugol

El test de Lugol se utiliza para la identificación de almidón u otros polisacáridos. Una

solución de yodo-diyodo disuelto en una solución acuosa de yoduro de
potasio reacciona con almidón produciendo una coloración azul-violácea por la formación
de un complejo generado por la hélice de las cadenas de glucosa y los átomos de iodo
retenidos en ella.

Materiales:
1. Gradilla para tubos de ensayo
2. 7 tubos de ensayo
3. Solución de Lugol
4. Sustancias: almidón, almidón hidrolizado, solución con papa hervida, agua de
arroz, sacarosa, fructosa, lactosa

Procedimiento: Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de solución de almidón al 1 %. Agregar

5 gotas de reactivo de Lugol. Observar y registrar; analizar los resultados. Realizar lo
mismo con las otras sustancias.

Luego calentar los tubos unos minutos y observar los cambios. Dejar enfriar.

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 1 2 3 4 5 6 7
Almidón 3 ml
Almidón hidrolizado 3 ml
Papa hervida 3 ml
Agua de arroz 3 ml
Sacarosa 3 ml
Fructosa 3 ml
Lactosa 3 ml
Resultado Lugol (+/-)
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Observaciones

En base a los fundamentos de las reacciones realizadas previamente, complete el

siguiente cuadro:

Tipo de Solubilidad Reacción con Reacción con Reacción con

glúcido en agua Fehling (+/-) Tollens (+/-) Lugol (+/-)
Glucosa
Sacarosa
Sacarosa hidrolizada
Almidón
Almidón hidrolizado
Fructosa
Lactosa

ENSAYO N°3

Propiedades de los monosacáridos: GLUCOSA

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 Material: tubos de ensayo, gradilla, pipeta, pinza de madera, mechero, varilla de

vidrio Sustancias: glucosa, reactivos de Fehling, solución diluida de azul de

metileno, solución de
NAOH, H2O destilada.

Procedimiento:
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 Observar el estado de agregación y el color de glucosa. Colocar una pequeña

porción en la lengua para percibir el sabor.
 Colocar en un tubo de ensayo glucosa hasta 1 cm de altura. Tomar el tubo con la
pinza de madera y llevar a la llama del mechero. Observar las transformaciones
que ocurren. ¿Se pueden identificar algunas de las sustancias que se forman?
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 Colocar en un tubo de ensayo 10 ml de agua y agregar dos puntas de
espátula de glucosa. Agitar con la varilla de vidrio. ¿Qué se puede decir de su
solubilidad? Guardar esta solución para los siguientes ensayos
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a) Reacción de azul de metileno

 En un tubo de ensayo colocar la mitad de la solución de glucosa obtenida
 Agregar 2 ml de solución de NAOH y tres a cuatros gotas de azul de metileno
 Calentar suavemente y solo hasta que la coloración azul desaparezca
 Dejar enfriar bajo el agua fría del surtidor
 Agitar el tubo y observar el cambio producido
 ¿Qué causa la decoloración del colorante?
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b) Reacción de Fehling
 Colocar en el mismo tubo de ensayo 2 ml de solución de Fehling A y 2 ml de
Fehling B. Agregar el resto de la solución de glucosa y calentar
 Observar los cambios producidos
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  ¿Qué grupo funcional orgánico causa esta transformación?

Propiedades de los disacáridos: SACAROSA

Materiales: gradilla con tubos de ensayo, vaso de precipitados, pinza de madera,

varilla de vidrio, pipeta, trípode con tela metálica

Sustancias: reactivos de Fehling, acido HCl

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concentrado, sacarosa Procedimiento:

 Observar los caracteres físicos de la sacarosa: color, aspecto, sabor

 Calentar una pequeña porción de la muestra en un tubo de ensayo. Observar el
resultado. Acercar la base del tubo a la llama ¿Qué fenómeno acurre? ¿Qué
residuo a quedado en el fondo?
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 ¿Qué compuesto química es el producto solido formado?
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c) test de Tollens
 Preparación del reactivo de Tollens: añadir 2 gotas de una disolución de
NaOH al 5% a 1 ml de disolución acuosa de AgNO3 al 5%. Agitar el tubo y añadir
gota a gota y con agitación NH4OH 2N, hasta que se consiga disolver el
precipitado de AgOH, que previamente se había formado
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 Nota: Este reactivo debe almacenarse en un recipiente opaco, ya que puede

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 alterarse por la acción de la luz. Además, hay que tener mucha precaución con él,
ya que las soluciones de óxido de plata, si se dejan secar, forman unos cristales
negros que son altamente explosivos (plata
fulminante).

