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Constituyentes  químicos,  actividad  eliminadora  de  
Citar  este:  DOI:  10.1039/c7fo00330g
radicales  y  capacidad  inhibitoria  enzimática  de  
frutos  de  Cotoneaster  pannosus  Franch.
Francisco  Les,†  a  Víctor  López, *a  Giovanni  Caprioli,†b  Romilde  Iannarellib
b
Dennis  Fiorinic,  Marzia  Innocentid,  Maria  Bellumorid  y  Filippo  Maggi

Cotoneaster  pannosus  (Rosaceae)  es  un  arbusto  semiperennifolio,  que  produce  pepitas  globosas  de  color  rojo  
oscuro,  originario  de  China  y  ampliamente  utilizado  como  planta  ornamental  en  todo  el  mundo.  A  pesar  de  su  extenso  
cultivo,  se  dispone  de  poca  información  sobre  la  composición  química  y  actividades  biológicas  de  sus  frutos.  En  este  
trabajo  se  realizó  el  análisis  de  la  composición  química  de  frutos  de  C.  pannosus,  en  términos  de  componentes  
fenólicos,  carotenoides  y  ácido  ascórbico  por  HPLC/DAD,  HPLC/ESI­MS  y  MS/MS  así  como  en  términos  de  macro  
y  micro  Se  realizó  nutrición.  Los  frutos  demostraron  ser  una  buena  fuente  de  ácido  shikímico  y  ácidos  cafeoilquínicos,  
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mientras  que  el  β­caroteno,  el  glucósido  de  pelargonidina­3­O  y  la  cianidina­3,5­rutinósido  dieron  una  contribución  
Recibido  el  27  de  febrero  de  2017, importante  al  color  de  la  fruta.  Tanto  los  extractos  de  frutas  polares  como  apolares  mostraron  una  notable  actividad  
Aceptado  el  31  de  marzo  de  2017
eliminadora  de  radicales  y  efectos  inhibidores  contra  la  monoamino  oxidasa  A  (MAO­A),  la  tirosinasa  (TYR)  y  la  α­
DOI:  10.1039/c7fo00330g
glucosidasa,  lo  que  convierte  a  las  pepitas  rojas  de  C.  pannosus  en  un  ingrediente  candidato  prometedor  en  alimentos  
rsc.li/food­function funcionales  y  dietéticos.  suplementos

1.  Introducción América  del  Norte  y  regiones  templadas  del  norte  de  África.4  Su  centro  
de  distribución  está  en  China,  donde  está  presente  la  mayoría  de  las  
La  familia  de  las  rosáceas  comprende  varios  géneros  que  producen   especies  (alrededor  del  60%).5  Están  representadas  por  arbustos  
pequeños  frutos  carnosos  de  los  que  se  obtienen  nutracéuticos,   postrados  o  erectos,  caducifolios,  perennifolios  o  semiperennifolios.  o  
suplementos  dietéticos  y  productos  alimenticios.  Los  principales   árboles  pequeños  que  producen  inflorescencias  como  cimas  o  
ejemplos  son  las  fresas,  la  cereza,  la  mora,  la  frambuesa  roja  y  la   corimbos  y  frutos  de  color  rojo  a  negro  parecidos  a  drupas  acompañados  
negra,  cuyo  mercado  está  aumentando  en  los  EE.  UU.  debido  a  sus   de  un  cáliz  persistente.6  Las  especies  de  Cotoneaster  son  longevas,  
efectos  benéficos  para  la  salud .  Los  glucósidos  nol,  las  antocianinas  y   resistentes  al  frío  y  tolerantes  a  la  sequía  y,  por  estas  razones,  se  
los  ácidos  fenólicos  parecen  ser  los  más  importantes.1–3  Sin  embargo,   cultivan  comúnmente  con  fines  hortícolas.7  Su  taxonomía  a  menudo  
