Tecnología del ADN recombinante

Productos biotecnológicos
Ej. Cerveza, yogurt, etanol, diesel, producción de polisacáridos, vitaminas, ácidos,
cultivo de microorganismos, enzimas
La ing. Genética puede modificar rutas metabólicas
Proteína recombinante: no es producida de forma natural (iquia pasteris?)
Etapas para el aislamiento de microorganismos a nivel industrial:

Plásmidos
Un plásmido es una molécula de ADN circular que se va a replicar de manera
independiente a lo que hace el cromosoma

AmpR Gen

Marcador
ORI de
resitencia

Dentro de una célula puede haber pocas copias (plásmidos de bajo número de
copias)
 Moléculas de ADN circular independientes del cromosoma
 Rango de tamaño de 1000 a 2000,000 pares de bases
  Muchas bacterias las portan de manera natural
 Presentes en varias copias separadas del ADN cromosómico
 Amplia variedad de plásmidos comerciales
Marcador- gen reportero, puede ser el gen que codifica para una enzima o para
una proteína. Nos dice que células fueron transformadas con el plásmido que
pusimos.
Va a reconocer sitios que son nucleasas

Enzimas de restricción:
Son nucleasas y endonucleasas, van a reconocer secuencias en específico cuya
característica principal es
Estas encimas pueden cortar de dos formas
 Dejan extremos cohesivos o sobresalientes
 Extremos romos: Cortan de manera simétrica

Clonación molecular
Es la inserción de una secuencia de ADN en un plásmido
Pasos:
El gen va a estar flanqueado con dos sitios de restricción diferentes
El plásmido debe tener los sitios de reconocimiento de los que le vamos a poner al
gen
En unos microtubos de ponen plásmidos + enzimas; sitios de corte + enzimas
Después, ambas se juntan para hacer una reacción de ligación (DNA ligasa sella
huecos) y se produce el constructo o construcción
Transformación bacteriana

Producción de la proteína recombinante

*existen plásmidos que pueden insertarse en un genoma. A nivel industrial se
genera un sistema genético más estable