Datos Del Proyecto Final

Laboratorio de Física III.

DETERMINACIÓN DE FÓSFORO COMO P2O5 Y FOSFATOS EN BEBIDAS DE

COLA POR ESPECTROFOTOMETRÍA UV-VIS.

Prof.: Carlos Omar Bautista Mendoza.

Tatiana Fernanda Cifuentes Riaño 2211942.

Wilfredo Jesús Castillo Caicedo 2211926.

Paula Valentina Hernández Torres 2211688.

Gabriela Michaell Grisales Castillejo 2211612

Fecha: 02 de junio del 2023.

1- MARCO TEÓRICO:
La física de ondas es una rama de la física que se centra en el estudio de las propiedades y el
comportamiento de las ondas. La espectrofotometría, por otro lado, es una técnica analítica
utilizada para medir la absorbancia o transmisión de la luz en función de la longitud de onda.
En este marco teórico, se explorará la relación entre la física de ondas y la espectrofotometría,
destacando los conceptos fundamentales y las aplicaciones de esta conexión. Las ondas son
perturbaciones que se propagan a través de un medio o del espacio, llevando energía sin
transporte de materia. Pueden describirse mediante parámetros como la amplitud, la
frecuencia, la longitud de onda y la velocidad de propagación. Las ondas pueden clasificarse
en diferentes tipos, como ondas mecánicas (como las ondas sonoras) y ondas
electromagnéticas (como la luz).

La espectrofotometría es una técnica que utiliza la interacción entre la luz y la materia para
determinar la concentración de una sustancia en una muestra. La luz pasa a través de la
muestra y se registra la cantidad de luz absorbida o transmitida a diferentes longitudes de
onda. Estas mediciones se utilizan para construir un espectro de absorción o transmitancia,
que puede ser analizado para obtener información sobre la composición química y las
propiedades físicas de la muestra. La física de ondas desempeña un papel fundamental en la
espectrofotometría, ya que las ondas electromagnéticas, incluida la luz, se describen
mediante parámetros ondulatorios. El espectro de absorción o transmitancia de una muestra
está directamente relacionado con la interacción de la luz con las moléculas presentes en la

1
muestra. Las propiedades de las ondas, como la longitud de onda y la frecuencia, determinan
cómo la luz interactúa con la muestra y cómo se registra esta interacción. Para comprender
mejor la conexión entre la física de ondas y la espectrofotometría, se pueden considerar
fenómenos como la ley de Beer-Lambert.

𝑨 = 𝜺. 𝒃. 𝒄

Esta ley establece que la absorbancia de una muestra es directamente proporcional a la

concentración de la sustancia absorbente y a la longitud del camino recorrido por la luz a
través de la muestra. Esta relación se basa en la interacción de las ondas electromagnéticas
con las moléculas presentes en la muestra.

La determinación de fosfatos por la técnica analítica de espectrofotometría UV-VIS es una

herramienta comúnmente utilizada en el análisis químico y ambiental. Los fosfatos son
compuestos químicos que contienen el ion fosfato (PO4³⁻) y son importantes en diversos
campos, como la química, la biología y la agricultura. La espectrofotometría UV-VIS se
utiliza para cuantificar la concentración de fosfatos en una muestra mediante la medición de
la absorbancia de la luz ultravioleta o visible por parte de los fosfatos presentes en la muestra.
Los fosfatos tienen una absorbancia característica en una longitud de onda específica, y
mediante la construcción de una curva de calibración utilizando soluciones estándar de
fosfato, es posible determinar la concentración desconocida de fosfatos en una muestra. Es
importante tener en cuenta que existen diferentes métodos de determinación de fosfatos,
como el método del molibdato, el método del ácido ascórbico y el método del azul de
molibdeno, entre otros. Es importante conocer la concentración de fosfatos es estas bebidas
y que una concentración alta puede tener efectos negativos en la salud como:

• Impacto en la salud ósea: El consumo excesivo de fosfatos puede afectar

negativamente la salud ósea al interferir con el equilibrio del calcio en el cuerpo. Un
desequilibrio entre los niveles de fosfato y calcio puede conducir a una disminución
de la densidad mineral ósea y aumentar el riesgo de osteoporosis.

• Problemas renales: El exceso de fosfatos en la dieta puede ejercer una carga adicional
en los riñones, lo que puede ser problemático para las personas con enfermedad renal
crónica. Altos niveles de fosfato en sangre pueden contribuir a la formación de
cálculos renales y empeorar la función renal en individuos susceptibles.