entre  los  muchos  frutos  de  las  rosáceas  que  se  encuentran  en  la   se  complica  debido  a  la  frecuente  hibridación  y  apomixes.4  Las  
naturaleza,  algunos  de  ellos  pueden  considerarse  pasados  por  alto   especies  del  género  Cotoneaster  también  se  utilizan  como  remedios  
debido  al  uso  ornamental  de  la  planta,  por  lo  que  merecen  una  mayor   tradicionales  en  todo  el  mundo,  por  ejemplo,  como  agentes  
investigación  con  el  fin  de  para  ser  explotado  como  alimento  funcional   cardiotónicos,  diuréticos,  expectorantes,  antivirales,  anticancerígenos  
o  componente  dietético.  Este  es  el  caso  de  los  frutos  del  Cotoneaster   y  antiespasmódicos.8,9  Los  glucósidos  de  flavona  y  los  flavonoles  se  
Medik.  género. encontraron  como  los  marcadores  quimiotaxónicos  del  género.5
C.  pannosus  Franch.  es  un  arbusto  semiperennifolio,  de  hasta  2  m  
El  género  Cotoneaster  (subfamilia  Maloideae)  comprende  alrededor   de  altura,  originario  de  China  (Sichuan  y  Yunnan).  La  planta  presenta  
de  90  especies  distribuidas  en  Europa  continental,  Asia  y ramillas  de  color  grisáceo,  pardo  o  pardo  purpúreo,  estípulas  caducas  
y  hojas  de  elípticas  a  ovadas,  cuneadas  en  la  base  y  tomentosas  de  
color  blanco  en  el  envés.  Las  inflorescencias  están  dadas  por  corimbos  
terminales  que  llevan  hasta  20  flores  blancas,  cada  una  con  20  
a
Departamento  de  Farmacia,  Facultad  de  Ciencias  de  la  Salud,  Universidad  de  San  Jorge,   estambres  y  anteras  de  color  rojo  violáceo.10  El  fruto  es  una  pepita  de  
Villanueva  de  Gallego,  Zaragoza,  España.  Correo  electrónico:  ilopez@usj.es color  rojo  oscuro,  globoso  u  ovoide,  de  7–8  mm  de  diámetro,  con  2  
b
Facultad  de  Farmacia,  Universidad  de  Camerino,  Camerino,  Italia
C
pirenos,  que  aparece  en  septiembre  hasta  octubre.11  La  C.  pannosus  
Facultad  de  Ciencias  y  Tecnología,  Universidad  de  Camerino,  Camerino,  Italia
d silvestre  se  encuentra  en  matorrales,  laderas,  lugares  rocosos  y  
Departamento  de  NEUROFARBA,  División  de  Ciencias  Farmacéuticas  y  
Nutracéuticas,  Universidad  de  Florencia,  Sesto  F.no,  Italia  †Estos  autores   baldíos  en  regiones  montañosas  desde  1100  a  3200  m  snm10  En  
contribuyeron  igualmente  al  artículo. China,  C.  pannosus  es  una  planta  ornamental  popular,  pero  en  otros  lugares  (p.  ej.,

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Papel Alimentos  y  Función

y  Australia)  escapa  al  cultivo  por  lo  que  se  considera  una  especie   Se  utilizó  el  sistema  Q  (Millipore,  Bedford,  EE.  UU.).  Todos  los  solventes  
invasora  de  las  comunidades  vegetales  naturales.11 y  soluciones  se  filtraron  a  través  de  un  filtro  de  PTFE  de  0,45  µm  de  
Aunque  esta  especie  ha  sido  ampliamente  utilizada  como  planta   Supelco  (Bellefonte,  PA,  EE.  UU.)  antes  de  su  uso.
ornamental,  hasta  el  momento  no  existen  estudios  científicos  sobre  los  
2.3.  Extracción  de  frutas
constituyentes  químicos  y  las  actividades  biológicas  de  sus  frutos.
