UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

U.A. MICROBIOLOGÍA

GENÉTICA BACTERIANA

(Síntesis de ADN)

por

Marzo 2023 M en C. Ada Elia Díaz González Borja

2 Objetivo

Constatar la morfología, sus principios metabólicos, genéticos y taxonómicos de

las bacterias y hongos; mediante la aplicación de técnicas de aislamiento para la
identificación de los microorganismos.

Genética bacteriana.

1.1.3.1 síntesis de ADN

1.1.3.2 Transferencia genética

3
 Conceptos
4
Genética:

Disciplina que se ocupa de los mecanismos por los que la

herencia pasa de un organismo a otro y como se expresa.

Genoma:
Es la copia simple de la información genética de una
célula.

Gen:
Son segmentos que tienen funciones específicas, estos
contienen secuencias de nucleótidos.
 Que es el ADN
5

▹ El ADN es «la molécula de la vida», y es la que lleva codificada la

información genética característica de los diferentes seres vivos.

▹ Mediante ese código, regula el funcionamiento de cada tipo de

célula.

▹ Controla la transmisión de esa información.

▹ Controla su propia duplicación, reparación y autorregulación.

6

▹ Controla y coordina los procesos de reproducción y mantenimiento

de las características de cada especie.

▹ Todas estas actividades funcionales son reguladas y conducidas por

un conjunto de instrucciones que constituyen el llamado código
genético.

▹ El genoma, es susceptible de sufrir alteraciones por ciertos agentes

que modifican el ambiente, dando lugar a efectos adversos.
 Molécula de ADN
Información genética de organismos procariontes como eucariontes
Determina la naturaleza metabólica y estructural de los organismos

Trasmisión de la información
hereditaria
Replicación fiel de la molécula
de ADN
Asegurar la continuidad y supervivencia de los
organismos

Genoma
Dividido en segmentos , Funciones específicas, cada uno de estos esta
constituido por una secuencia de nucleótidos o genes
Los genes están codificados para realizar funciones de,
síntesis de proteínas, de ARN y funciones reguladoras

Duplicación del ADN

Síntesis de nuevas moléculas de ADN,
con la misma secuencia de nucleótidos
del organismos
Información apropiada precursor
que se expresa por el metabolismo
celular.
Supervivencia y Desarrollo del M.O.

Alteración de la molécula
de ADN
Mutación
Alteración de una función vital de la célula que le ocasione la
muerte
▹ Todo cambio en la secuencia de nucleótidos, altera en gran medida
las características de una bacteria.

▸ Un cambio en la posición de una base nucleótida, puede ser

mortal para la descendencia de un microorganismo.
9 Funciones del ADN

Las funciones que debe cumplir el material encargado de portar la

herencia biológica son principalmente tres:

▹ Guardar información

▹ Permitir copiar fielmente dicha información y

▹ Posibilitar cierta capacidad de cambio, de alteración de la misma.

 Estructura del ADN

El ácido desoxirribonucleico (ADN), es un polímero compuesto por millones de nucleótidos

unidos en cadena mediante enlaces fosfodiéster.

Nucleótido formado por:

1 mol. Desoxirribosa

1 base nitrogenada

1 ácido fosfórico
Bases nitrogenadas utilizadas en el ADN son la adenina (A), citosina (C),
guanina (G) y timina (T). En el ARN, la base uracilo (U) ocupa el lugar de la
timina.

Bases púricas Adenina, guanina

Bases pirimídicas Tiamina, citosina
Estructura del ADN

▹ El ADN esta compuesto por dos cadenas nucleotídicas o

hebras antiparalelas, que se enlazan entre si
conformando una doble hélice.

⬩ Los enlaces entre las dos hebras de ADN están dados

por puentes de hidrógeno entre las purinas de una
cadena con las pirimidinas de la otra.

⬩ Una purina siempre se aparea con una pirimidina y los

puentes de hidrógeno solo se forman entre adenina y
tiamina o entre guanina y citosina.

⬩ Configuración tridimensional.
A forma dos puentes de hidrógeno con la T
C forma tres puentes de hidrógeno con la G.
 Estructura del ADN

El ADN esta compuesto por 2

cadenas nucleotídicas o hebras
antiparalelas, que se enlazan
entre si conformando una doble
hélice.
Los enlaces entre las dos hebras de
ADN es a través puentes de hidrógeno
entre las purinas de una cadena con
las pirimidinas de la otra.