• Efectos sobre el sistema cardiovascular: Estudios han sugerido una asociación entre
altas ingestas de fosfatos y un mayor riesgo de enfermedades cardiovasculares,
incluyendo la hipertensión y la calcificación arterial. El exceso de fosfatos puede
influir en la función endotelial, la inflamación y la calcificación de los vasos
sanguíneos, lo que contribuye al desarrollo de enfermedades cardiovasculares.

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 2- DISEÑO METODOLOGICO:
Preparación de soluciones: En primer lugar, se requiere preparar una solución stock de 50
mg/L de P205 en un volumen de 50 mL. Esto se puede lograr utilizando NaH2PO4H2O o
Na2HPOH2O como compuestos base. Posteriormente, se debe preparar una solución de
trabajo de 5 ppm utilizando 50 mL de la solución stock anteriormente preparada.

Preparación de solución reductora: Para preparar la solución reductora, se requiere;

primero se debe pesar con precisión 0.312 g de molibdato de amonio. Luego, se debe pesar
0.4224 g de ácido ascórbico. Después, se debe medir con cuidado 4.4 mL de ácido sulfúrico
(H2SO4) concentrado esta solución se afora con agua destilada a un volumen final de 100
mL.

Curva de calibración: La curva de calibración se construye siguiendo estos pasos. Se deben

tomar alícuotas de diferentes volúmenes (1, 2, 3, 4,5 y 6mL) de la solución de trabajo
previamente preparada. Luego, se añaden 2 mL de la solución reductora a cada alícuota y se
completa el volumen a 25 mL. Después de esta etapa, las muestras se incuban durante 30
minutos a una temperatura de 50º C utilizando un baño María

Preparación de la Muestra: Para preparar la muestra, se deben realizar los siguientes pasos.
Primero, se debe desgasificar cuidadosamente 10 mL de la muestra con agitación. A
continuación, se toma 5 mL del refresco desgasificado y se completa el volumen a 10 mL
con agua destilada. Seguidamente, se toma una alícuota de 1 mL de la solución anteriormente
preparada y se deposita en un matraz aforado de 25 mL. Para finalizar, se agregan 2 mL de
la solución reductora y se completa el volumen del matraz.

Análisis Espectrofotométrico: Para realizar el análisis espectrofotométrico, se sigue este

procedimiento. Se realiza un barrido de exploración en el rango de longitud de onda de 600
a 850 nm utilizando la muestra de la curva de calibración que tiene la concentración más alta.
De esta manera, se determina la longitud de onda específica en la cual se obtiene la máxima
absorción. Finalmente, se procede a analizar tanto la curva de calibración como las muestras
utilizando los datos obtenidos en el espectrofotómetro.

3- DATOS Y ANALISIS DE DATOS:

Preparación de la solución stock: Se preparan 100 mL de una solución 100 mg/L de 𝑃2 𝑂5
a partir de 𝑁𝑎𝐻𝑃𝑂4 𝐻2 𝑂.

𝑚𝑔 𝑔 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃2 𝑂5 2 𝑚𝑜𝑙 𝑁𝑎𝐻2 𝑃𝑂4 136,07 𝑔

100 = 0,1 𝑃2 𝑂5 ⋅ ⋅ ⋅ = 0,19164 𝑔
𝐿 𝐿 142 𝑔 𝑃2 𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃2 𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑁𝑎𝐻2 𝑃𝑂4

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0,19164 g de 𝑁𝑎𝐻𝑃𝑂4 𝐻2 𝑂 teórico se pesaron realmente 19,49 mg de 𝑁𝑎𝐻𝑃𝑂4 𝐻2 𝑂 dando una
concentración de:

𝐶Na𝐻2𝑃𝑂4 𝐶𝑃2𝑂5
19,49 𝑚𝑔 𝑚𝑔 19,44 𝑚𝑔 142 𝑚𝑔
= 194,9 ⋅( ) = 101,696
0,1 𝐿 𝐿 0,1 𝐿 136,07 ⋅ 2 𝐿

Se preparó la solución reductora pesando 0,312 g de Molibdato de amonio ((N𝐻4 )6MO7024) y

disolviendo en 8 mL de agua se pesaron 0,4224 g de ácido ascórbico (𝐶6 𝐻8 𝑂6 ) que se disolvió
en 10 mL de agua los cuales se agregaron a un matraz aforado de 100 ml donde luego se
añadieron 4,4 ml de ácido sulfúrico concentrado (𝐻2 𝑆𝑂4) y se aforó hasta la marca, esta solución
se llevó a una bureta de 15 ml.