Dada  la  facilidad  de  cultivo  y  la  tasa  de  crecimiento,  C.  pannosus  podría   2.3.1.  Compuestos  fenólicos.  Cincuenta  g  de  pepitas  similares  a  
explotarse  como  fuente  de  nutracéuticos  y  compuestos  bioactivos.  Por   drupas  de  C.  pannosus  frescas  se  trituraron  con  un  mortero  y  se  
lo  tanto,  el  primer  objetivo  de  este  estudio  fue  investigar  a  fondo  la   extrajeron  con  agitación  magnética  durante  1  h  con  300  ml  de  etanol:  
composición  química  de  las  pepitas  rojas  de  C.  pannosus  en  términos   agua  70:  30  (v/v)  acidificada  con  ácido  fórmico  al  0,1  %  (rendimiento  
de  componentes  fenólicos,  carotenoides,  ácido  ascórbico,  macro  y   12,52  %,  p/p  peso  seco).  Posteriormente,  el  extracto  se  secó  con  un  
micronutrientes.  Los  frutos  rojos  como  las  bayas  o  ciertas  drupas  se   rotavapor  a  30  °C,  se  liofilizó  y  se  almacenó  en  un  congelador  a  4  °C  hasta  su  uso.
consideran  tradicionalmente  como  fuente  de  compuestos  antioxidantes,   Para  el  análisis  por  HPLC,  las  muestras  se  prepararon  redisolviendo  20  
principalmente  por  su  alto  contenido  en  polifenoles,  capaces  de   mg  del  extracto  con  1  mL  de  acetonitrilo;  las  soluciones  de  muestra  se  
interactuar  con  las  especies  reactivas  del  oxígeno  (ROS)  y  prevenir  su   filtraron  a  través  de  un  filtro  de  PTFE  de  0,45  μm  de  Supelco  (Phenex,  
daño.  Estos  antioxidantes  participan  en  la  prevención  del  daño  causado   Phenomenex,  Torrance,  CA,  EE.  UU.)  antes  de  inyectarlas  en  HPLC­
por  las  ROS  al  eliminar  los  radicales  libres  y  por  lo  tanto  evitar  la   DAD.  Cada  muestra  se  analizó  por  triplicado.
progresión  de  ciertas  enfermedades.  El  daño  oxidativo  de  las  ROS   2.3.2.  antocianinas.  Los  frutos  liofilizados  (1  g)  se  molieron  y  el  polvo  
también  está  relacionado  con  enfermedades  neurodegenerativas  y   obtenido  se  extrajo  con  30  mL  de  EtOH  al  70%  ajustado  a  pH  1.8  
metabólicas  como  la  diabetes  tipo  2.  Por  estas  razones,  el  segundo   mediante  la  adición  de  HCOOH,  durante  la  noche  en  agitación  y  
objetivo  de  este  trabajo  fue  probar  los  extractos  de  la  fruta  de  C.  pannosus   centrifugado  por  Hermle  LaborTechnik  (5000  rpm  ×  5  min).  El  volumen  
contra  los  radicales  libres  y  las  enzimas,  a  saber,  la  monoaminooxidasa   final  del  extracto  fue  de  50  mL.
A  (MAO­A),  la  tirosinasa  (TYR),  la  acetilcolinesterasa  (AChE)  y  la  α­ La  muestra  obtenida  se  analizó  por  HPLC­DAD­MS.
glucosidasa. ,  cuya  inhibición  puede  mediar  efectos  neuroprotectores  y   2.3.3.  carotenoides.  Se  molió  un  gramo  de  frutos  liofilizados  y  se  
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antidiabéticos. extrajo  con  35  mL  de  etanol/hexano  55 :  45  (v/v)  bajo  agitación  durante  
10  min,  en  oscuridad.  Después  de  la  filtración,  el  residuo  sólido  se  
sometió  a  extracción  adicional  en  las  mismas  condiciones.  Luego  el  
extracto  obtenido  fue  secado  en  rotavapor  a  30  °C  y  redisuelto  con  5  mL  
2.  Materiales  y  métodos de  acetona  para  el  análisis  HPLC­DAD.

2.1.  Materiales  vegetales
2.3.4.  Ácido  ascórbico.  El  procedimiento  de  preparación  de  la  muestra  
Se  recolectaron  frutos  de  C.  pannosus  de  un  árbol  cultivado  en  el  Jardín   se  realizó  de  acuerdo  con  Caprioli  et  al.12  Brevemente,  se  extrajeron  
Botánico  de  la  Universidad  de  Camerino  (N  43°08′  06″;  E  13°04′09″;  638   cinco  g  de  la  muestra  durante  4  h  con  25  mL  de  agua  con  MPA  (ácido  
m  snm),  Camerino,  Italia,  en  septiembre  de  2015.  Un  ejemplar  de   metafosfórico)  al  5%  como  solvente  de  extracción,  en  la  oscuridad.  
