Universidad Nacional Autónoma

de México
Facultad De estudios Superiores
Cuautitlán

Fernández Bernal José Aldair

Velazco Bejarano Benjamín

Espectroscopía

TRABAJO DE INTEGRACION DE TECNICAS

ESPECTROSCOPICAS

1701

26 de diciembre de 2022
Introducción

El alopurinol se usa para tratar la gota (un tipo de artritis en la que el ácido úrico,
una sustancia natural del organismo, se acumula en las articulaciones y provoca
ataques repentinos de enrojecimiento, hinchazón, dolor y calor en una o más
articulaciones). El alopurinol también se usa para tratar los niveles elevados de
ácido úrico que se acumulan en la sangre al desintegrarse los tumores en personas
con ciertos tipos de cáncer que están siendo tratadas con medicamentos de
quimioterapia. También se usa para tratar los cálculos renales que han vuelto a
aparecer en personas que tienen altos niveles de ácido úrico en la orina. El
alopurinol pertenece a una clase de medicamentos llamados inhibidores de la
xantina oxidasa. Su acción consiste en reducir la producción de ácido úrico en el
organismo. Los niveles elevados de ácido úrico pueden provocar ataques de gota o
cálculos renales. El alopurinol se usa para prevenir los ataques de gota, no para
tratarlos una vez que se producen.

Imagen 1: Estructura química del alopurinol

El alopurinol es un isómero de la hipoxantina (una purina que se encuentra de forma

natural en el cuerpo) y un inhibidor enzimático de la xantina oxidasa. 1 La xantina
oxidasa es la enzima implicada en la oxidación de la xantina y de la hipoxantina, lo
que da lugar a la generación de ácido úrico, el compuesto final producido mediante
el metabolismo humano de las purinas.1 La inhibición de la producción del ácido
úrico mediante inhibición de la xantina oxidasa también ocasiona mayores niveles
de xantina e hipoxantina, que se convierten en los ribonucleótidos de purina
denominados guanosina y adenosina monofosfato, que inhiben la amidofosforribosil
transferasa, la enzima inicial de la biosíntesis de las purinas y elemento limitante en
la velocidad de la ruta. Por todo esto, el alopurinol disminuye la formación de ácido
úrico y de purinas.

Metodología

IR

1. Pesar 20 tables de Alopurinol y obtener el peso promedio

2. Pulverizar las tabletas
3. Pesar 50mg con 10 mL de NaOH al 0.1 N
4. Filtrar y acidificar con ácido acético 1N
5. Después de 15 minutos recolectar el precipitado
6. Lavar el precipitado con 3 mL de alcohol deshidratado
7. De igual manera lavar con 4 ml de éter etílico anhidro
8. Secar a 105 °C durante 3 horas
9. Espectro IR

UV-Vis

1. Pesar aproximadamente 7.28 gramos de la muestra de Alopurinol y triturarlos

con ayuda de un mortero
2. Pesar 25mg de la muestra y transferir a un matraz aforado de 25ml
3. Con ayuda de una pipeta volumétrica agregar 2 mL de metanol y colocar el
matraz en el baño de ultrasonidos durante 40 minutos.
4. Pasado el tiempo agregar 12.5 mL de metanol y colocar el matraz en baño
ultrasónico durante otros 20 minutos
5. Completar el volumen de aforo con el mismo disolvente
6. Transferir una alícuota de 2 mL con una pipeta volumétrica a un matraz
aforado de 25 mL
7. Completar el volumen con 0.01 mol/L de HCl acuoso, obteniendo una
concentración de 80 μg/mL
8. Filtrar todas las soluciones a través de un filtro de celulosa cuantitativo y
analizar mediante un espectrofotómetro UV-Vis a 250nm
Masas