Para realizar la estandarización se usaron 6 matraces de 15 ml, la solución concentrada de 𝑃2 𝑂5

se diluyó a 100 mL de 4 ppm tomando una alícuota de aproximadamente 3,9332 ≈4,0 mL de la
solución stock.

𝐶1 𝑉1 = 𝐶2 𝑉2 (101,696 𝑝𝑝𝑚) ⋅ (𝑉1 ) = (4 𝑝𝑝𝑚)(100𝑚𝐿)

𝑉1 =4,0 mL

De esta solución se tomaron 1, 2, 3, 4, 5 y 6 mL y se transfieren a cada matraz de 25 mL, luego

se le agregaron a cada uno (incluyendo el matraz del banco) 2 mL de la solución reductora y se
procedió a aforar. Las concentraciones de cada patrón se presentan a continuación:

Sln. estándar 1 Sln. estándar 2 Sln. estándar 3

(4 𝑝𝑝𝑚)(1 𝑚𝐿) = 𝐶2 (25𝑚𝐿) (4 𝑝𝑝𝑚)(2 𝑚𝐿) = 𝐶2 (25𝑚𝐿) (4 𝑝𝑝𝑚)(3 𝑚𝐿) = 𝐶2 (25𝑚𝐿)

𝐶2 =0,16 ppm 𝐶2 =0,30 ppm 𝐶2 =0,48 ppm

Sln estándar 4 Sln estándar 5 Sln estándar 6

(4 𝑝𝑝𝑚)(4 𝑚𝐿) = 𝐶2 (25𝑚𝐿) (4 𝑝𝑝𝑚)(5 𝑚𝐿) = 𝐶2 (25𝑚𝐿) (4 𝑝𝑝𝑚)(6 𝑚𝐿) = 𝐶2 (25𝑚𝐿)

𝐶2 =0,64 ppm 𝐶2 =0,8ppm 𝐶2 =0,96 ppm

4
Para la preparación de la muestra se tomaron 10 mL de la muestra y se desgacificó, luego 5 mL
de la muestra se agregaron a 10 mL y se aforó. De esta solución se tomó 1,0 mL y se pasó a un
matraz de 25 mL y se aforó, antes agregando 2,0 mL por la solución reductora, posteriormente
se sometió a la incubación. La segunda muestra problema se tomaron 6,0 ml y se pasaron a un
matraz de 25,0 mL se le añadió 2,0 mL de la solución reductora y se atoró, esta también se incubó
por 30 minutos.

Para el análisis espectrofotométrico se realizó un barrido de explotación con el estándar nos

concentrado (solución estándar 6) en un rango desde 560 nm a 950 nm, hallando la longitud de
onda con máxima absorción, Gráfica que se muestra a continuación:

Figura 1: Grafica de barrido para obtener la longitud de onda máxima.

A partir de la figura 3 donde se muestra la gráfica de absorbancia con concentración se obtuvo

su ecuación de regresión lineal

𝐴 = 0,1071 𝑥 + 0,0044 (𝐸𝑐𝑢𝑎𝑐𝑖ó𝑛 1)

De esta ecuación se despeja la variable x:

𝑐 = 𝑥 = 9,3370 𝐴 + 0,04108 (𝐸𝑐𝑢𝑎𝑐𝑖ó𝑛 2)

Usando la ecuación (2) se puede hallar las concentraciones de las muestras analizadas al
reemplazar la absorbancia medida para cada muestra

Muestra de refresco

Absorbancia observada= 0,0726 %T=86,4

5
 Se reemplaza en (2)

x = 9,3370 (0,0726) + 0,04108

x= 0,6778+0,04108

x= 0,71894 ppm de 𝑃2 𝑂5 en el análisis

(0,71894 ppm 𝑃2 𝑂5)(25 mL) = C1⋅(1mL)

(0,71894 𝑝𝑝𝑚)(25 𝑚𝑙)
c= = 17,9736 𝑝𝑝𝑚 𝑃2 𝑂5
(1𝑚𝐿)

(17,9736 ppm) (10mL) =C1(5mL)

(17,9736 𝑝𝑝𝑚)(10𝑚𝐿)
𝑐= = 35,9473 𝑝𝑝𝑚 𝑃2𝑂5 𝑒𝑛 𝑒𝑙 𝑟𝑒𝑓𝑟𝑒𝑠𝑐𝑜
(5 𝑚𝐿)