 Procedimiento: En tres tubos de ensayo poner, respectivamente 1 ml del

reactivo de Tollens y a continuación añádele a cada uno 1 ml de cada una de las
sustancias que aparecen en la tabla. Se calientan todos los tubos de ensayo al
"baño María" sin agitar durante unos 20 minutos. Es importante que no agites los
tubos de ensayo para facilitar la formación de un precipitado de espejo de plata.
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Compuesto Observaciones
Acetona
Glucosa
Sacarosa

 En un tubo de ensayo colocar 5 ml de agua y agregar dos puntas de espátula

de sacarosa. Agitar con la varilla de vidrio. Observar la solubilidad.
 Con la solución obtenida en el ensayo anterior, realizar la reacción de Fehling
con la técnica indicada para la glucosa ¿Qué observa? ¿Qué conclusión se
obtiene?
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Hidrólisis o inversión de la sacarosa

 En un vaso de precipitado colocar 10 ml de agua y 2 puntas de espátula de sacarosa

 Agregar 3 o 4 gotas de HCl concentrado, usando una pipeta o frasco gotero
 Colocar el vaso sobre un trípode con tela metálica
 Calentar muy suavemente de modo que hierva durante cinco minutos, pero
evitando la evaporación exagerada de agua
 Dejar enfriar y practicar nuevamente la reacción de Fehling
 ¿Qué resultados se obtuvo ahora? ¿A qué se debe?
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 Escribir una ecuación que interprete el hecho producido
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6.1. Propiedades de los polisacáridos: ALMIDÓN

Materiales: tubos de ensayo y gradilla, varilla de vidrio, vaso de precipitados mediano y

grande, cuchillo, rallador, tela para filtrar (lienzo)
Sustancias: HCl concentrado, reactivo de Lugol (I2 iodo sólido + IK) una capa
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Procedimiento:
a) Extracción de Almidón

 Lavar y pelar la papa. Rallarla y colocar el líquido y la papilla que se forma

en un vaso de precipitados.
 Agregar 100 ml de agua removiendo con una varilla
 Tamizar a través de la tela, recogiendo el filtrado en otro vaso de precipitados.
 Dejar este último en reposo para que sedimenten las partículas de almidón.
 Inclinar con cuidado el vaso para que decante el líquido sobrenadante, que
se desecha. El resto es almidón

b) Propiedades de Engrudo de Almidón

 En un vaso de precipitados colocar 50 ml de agua y calentar a ebullición

 Mientras tanto, agregar 10 ml de agua fría al almidón y agitar con la varilla
para formar una suspensión.
 Agregar esa suspensión al agua en ebullición.
 Agitar con cuidado hasta que aparezca una solución opalescente, que es
el engrudo de almidón.
c) Caracterización del Almidón

 Colocar en un tubo de ensayo 3 ml de engrudo de almidón

 Agregar unas gotas de solución Lugol
 Observar la coloración
 Calentar a la llama y observar
 Enfriar el tubo bajo un chorro de agua fría. Observar

d) Hidrólisis ácida seriada

 En un vaso de precipitados grande colocar agua a calentar, que servirá como

baño maría
 En 6 tubos de ensayo colocar 5 ml de engrudo de almidón con 3 gotas de HCl
concentrado.
 Colocar en el baño, con el agua hirviendo
 Los tubos se retiran del baño a los: 5, 10, 15, 20, 25 y 30 minutos,
respectivamente
 Al retirar cada tubo, enfriar y agregar 3 gotas del reactivo de Lugol
 ¿A qué se deben las diferencias que presentan cada tubo?

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2. Conclusión:
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En un cuadro los resultados obtenidos considerando: color, estado, sabor,

comportamiento en el calor, solubilidad en agua, poder reductor.

Características GLUCOSAS SACAROSA ALMIDON

Color
Olor
Sabor
Aspecto/Estado
Solubilidad en agua
Comportamiento con el calor
Poder reductor
Reacción con azul de metileno
Reacción de Fehling
Reacción de Lugol
Reacción de Tollens

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