Configuración
tridimensional.
 Función Autocatalítica
Síntesis y Autoduplicación del ADN

El ADN debe de ser capaz de autoduplicarse, para contener y trasmitir la

información genética.
FUNCIONES DEL ADN

Heterocatalítica
Transcripción o
La secuencia de nucleótidos delARN
Síntesis de ADN es utilizada como
molde para la síntesis de ARN, el resultado son los tres tipos:
ARNr, ARNm y ARNt.
En organismos procariotas los tres tipos de ARN se originan a
partir de porciones distintas (GENES) de ADN.

Traducción o
Síntesis de proteínas
Utiliza la información genética contenida en un ARNm
determinado.
Las moléculas de ARNm se asocian temporalmente con los
ribosomas que contienen (ARNr, con el ARNt y con otros
factores presentes en el citoplasma, para que la secuencia de
nucleótidos del ARNm sea traducida en proteínas con una
secuencia específica de aminoácidos.
Genes como portadores de material
genético
Replicación fiel de la molécula de ADN
para trasmitir la información genética de
generación en generación.
Contener la información necesaria para
sintetizar todas las proteínas
fundamentales para permitir el normal
desarrollo de la célula.
Capacidad de aceptar cambios como una
forma de evolución, aceptar la capacidad
de mutar.
 SÍNTESIS O AUTODUPLICACIÓN DEL ADN

La autoduplicación, es una propiedad fundamental de todas las especies vivientes

Características

El material genético se autoreproduce por duplicación.

Reparación del material genético

La molécula de ADN, contiene la información para su propia duplicación:

** Pero carece de capacidad para ejecutar la actividad por sí misma
La duplicación del ADN es semiconservativa

Las cadenas que forman la doble hélice se

separan y cada una de ellas sirve como molde
para la síntesis de una nueva cadena
complementaria.

Da origen a 2 mol. de ADN, cada una de

ellas compuesta de:
• una hebra de el ADN original y de una
• hebra complementaria nueva .
 Replicación del ADN de la E. coli
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1. El proceso de replicación del ADN se inicia en un solo punto y desde él

avanza bidireccionalmente, hasta completar el proceso.

2. En el proceso de replicación del ADN intervienen una serie de enzimas

responsables de abrir la doble hélice, incorporar los nucleótidos y
disminuir la tensión que se genere por delante de ella.

3. Las cadenas de la doble hélice deben separarse, para ello requiere de un

origen en el cromosoma bacteriano.
 ADN polimerasa
 Es clave en la replicación, es responsable de la síntesis de ADN: añade nucleótidos
uno por uno a la cadena creciente de ADN, e incorporan solo aquellos que sean
complementarios al molde.
 Principal enzima del proceso de replicación de ADN .
 Capacidad para sintetizar nuevas cadenas de ADN, a partir de una hebra patrón y las
unidades estructurales correspondientes (desoxirribonucleótidos.
 Los desoxirribonucleótidos, para ser incorporados por esta, deben estar trifosfatados
(dATPs, dGTPs, dTTPs y dCTPs), para poder sintetizar las nuevas cadenas de
ADN.
 Polimeriza los nucleótidos en la dirección 5´a 3´.
 Como consecuencia de esto, la dirección en la cual leerá la cadena patrón de ADN
será de 3´a 5.

Desoxiadenina trifosfato (dATP), Desoxiguanina trifosfato (dGTP), Desoxicitosina trifosfato (dCTP) y Desoxitimina trifosfato
(dTTP).
 ADN polimerasa:
▹ La ADN polimerasa NO puede iniciar su síntesis sin la existencia de un
cebador de ARN.

▹ Es capaz de corregir los posibles errores que se cometan durante la

autoduplicación.

▹ Girasas o Topoisomerasas

La DNA girasa, es la encargada de desenrollar la doble hélice, para que la

replicación se pueda llevar a cabo.
 Helicasa:

Enzima que se encarga de separar la doble hélice ó hebra de tal forma que se puedan
formar los primers y luego se lleve a cabo la replicación.

▸ Son responsables de la ruptura de las uniones puente de hidrógeno que se establecen entre
las bases de las dos cadenas del ADN.

▸ Para separar las dos hebras del ADN se requiere de energía, que es obtenida de la
hidrólisis del ATP.

▸ Por cada dos pares de bases que separan, se gastan dos moléculas de ATP.
Proteinas afines al ADN de cadena sencilla

Ayudan en el proceso de desestabilización de la doble hélice.