Se halla 𝜇𝑔 𝑃/𝐿 en el refresco

𝑚𝑔
35,9473 = 0,03594 𝑔 𝑃2 𝑂5
𝐿

0,03594 𝑔 𝑃2𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃2𝑂5 2 𝑚𝑜𝑙 𝑃 30,9738𝑔 𝑃 4,0874 ⋅ 10−6 𝑔 𝑝

⋅ ⋅ ⋅ =
𝐿 141,94 𝑔 𝑃2𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃2𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃 𝐿

4,0874 ⋅ 10−6 𝑔 𝑃 1 𝜇𝑔 𝑃
⋅ = 4,0874 𝜇𝑔 𝑃/𝐿
𝐿 1 ⋅ 10−6 𝑔 𝑃

Se halla mg 𝑷𝑶𝟒 𝟑− /𝟏𝟎𝟎 de refresco

𝑃2 𝑂5 + 5𝐻2 𝑂 → 2𝐻3 𝑃𝑂4 2𝐻3 𝑃𝑂4 →6 𝐻 + + 2𝑃𝑂4 3−

0,03594 𝑔 𝑃2 𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃2 𝑂5 2 𝑚𝑜𝑙 𝑃𝑂3 94,973 𝑔 𝑃𝑂3 0,04809 𝑚𝑔 𝑃𝑂3

⋅ ⋅ ⋅ =
𝐿 141,94 𝑃2 𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃2 𝑂5 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃𝑂4 𝐿
0,04809 𝑚𝑔 𝑃𝑂4 3−
Entonces 𝐶1 𝑉1 = 𝐶2 𝑉2 → (0,04809 𝑚𝑔 𝑃𝑂4 3− )(1𝑙) =
1000 𝑚𝐿
𝐶2 (0,1𝐿)

C2= 0,4809 mg 𝑃𝑂4 3− /100 𝑚𝑙 de refresco

Se halla mg 𝑃2 𝑂5 /240 mL
35,9473 𝑚𝑔
𝑃2 𝑂5 usando la fórmula de dilución 𝐶1 𝑉1 = 𝐶2 𝑉2
𝐿

6
 A= 0,008858 %T= 97,98 Se reemplaza A en (2) x = 9,3370 (0,008858) + 0,0410

x= 0,08270 +0,04108

x= 0,118857 ppm de 𝑃2 𝑂5 en 25 mL

Se concentra a los 6 mL usados originalmente

(0,118857 ppm 𝑃2 𝑂5)(25 mL) = 𝐶1 (6 mL)

𝐶1 = 0,49523 ppm en la muestra

Muestra del refresco → concentración = 35,9473 ppm 𝑃2 𝑂5

Muestra problema → concentración = 0,49523 ppm 𝑃2 𝑂5

Solución patrón de 𝑁𝑎𝐻𝑃𝑂4 𝐻2 𝑂 se llevó a 50 mL con una concentración de 25 ppm (25 mg/L)
Con estos datos de longitud de onda de máxima absorbancia se procede a hallar la absortividad
molar máxima (E máxima) y la absortividad molar específica máxima (A máxima).

Se tienen en cuenta las condiciones usadas en la medición:

Celda: 1 pulgada Concentración: 0,96 ppm A: 0,197

0,96 𝑚𝑔 1 ∗10−3 𝑔
C(g/L) = ∗ = 9,6 ∗ 10−4 𝑔/𝐿 𝑝𝑎𝑟𝑎 ℎ𝑎𝑙𝑙𝑎𝑟 𝑙𝑎 𝐴 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑎
𝐿 1𝑚𝑔

9,6∗10−4 𝑔 1 𝑚𝑜𝑙 𝑃2 𝑂5
C(M)= ∗ = 6,763 ∗ 10−6 𝑚𝑜𝑙/𝐿 𝑝𝑎𝑟𝑎 ℎ𝑎𝑙𝑙𝑎𝑟 𝑙𝑎 𝜀 𝑚á𝑥𝑖𝑚𝑎
𝐿 141,948𝑔

0,197
𝜀= = 11468,1435 𝐿 𝑚𝑜𝑙 −1 𝑐𝑚−1 𝐶𝑜𝑒𝑓𝑖𝑐𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 𝑑𝑒 𝑎𝑏𝑠𝑜𝑟𝑡𝑖𝑣𝑖𝑑𝑎𝑑
(6,763 ∗ 10−6 𝑚𝑜𝑙/𝐿) ∗ 2,54 𝑐𝑚

0,197
A= 𝑔 = 80,7906 𝐿 𝑔−1 𝑐𝑚−1 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎
(9,6∗10−4 )∗2,54 𝑐𝑚
𝐿