1. Se prepararon soluciones madre de Alopurinol en dimetilsulfóxido a

concentraciones finales de 10.000g/ml.
2. Se preparó una solución madre de trabajo en dimetilsulfóxido a una
concentración de 100 g/mL
3. Generar estándares con contengan 50, 100, 250, 500, 1,000, 5,000, 10,000,
25,000, 50,000 y 80,000 mg/L.
4. Para el analito de interés se preparó utilizando un Waters BEH C8, 50-por
columna de tamaño de partícula de 2,1 mm y 1,7 m a temperatura ambiente.
5. Preparar la fase móvil acuosa con formiato de amonio 5mM en agua (móvil
fase A) y una fase móvil orgánica que contiene dimetilsulfóxido al 3% en
acetonitrilo (fase móvil B).
6. Utilizar el analizador de masas AB Sciex QTRAP 5500 (Foster City, CA)
interconectado con un sistema de cromatografía líquida de ultra rendimiento
(UPLC) Waters Acquity (Milford, MA) para poder analizar el analito después
de 4 minutos
7. Optimizar los parámetros del instrumento para la ionización máxima del
fármaco y los iones del producto
8. Monitorizar los analitos en el modo de monitorización de reacción
seleccionada (SRM).

RMN

1. Pesar 2g del fármaco que contenga Alopurinol y disolver en 10mL de

dimetilsulfóxido
2. Añadir cantidades iguales de SA y 0,001 g de S.O y agitar durante 2 horas
3. Mezclar el producto resultante con 500mL de acetato de polivinilo
4. Agregar 5g de etilendiamina y N,N-diciclohexilcarbodiimida en condiciones
de agitación vigorosa a 85 ° C durante 2 h.
5. Sedimentar el producto
 6. Después de 60 minutos de sedimentación filtrar la solución y vertirlo en una
caja Petri
7. Secar la caja Petri durante 7 días a temperatura ambiente
8. Pesar la muestra secada y empaquetar

Resultados

IR

Como podemos observar en la imagen 2 al compuesta presenta picos máximos solo

a los mismos números de onda que los estándares secundarios presenta picos
máximos solo a los mismos números de onda que el estándar secundario Teniendo
en cuenta la molécula y el espectro IR de Alopurinol se pueden identificar grupos
funcionales por los picos máximos de números de onda que van de 3200 - 3100 cm-
1 para los OH; de 3500 - 2700 cm-1 aparecen tensiones de enlace N-H, C-H; y de
1800 - 1500 cm-1 aparecen tensiones de dobles enlaces en aromáticos, C=C, C=N.
De 1500 - 900 cm-1 aparece una zona de huella dactilar (denominada así porque
en ella cada compuesto presenta un conjunto de bandas característico que
lo diferencia del resto de los compuestos). Aparecen las tensiones de C-C, C-O y
C-N. Es una zona muy compleja y es
difícil hacer correlaciones. En la zona de 900 - 500 cm-1 aparecen las flexiones
fuera del plano. Estas bandas no tienen tampoco mucha utilidad excepto en los
anillos aromáticos y se usa para localizar los sustituyentes en los carbonos del anillo
 Imagen 2: Espectro infrarrojo de alopurinol

UV-vis

Imagen 3: Espectro UV-VIS de alopurinol

Todas las dispersiones mostraron una absorbancia disminuida pero los espectros
de todos los sólidos. Las dispersiones se desplazaron a la longitud de onda más
alta debido a la alta polaridad del solvente, como se muestra en la Imagen 3. Esto
se considera evidencia significativa de la interacción del Alopurinol
Masas

Imagen 4: Espectro de masas de alopurinol

La espectrometría de masas con trampa de iones del alopurinol proporcionó los

siguientes datos, el ion molecular protonado en m/z 136 que corresponde a la
pérdida uniforme de masa de electrones

Después se ve una perdida de 55 protones hasta llegar a 81 m/z con una intensidad
relativa de 10.3

Las tres pérdidas de masa de electrones pares son características de las

transformaciones metabólicas de estos antibióticos macrocíclicos.

RMN
 Imagen 5: Espectro de resonancia magnética nuclear de Alopurinol

La imagen 5 indica el espectro de 1H RMN de los picos del fármaco a 7.9 y 8.1ppm
los cuales corresponden al disolverlo DMSO. Los protones del alopurinol
provenientes de los anillos aromáticos aparecieron entre 12.2 y 12.4 ppm.

Referencias

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