Protegen a las cadenas de ADN de la acción de nucleasas
intracelulares que tienden a degradar al ADN de cadena
sencilla.
ADN Polimerasa III

 Enzima que cataliza la polimerización de los desoxirribonucleótidos en la dirección 3’5’.

 Requiere de la cadena que le sirve como molde,
 No puede iniciar de novo la cadena de ADN.
 Requiere la formación de un fragmento polinucleótido que sirva como fragmento iniciador de ARN.
 Funciona como exonucleasa en dirección, 3’5’, actividad que permite corregir errores en la
polimerización y en el apariamiento de bases con la cadena que funciona como molde.
Proteínas estabilizadoras de la cadena:

▹ Una vez que las cadenas del ADN son separadas, la estabilidad de las mismas disminuye
considerablemente.
▹ El ADN tiende a reasociarse y, son estas proteínas quienes impiden que el ADN vuelva a su
conformación inicial. Su presencia es fundamental para mantener las cadenas estiradas.

ARN polimerasa o Primasa:

▹ Esta enzima es la que sintetiza el cebador ARN necesario para que la ADN polimerasa pueda
iniciar la síntesis de las nuevas cadenas.
▹ El cebador es una pequeña porción de ARN de 10 a 12 ribonucleótidos de largo que se mantendrá
unido a la cadena de ADN molde hasta que sea removido.
ADN Polimerasa I:
 Al igual que la ADN polimerasa III, cataliza la polimerización de los
desoxirribonucleótidos en la dirección 3’5’, a partir de la cadena
preexistente.

Función:
Es remover el fragmento de ARN iniciador en dirección 5’3’ y sustituirlo
con ADN, utilizando como fragmento iniciador 3´del ADN de un fragmento
de Okazaki adyacente.
▹ ADN Ligasa

 Une los fragmentos de Okazaki.

 Responsable de unir el extremo 5P de un fragmento con el
extremo 3´-OH de otro adyacente mediante un enlace
fosfodiéster.
 Proceso de replicación

▹ El ADN actuará como patrón, ya que la ADN polimerasa agregará los

nucleótidos de las nuevas cadenas por complementariedad de bases.
▹ El lugar donde ocurre la replicación se denomina Horquilla de
replicación, tiene forma de “Y”, y es la zona donde se sintetiza el ADN
para formar las dos moléculas hijas.
 Replicación del ADN

La figura muestra el proceso por el cual se inicia la burbuja

de replicación.
1. La replicación se inicia en una secuencia de 300 pb, que
indican el origen de la misma.
2. La doble hélice se abre, conformando la burbuja de
Replicación, la Primasa sintetiza el Cebador.
3. Una vez sintetizado el cebador, la ADN polimerasa
comienza a sintetizar la nueva cadena de ADN.
4. Se originan dos Horquillas de replicación completas, una
de las cuales se desplaza hacia la izquierda con la cadena
continua en la parte superior y la retrasada en la parte
inferior, y la otra hacia la derecha, con la cadena continua
en la parte inferior y la cadena retrasada en la parte
superior.
 Proceso de replicación

▹ Las horquillas de replicación se originan en una estructura denominada Burbuja de

Replicación, una región en la que las cadenas de la hélice de ADN se separan una de
otra, actuando como patrón para la síntesis de las nuevas cadenas de ADN.

▹ Las zonas donde se producen las Burbujas de replicación no son aleatorias, se ha

demostrado que existen secuencias de bases que indican los lugares precisos donde
la replicación ha de comenzar.

▹ Cada Burbuja de Replicación posee dos Horquillas de Replicación, una de las cuales se
desplaza hacia la derecha y otra hacia la izquierda.
Proceso de replicación

▹ Este proceso necesita, en primera instancia, que las dos cadenas del ADN se
separen.
▸ Para esto, las Helicasas se unirán a la cadena de ADN e hidrolizarán las uniones
puente de Hidrógeno que las mantienen unidas.
▸ La consecuente apertura de la doble hélice hace que las cadenas simples
adquieran inestabilidad, esta es compensada por la unión de las proteínas
estabilizadoras de la cadena simple.

▹ La ADN polimerasa no es capaz de iniciar la síntesis a partir de los

desoxirribonucleótidos libres, por lo tanto necesitará que la Primasa sintetice
en forma previa el Primer o Cebador.
 Proceso de replicación

▹ Una vez incorporado el Cebador, la ADN polimerasa incorporará

los nucleótidos en forma complementaria a las bases de la cadena
patrón.

