UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

ESCUELA PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

Informe 1:
Reconocimiento de metabolitos primarios funcionales y estructuras:
Carbohidratos

Curso:

Histoquímica Vegetal

Profesor:

Manuel Marín Bravo

Alumnas:

Garcia Flores, Rocío Angélica 17100091

Tovalino Alvarado, Sanyori Nicoll 18100024

2022 – I
 Informe 1:
Reconocimiento de metabolitos primarios funcionales y estructuras:
Carbohidratos

INTRODUCCIÓN
Las plantas contienen numerosos compuestos orgánicos denominados “metabolitos primarios”, entre los que
se encuentran en primer término, los azúcares o carbohidratos, que se producen como resultado de la
fotosíntesis y son también muy usados durante el crecimiento y desarrollo de la planta (Verdecía, et.al,
2021).
Estos metabolitos primarios pueden ser detectados en las plantas mediantes pruebas histoquímicas, los dos
protocolos más conocidos y usados son Molish y Fehling. La primera, la ‘reacción de Molish’, mide la
presencia de glúcidos (carbohidratos) en una muestra de alfa naftol al 2% y etanol de 96% de pureza,
además de unas gotas de ácido sulfúrico. Esta reacción se deriva en honor del botánico austríaco Hans
Molish. Por otro lado, existe también la ‘reacción de Fehling’, esta fue desarrollada por el químico alemán
Hermann von Fehling, esta prueba, a diferencia de Molish, se realiza en presencia de calor.
También, hay metabolitos que pueden mostrarse en forma de cristales como la inulina, esta, posee muchas
propiedades que se pueden aprovechar en diversas áreas, propiedades entre las que resaltan aquellas
enfocadas a la industria de alimentos por su capacidad de ayudar en la absorción de minerales como calcio y
magnesio, necesarios para el organismo, y en la prevención de cáncer de colon por el aumento de las
bacterias benéficas en el intestino. (Campos, et.al 2013)

MATERIALES Y MÉTODOS
Reacción de Molish: Se utilizan tubos de ensayo en los cuales se coloca la muestra líquida en la que se
quiere detectar la presencia de carbohidratos y con un gotero se echan unas gotas de Molisch “A” (alfa
naftol 2% en alcohol), se agita el tubo y luego se agregan unas gotas de ácido sulfúrico (H2SO4) por las
paredes del tubo, en caso de que haya presencia de carbohidratos se formará un anillo de coloración oscura
en la superficie de la solución acuosa, el color tiende a ser un violeta oscuro.
Reacción de Fehling: Para esta reacción se necesita calor, por lo que se usará una cocinilla, se tendrá la
solución problema en un tubo de ensayo, a esta se le debe añadir (utilizando un gotero para cada uno) unas
gotas del reactivo ‘Fehling A’ y luego unas gotas del reactivo ‘Felhing B’. Para facilitar la aplicación de
calor, se puede usar un vaso beaker en donde se colocará el tubo con un poco de agua para realizar un baño
maría por unos 5 a 7 minutos, en caso de resultar positiva la prueba debería colorearse de rojo ladrillo.
Observación de cristales de inulina: Para poder observar los cristales, se deben hacer precipitar estos con
ayuda del solvente utilizado para la cristalización de la inulina que es el etanol, se debe tener la muestra en
frascos tipo gerber sumergidos en alcohol y luego pasarlos directamente a una lámina portaobjetos
seguido de una laminilla cubreobjetos.
Reacción con lugol: Se utilizará para la detección de almidón, se puede aplicar directamente el lugol con un
gotero sobre un corte o raspado de la muestra o se puede hacer uso de alcohol yodado como una
alternativa.
Ácido sulfúrico: Utilizado junto al lugol para el reconocimiento de celulosa.
 FORMATO: PROTOCOLO DE ANÁLISIS HISTOQUÍMICO
Nombre común: Alumnas:
Mandarina - Tovalino Alvarado, Sanyori Nicoll
Nombre científico:
- Garcia Flores, Rocio Angélica
Citrus cf. reticulata
TEMA:
Reconocimiento de carbohidratos Fecha:
05 / 11 / 2022

FOTOGRAFÍA DE LA FOTOGRAFÍA DEL FOTOGRAFÍA DE LA

PLANTA CORTE OBSERVACIÓN REALIZADA

Tipo de corte:
Gajo de mandarina
Reactivo::
Nombre científico:
Molish
Citrus cf. reticulata
Lugar de origen: Aumento:
Nativa del Sudeste Asiático y Ninguno Positivo
Filipinas Coloración o reacción:
Hábitat:
Anillo púrpura
Zonas tropicales