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 Solución reductora Peso a 50 mL Aforo a 100 mL

Molibdato de amonio 0,156 g 0,312 g

Ácido ascórbico 0,2112 g 0,4224 g

Ácido sulfúrico 2,2 mL 4,4 mL

Usando 𝜆 = 830,0 𝑛𝑚 se procedió a obtener la absorbancia de cada patrón, los datos se

muestran en la siguiente tabla:

Concentr V (mL)
ación stock a 5
Patrón ppm Solución Aforo %T A
mgP2O5/ reductora
L

1(Blanco)1 0 0 100 0

2 0,2 1 96,66 0,015

3 0,4 2 92,25 0,035

4 0,6 3 87,09 0,060

5 0,8 4 2 mL 25 mL 83,17 0,080

6 1,0 5 79,06 0,102

7 1,2 6 74,64 0,127

Muestra X 0 84,60 0,0726

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Blanco: Es un sistema físico que no contiene muestra real y por consiguiente no debería contener el analito de interés, pero que debe
contener todos los reactivos que se utilizan en el método de análisis, y ser sometido a las mismas condiciones.

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 Figura 2: Grafica de calibración absorbancia contra concentración.

Figura 3: Grafica de calibración porcentaje de transmitancia conta

concentración.

4- RESULTADOS:
Se determinó analíticamente la concentración de P2O5 en la muestra de refresco, así como la
concentración en partes por billón (μg P/L) y concentración de fosfatos en 100 y 240 mL de
refresco obteniendo concentraciones de 35.9473 mg P2O5/L, 4.0874 μg P/L, 0.4809 mg PO43-
/ 100 mL y 149.7804 mg P2O5/240 mL respectivamente. Usando el método de
espectrofotometría y la ley de Beer-Lambert junto con la curva de calibración con la cual se
obtuvo un coeficiente de correlación lineal r igual a 0.9982, siendo este un valor aceptable,
es decir, los datos obtenidos durante la calibración se aproximan a una recta de forma correcta

9
lo que permite tener la certeza de que los valores de concentración calculados al interpolar
dicha recta son encontrados en los rangos de confianza aceptables.

A partir de las concentraciones halladas se puede afirmar que la concentración de fosfatos en

la bebida gaseosa es moderada de acuerdo con las normas de la unión europea, Según el
Reglamento (CE) No. 1333/2008, se establece un límite máximo de 250 mg/L de fosfatos
(expresados como fósforo) en las bebidas refrescantes que contienen gas y no contienen jugo
de frutas [12]. Permitiendo concluir que la concentración de fosfatos en la gaseosa analizada
no presenta un riesgo a la salud de aquellos que la consuman.

5- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

• Jenkins, F. A., & White, H. E. (2001). Fundamentals of Optics. McGraw-Hill

Science/Engineering/Math. [1]

• Atkins, P. W., & de Paula, J. (2010). Physical Chemistry (9th ed.). Oxford University
Press. [2]

• Skoog, D. A., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2017). Principles of instrumental

analysis. Cengage Learning. [3]

• Silverstein, R. M., Webster, F. X., & Kiemle, D. J. (2014). Spectrometric

identification of organic compounds. John Wiley & Sons. [4]

• Christian, G. D. (2013). Analytical chemistry. John Wiley & Sons. [5]

• Lakowicz, J. R. (2006). Principles of fluorescence spectroscopy. Springer Science &

Business Media. [7]

• Atkins, P., & de Paula, J. (2010). Atkins' Physical Chemistry. Oxford University
Press. [8]

• Calvo, M. S., & Uribarri, J. (2013). Public health impact of dietary phosphorus excess
on bone and cardiovascular health in the general population. The American Journal
of Clinical Nutrition, 98(1), 6-15. [9]

10
• Chue, C. D., Townend, J. N., & Moody, W. E. (2015). Phosphate and cardiovascular
disease. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology, 35(2), 274-281. [10]

• Referencia: Dhingra, R., Sullivan, L. M., Fox, C. S., Wang, T. J., D'Agostino, R. B.,
Gaziano, J. M., ... & Vasan, R. S. (2007). Relations of serum phosphorus and calcium

• levels to the incidence of cardiovascular disease in the community. Archives of

Internal Medicine, 167(9), 879-885. [11]

• European Commission. (2008). Regulation (EC) No 1333/2008 of the European

Parliament and of the Council of 16 December 2008 on food additives. Recuperado
de https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/?uri=CELEX%3A32008R1333.
[12]

11