▹ Una vez que la Horquilla avance, la tensión por delante de la

misma aumentará, para evitar esto las Topoisomerasas cortarán la
doble hélice, la rotarán y volverán a unirla.
Debido a la orientación antiparalela del ADN:

▹ Una de las cadenas de la horquilla de replicación quedará en sentido 3´a 5´:

▸ La ADN polimerasa podrá trabajar en forma continua (recordemos que
esta enzima leía en dirección 3´a 5´y polimerizaba en dirección 5´a 3´).

▹ La otra cadena de la Horquilla, quedará orientada en la dirección inversa (5´a 3

´):
▸ En cada Horquilla de Replicación deberán actuar al menos dos ADN
polimerasas.
▸ Una de ellas podrá actuar en forma contínua, puesto que, a medida que se
abra la doble hélice se encontrará con el extremo 3´ de la cadena patrón,
pudiendo así incorporar el nucleótido correspondiente.
Debido a la orientación antiparalela del ADN:

▸ En cambio, la otra ADN polimerasa se encontrará, cuando la

apertura de la doble hélice avance, con el extremo 5’ de la
cadena patrón, por lo cual será necesario incorporar otro
cebador de ARN para poder continuar la síntesis.

▸ Cuando la cadena patrón presente la dirección 3´a 5´, la síntesis

se realizará en forma Continua.
▸ Cuando la cadena patrón presente la dirección 5´a 3´, la síntesis
se realizará en forma Discontinua.
 Síntesis discontinua

▹ Quedan pequeños fragmentos de ADN, de unos 100 a 200 nucleotidos,

intercalados con los cebadores.
▸ Cadena conductora (la que se polimeriza en forma continua) es necesario la presencia
de un solo cebador, en cambio,

▸ Cadena retardada (la que se polimeriza en forma discontinua) se necesita más de un

cebador.

▹ Luego de terminada la síntesis de ambas cadenas, los cebadores son

removidos por ADN polimerasa I, y esta agregara los nucleótidos faltantes o
fragmento de Okazaki.,
▹ La enzima denominada ADN Ligasa, se encarga de unir ambos extremos del
ADN.
Proceso de Replicación del ADN. Obsérvese la Horquilla de Replicación en la cual se encuentran actuando las dos ADN polimerasas. La cadena con dirección 3´a 5´ se replica en
forma continua y la de dirección opuesta lo hace en forma discontinua. La Primasa sintetiza el Cebador. La Topoisomerasa actúa en forma adelantada a la Horquilla de
Replicación, disminuyendo el superenrollamiento positivo.
PARTICIPACIÓN DE ENZIMAS EN EL PROCESO DE SÍNTESIS Y REPLICACIÓN DEL ADN

http://youtu.be/YqjbmrQcyfM
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 https://youtu.be/Qqe4thU-os8
39
TRANSCRIPCIÓN O SÍNTESIS DE ARN
 Proceso por el cual la información almacenada en la molécula de ADN, se expresa indirectamente a través de la

síntesis de ARN específicos.

TRANSCRIPCIÓN O SÍNTESIS DE ARN

• Formación de una molécula de ARN, a partir de

ADN.
• En la transcripción el ADN sirve, como plantilla
para la síntesis de ARN:
• Se logra la transferencia precisa de la información,
para la expresión final de la información genética.
• En las bacterias la transcripción y la traducción
tienen lugar en el citoplasma bacteriano.
 La transcripción genera 3 tipo de ARN

ARN FUNCIÓN

ARNr ribosomal Forma la estructura básica del ribosoma

ARNt de Actúan como adaptadores entre el ARNm y los aminoácidos.

transferencia
Transporta los aminoácidos a los ribosomas durante la traducción.

Transporta la información de ADN a los ribosomas y especifica la

ARNm
mensajero secuencia de los aminoácidos para formar una cadena polipéptidica
(proteínas)
 Diferencias químicas entre ADN y ARN

ARN ADN

Ribosa Desoxiribosa
Ribonucleotidos Desoxiribonucleotidos

Bases: adenina citosina, guanina y uracilo Bases: adenina, timina, citosina y guanina

ARN cadena sencilla ADN (doble hélice)

ARN Polimerasa ADN Polimerasa

 Función de la ARN polimerasa

POLIMERASA Síntesis de ARN.

Requiere de la presencia de ADN para que actué

como molde
ARN

No necesita de un cebador para iniciar la síntesis de

ARN.