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Observamos una reacción positiva al entrar en contacto el jugo de la mandarina con el reactivo de Molish,
la reacción observada se fundamenta porque el reactivo de Molish es empleado para el reconocimiento de
carbohidratos de manera general. La reacción positiva es visualizada cuando en la interfase se presenta un
anillo púrpura o violáceo, siendo indicativa de la presencia de carbohidratos. Las reacciones internas que
suceden son explicadas mediante la hidrólisis de los polisacáridos y disacáridos con el ácido sulfúrico
concentrado (H2SO4), convierte a ambos carbohidratos a su mínima expresión (monosacáridos); los
monosacáridos reaccionan con el α-naftol del reactivo de Molish convirtiéndose en derivados de furfural o
5-hidroximetil furfural los cuales formarán el anillo color púrpura.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
* Verdecía, D. M., Herrera-Herrera, R., Torres, E., Sánchez, A. R., Hernández-Montiel, L. G., Herrera, R.
S., ... & López, S. (2021). Metabolitos primarios y secundarios de seis especies de árboles, arbustos y
leguminosas herbáceas. Cuban Journal of Agricultural Science, 55(1), 77-93.
 FORMATO: PROTOCOLO DE ANÁLISIS HISTOQUÍMICO
Nombre común: Alumnas:
Mandarina - Tovalino Alvarado, Sanyori Nicoll
Nombre científico:
- Garcia Flores, Rocio Angélica
Citrus cf. reticulata
Fecha:
TEMA:
05 / 11 / 2022
Reconocimiento de carbohidratos

FOTOGRAFÍA DE LA FOTOGRAFÍA DEL FOTOGRAFÍA DE LA

PLANTA CORTE OBSERVACIÓN REALIZADA

Tipo de corte:
Gajo de mandarina

Nombre científico: Coloración o reacción:

Citrus cf. reticulata Reacción de Fehling
Lugar de origen: Aumento:
Nativa del Sudeste Asiático y Ninguno
Filipinas
Hábitat:
Zonas tropicales Positivo Control

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
Observamos una reacción positiva al entrar en contacto el reactivo de Fehling (A y B) con el jugo de la
mandarina, esta reacción se fundamenta porque el reactivo de Fehling (A (solución cúprica) y B (solución
alcalina)) es empleado para detectar sustancias reductoras, y en caso de nuestro experimento al
reconocimiento de azúcares reductores. Al explicarlo a nivel de las reacciones químicas que se dan
internamente, el jugo de Citrus presenta una gran cantidad de aldehídos los cuales presentan un poder
reductor en el grupo carbonilo. Este poder reductor oxidó el reactivo Fehling (ion complejo de cobre (II))
dando como producto una sal cúprica de cobre (II), el cual es visualizado en forma de un precipitado color
rojo. Entonces, el carbohidrato al reducir el reactivo de Fehling se puede afirmar que es un azúcar reductor.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
*Verdecía, D. M., Herrera-Herrera, R., Torres, E., Sánchez, A. R., Hernández-Montiel, L. G., Herrera, R. S.,
... & López, S. (2021). Metabolitos primarios y secundarios de seis especies de árboles, arbustos y
leguminosas herbáceas. Cuban Journal of Agricultural Science, 55(1), 77-93.
 FORMATO: PROTOCOLO DE ANÁLISIS HISTOQUÍMICO
Nombre común: Alumnas:
Chambira - Tovalino Alvarado, Sanyori Nicoll
Nombre científico:
- Garcia Flores, Rocio Angélica
Astrocaryum cf. chambira
TEMA: Fecha:
Reconocimiento de celulosa 05 / 11 / 2022

FOTOGRAFÍA DE LA FOTOGRAFÍA DEL FOTOGRAFÍA DE LA

PLANTA CORTE OBSERVACIÓN REALIZADA

Positivo
Coloración o reacción:
Azul
Nombre científico: Aumento:
Astrocaryum chambira 100x
Tipo de corte:
Lugar de origen:
Corte transversal de la hoja
Amazonia, la cuenca del Orinoco y
de Trinidad y Tobago Reactivo:
Hábitat: Lugol + ácido sulfúrico.
Selvas húmedas

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

▪ La reacción muestra cómo los tejidos de paredes celulósicas reaccionan positivamente en una gama
de colores violáceos azulados al lugol con el ácido sulfúrico. Esta especie de Astrocaryum posee
fibras corticales, las fibras gelatinosas se caracterizan por su elevado contenido de celulosa y la
ausencia de lignina (presente en el tejido no vascular de algunas monocotiledóneas). (Evert, 2008)

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
*Martel Gora, C. G. (2012). Anatomía de la raíz de especies peruanas de astrocaryum g. ey.(ARECACEAE)
icipal de Crédito Popular de Lima en el periodo del 2007 al 2010.