herbario  fue  depositado  en  el  Herbarium  Universitatis  Camerinensis  de   Posteriormente,  las  muestras  se  centrifugaron  a  5000  rpm  durante  20  
la  Escuela  de  Biociencias  y
min  y  luego  se  filtraron  antes  del  análisis  HPLC­MS.  Las  extracciones  se  
Medicina  Veterinaria,  Universidad  de  Camerino,  bajo  el  códice  CAME   realizaron  por  triplicado.  Para  estimar  el  contenido  de  agua,  el  material  
27699,  y  archivado  en  la  base  de  datos  botánica  anArchive  (http:// fresco  se  dejó  en  una  estufa  a  133  °C  durante  24  h;  el  contenido  de  
www.anarchive.it). humedad  se  determinó  pesando  las  muestras  de  cada  colección  antes  y  
después  del  secado.
2.2.  Reactivos  y  estándares  Los  
2.4.  Análisis  instrumental
estándares  analíticos  de  ácido  gálico,  hidrato  de  catequina,  tequina  
epica,  ácido  3­O­cafeoilquínico,  ácido  3,5­di­O­cafeoilquínico,  ácido  5­O­ 2.4.1.  compuestos  polares.  Los  estudios  de  HPLC­DAD  se  realizaron  
cafeoilquínico,  ácido  cinámico,  ácido  shikímico,  rutina,  quercitrina ,   utilizando  un  Hewlett­Packard  HP­1090  Serie  II  (Palo  Alto,  CA,  EE.  UU.),  
hiperósido  y  naringina  se  adquirieron  de  Sigma­Aldrich  (Milán,  Italia).  Las   equipado  con  un  desgasificador  de  vacío,  una  bomba  binaria,  un  
soluciones  estándar  madre  se  prepararon  disolviendo  10  mg  de  cada   muestreador  automático  y  un  detector  de  matriz  de  fotodiodos  (DAD)  
compuesto  en  10  mL  de  metanol  y  se  almacenaron  en  un  refrigerador   modelo  1046A  HP  siguiendo  un  método  anterior  con  algunas  
protegido  de  la  oscuridad  con  papel  de  aluminio.  Las  soluciones  de   modificaciones.13,14  La  columna  analítica  utilizada  para  la  separación  
trabajo  estándar  se  prepararon  cada  día  diluyendo  las  soluciones  madre   de  los  analitos  fue  Synergi  Polar­RP  C18  (4,6  mm  ×  250  mm,  4  µm  id)  
con  metanol.  El  ácido  metafosfórico  junto  con  disolventes  de  grado  HPLC   de  Phenomenex  (Chesire,  Reino  Unido).
como  metanol,  etanol,  hexano  y  acetonitrilo  se  adquirieron  de  Sigma­ La  columna  estaba  precedida  por  un  cartucho  de  guardia  de  
Aldrich  (Milán,  Italia),  mientras  que  se  compraron  ácido  fórmico  de  grado   seguridad  Polar  RP  (4  ×  3  mm  de  d.i.).  La  fase  móvil  fue  agua  (A)  y  
HPLC  al  99­100  %,  hidróxido  de  potasio  y  sulfato  de  sodio  anhidro.  de   acetonitrilo  (B),  ambos  con  0,1  %  de  ácido  fórmico,  trabajando  en  modo  
JT  Baker  BV  (Deventer,  Holanda). gradiente  de  la  siguiente  manera:  0  min,  20  %  B,  0–15  min,  60  %  B;  
15­20  min,  60%  B;  20–25  min,  20%  B;  25–30  min,  20  %  B.  El  caudal  se  
Para  la  preparación  de  muestras  y  el  análisis  cromatográfico,  agua   fijó  en  0,8  ml  min−1  y  la  temperatura  de  la  columna  ,se  controló  a  30  °C.  