Catalizan los enlaces fosfodiéster que unen los

ribonucleótidos para formar la cadena lineal.
 Elementos que intervienen en el proceso de transcripción

•Sitio promotor: Secuencia de nucleótidos que indica el punto de inicio de la síntesis de ARN.
•Una secuencia en el ADN a la que la ARN polimerasa y los factores asociados se unen e inician la

transcripción
▸ En la molécula de ADN existen 2 tramos cortos similares de 35 nucleótidos (región -35) llamada

caja TATA. (TATAAT y TTGACA). ó Consenso.

• Segunda secuencia de -10 nucleótidos, estas Secuencias son reconocidas por el factor Sigma.
• Actúan como importantes sitios de control para regular la tasa de expresión de genes.
▹ Sitio terminador: Punto donde la ARN polimerasa se detiene y libera el molde de

ADN y la cadena recién sintetizada.

▹ Proteína Factor Rho (concluye la transcripción).

 Enzima ARN polimerasa

La ARN polimerasa es la enzima responsable de la síntesis de ARN.

Es una enzima compleja que puede existir en dos formas:

a. Enzima completa/ holoenzima

b. Enzima incompleta, contiene solo la estructura central de la
holoenzima.
El centro de la enzima esta constituido por 4 distintos polipéptidos:

• 2 polipéptidos alfa
• 1 polipéptido beta
• 1 polipéptido beta prima
• 1 polipéptido omega
 *la holoenzima contiene 1 polipéptido adicional denominado sigma.

Polipéptido sigma:

Función:

 Aumenta la afinidad de la ARN polimerasa por

los sitios promotores sobre el ADN.
 Reconoce las secuencias específicas de ADN,
denominadas promotores, que corresponden al
inicio de un gen y por lo tanto señalan el sitio
donde debe iniciarse el proceso de
transcripción.
▹ Una vez iniciada la transcripción, el polipéptido sigma se separa de la ARN polimerasa.

▹ La ARN polimerasa continua la síntesis (o ensamble) de la cadena de ARN.

FACTOR Rho

▹ El inicio de la cadena ARN debe terminar en un punto específico señalado en el ADN

mediante una secuencia específica de nucleótidos .

▹ El centro de la ARN polimerasa no es capaz de reconocer dicha señal, por lo que se requiere
de la participación de otro factor compuesto por 4 o más polipéptidos idénticos,
denominado factor rho.
 Características de la Transcripción o síntesis de ARN:

 El proceso de transcripción o síntesis de ARN, es similar al proceso de síntesis de

ADN.

 La doble hélice de ADN debe

separarse momentánea y
reversiblemente, una de las cadenas
funciona como molde

La polimerización de ribonucleótidos con secuencia complementaria a la cadena ADN,

en la dirección 5’3’.
 Características de la Transcripción o síntesis de ARN:

 La cadena utilizada como molde durante el proceso de transcripción,

puede no ser la misma para genes distintos.
 1. El Factor Sigma (proteína), y localiza el sitio
promotor.
Pasos de la Transcripción

2. Se forma la holoenzima de ARN polimerasa

mas el factor sigma
3. La ARN polimerasa desenrolla el ADN
4. La Helicasa desnaturaliza la hebras de ADN
(separa).

5. Inicia la transcripción y cuando la ARN polimerasa a sintetizado 10 nucleótidos de

ARN, el factor sigma relaja su unión a la polimerasa
6. Inicia la elongación de la cadena del ARN.
7. Señal de terminación Factor Rho, indica a la ARN polimerasa detener la síntesis de
ARN.
8. Ambos cadena de ARN recién sintetizada y ARN polimerasas se liberan de la cadena de
ADN molde.
9. La cadena de ADN se une nuevamente.
10. La ARN polimerasa vuelve asociarse con el Factor sigma y identifican un nuevo
promotor y se inicia nuevamente el proceso de transcripción.

Transcripción
55

• Un transcrito de ARN que está listo para su uso en la traducción se conoce

como ARN mensajero (ARNm).

• En bacterias, los transcritos de ARN están listos para su traducción

inmediatamente después de la transcripción.

 Inhibición de la Transcripción o síntesis del ARN

Antibióticos

▸ Rifamicinas: se fija a la molécula de ADN e impide la síntesis de la molécula de

ARN.

▸ Actinomicina: Se une a la ARN polimerasa e inhibe su actividad.

57