*Marín Bravo, M. J. (2013). Fibras foliares de Astrocaryum chambira Burret (Arecaceae) y especies afines,
caracterización histológica y físico-química en relación a su potencial productividad comercial.
 FORMATO: PROTOCOLO DE ANÁLISIS HISTOQUÍMICO
Nombre común: Alumnas:
Fruto del coco - Tovalino Alvarado, Sanyori Nicoll
Nombre científico:
- Garcia Flores, Rocio Angélica
Cocos cf. nucifera
Fecha:
TEMA:
05 / 11 / 2022
Reconocimiento de celulosa

FOTOGRAFÍA DE LA FOTOGRAFÍA DEL FOTOGRAFÍA DE LA

PLANTA CORTE OBSERVACIÓN REALIZADA

Tipo de corte:
Nombre científico: Raspado de coco
Cocos cf. nucifera
Lugar de origen: Coloración o reacción:
Lugol
Hábitat: Aumento:
Selvas húmedas Ninguno

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

La reacción del lugol en la muestra vegetal de coco se realiza para detectar celulosa en las paredes celulares,
a simple vista una vez aplicados los reactivos, podemos ver como ciertas zonas de la muestra comienzan a
tomar una coloración más oscura que se diferencia del resto, ahí es donde se ha detectado el carbohidrato
celulosa.
 FORMATO: PROTOCOLO DE ANÁLISIS HISTOQUÍMICO
Nombre común: Alumnas:
Papa - Tovalino Alvarado, Sanyori Nicoll
Nombre científico:
- Garcia Flores, Rocio Angélica
Solanum cf. phureja
Fecha:
TEMA:
05 / 11 / 2022
Reconocimiento de almidón

FOTOGRAFÍA DE LA FOTOGRAFÍA DEL FOTOGRAFÍA DE LA

PLANTA CORTE OBSERVACIÓN REALIZADA

Tipo de corte:
Raspado de papa
Coloración o reacción:
Nombre científico: Coloración morada con alcohol
Solanum cf. phureja yodado
Lugar de origen:
Aumento:
Hábitat: 100X

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

La reacción de alcohol yodado puede funcionar como una alternativa más ‘simple’ y de más fácil acceso si
se busca una reacción como la del lugol, esto se ha evidenciado en la detección del almidón de papa, si bien
la coloración no nos da un contraste tan claro como para ver las estrías de los almidones (algo que sí es
posible comuna buena práctica utilizando lugol), la técnica se puede mejorar para obtener mejores
resultados.
 FORMATO: PROTOCOLO DE ANÁLISIS HISTOQUÍMICO
Nombre común: Alumnas:
Dahlia - Tovalino Alvarado, Sanyori Nicoll
Nombre científico:
- Garcia Flores, Rocio Angélica
Dahlia
Fecha:
TEMA:
05 / 11 / 2022
Reconocimiento de inulina

FOTOGRAFÍA DE LA FOTOGRAFÍA DEL FOTOGRAFÍA DE LA

PLANTA CORTE OBSERVACIÓN REALIZADA

Tipo de corte:
Corte transversal de la raíz
Coloración o reacción:
Coloración
Nombre científico:
Dahlia Aumento:
Lugar de origen: Ninguno

Hábitat:

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

La inulina no puede ser observada a simple vista en una muestra de Dahlia o del vegetal que la contenga, se
deben visualizar en forma de cristales y esto lo obtendremos haciendo uso de alcohol y ácido sulfúrico.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

* Campos, M. F., Cotrina, L., & Guzmán, B. R. (2013). Extracción y caracterización de la inulina presente
en los tubérculos de la Dahlia spp. Revista del Instituto de investigación de la Facultad de minas, metalurgia
y ciencias geográficas, 16(31).
 CONCLUSIONES

- Existen diversos métodos o procedimientos que se pueden emplear para la detección de los distintos

carbohidratos presentes en las muestras vegetales, lo importante es tener en cuenta que existen

alternativas según la disponibilidad de reactivos y materiales que se tenga como se probó utilizando

alcohol yodado para probar su acción en reemplazo o comparación con el lugol.

- Se pudo evidenciar que es sencillo poder observar cristales en Dahlia, como se sabe, existen otros

tubérculos que también cuentan con inulina como en el caso del conocido ‘Yacón’, se deben

perfeccionar las técnicas para poder observar también en esta muestra vegetal la forma cristalizada

de este carbohidratos de tal importancia alimenticia.