desionizada  de  resistividad  ≥18  MΩ  cm−1  purificada  con  un  Milli El  volumen  de  inyección  fue

Función  de  alimentos. Esta  revista  es  ©  The  Royal  Society  of  Chemistry  2017
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Alimentos  y  Función Papel

5  l.  Los  espectros  UV  se  registraron  en  el  rango  de  230  a  350  nm  para   las  fases  móviles  fueron  ácido  fórmico  al  0,1%/agua  y  acetona;  Se  aplicó  
los  analitos  objetivo,  donde  se  usaron  230  nm  para  la  cuantificación  de   un  gradiente  de  solvente  lineal  de  varios  pasos:  en  0­20  min  de  80  a  
ácido  shikímico,  256  nm  para  rutina,  hiperósido  y  quercitrina,  272  nm   100%  de  acetona  y  una  meseta  final  de  5  min.
para  ácido  gálico,  280  nm  para  catequina,  epicatequina,  cin  ácido   Tiempo  de  equilibrio  10  min,  caudal  0,4  mL  min−1,   , temperatura  del  horno

námico,  naringina,  325  nm  para  ácido  3­O­cafeoilquínico,  ácido  5­O   temperatura  26  °C  y  volumen  de  inyección  10  μL.  La  evaluación  
cafeoilquínico  y  ácido  3,5­di­O­cafeoilquínico. cuantitativa  de  carotenoides  se  realizó  mediante  el  uso  del  estándar  
2.4.2.  antocianinas.  El  análisis  cuantitativo  se  llevó  a  cabo  utilizando   externo  β­caroteno  a  430  nm.  La  curva  de  calibración  estuvo  en  un  rango  
un  cromatógrafo  de  líquidos  HP­1200  equipado  con  un  detector  DAD.  La   de  linealidad  entre  0,1  μg  y  1,94  μg  con  un  valor  de  0,9999.  Los  datos  
columna  era  una  Luna  RP  18  (150  ×  3  mm,  5  μm)  de  Phenomenex.  La   2  una  r cuantitativos  se  calcularon  como
fase  móvil  fue  (A)  agua  pH  2,0  acidificada  con  HCOOH  y  (B)  acetonitrilo.   medio  de  medidas  por  triplicado.
Se  aplicó  el  siguiente  gradiente  lineal  de  varios  pasos:  del  95  %  al  85  %   2.4.4.  Ácido  ascórbico.  Los  estudios  de  HPLC­MS  se  realizaron  con  
de  A  en  3  min,  11  min  para  alcanzar  el  75  %  de  A,  luego  6  min  para   un  Agilent  1290  Infinity  series  y  un  Triple  Quadrupole  6420  de  Agilent  
llegar  al  65  %  de  A,  2  min  para  alcanzar  el  100  %  de  B.  El  tiempo  total   Technologies  (Santa  Clara,  CA)  equipado  con  una  fuente  ESI  que  
de  el  análisis  fue  de  22  min,  caudal  0,4  mL  min−1  y  temperatura  del   funciona  en  modo  negativo.  La  columna  utilizada  fue  una  Synergi  Polar­
horno  26  ±  0,5  °C.  La  evaluación  cuantitativa  de  las  antocianinas  se   RP  C18  (4,6  mm  ×  150  mm,  4  µm  id)  y  el  análisis  de  ácido  ascórbico  se  
realizó  utilizando  curvas  de  regresión  de  cuatro  puntos  (r  =  0,9998)  de   realizó  según  un  método  ya  propuesto  por  Caprioli  et  al.15  En  resumen,  
2
queracianina  (cianidina­3­O­rutinósido)  como  compuesto  de  referencia,   las  fases  móviles  para  HPLC­  ESI  ­Los  análisis  MS  (triple  cuadrupolo)  
calculado  a  520  nm  en  el  rango  de  linealidad  de  0  a  1,7  μg.  Todas  las   fueron  agua  (95  %)  y  metanol  (5  %),  ambos  con  un  0,1  %  de  ácido  
antocianinas  se  expresaron  en  queracianina  (MW  595),  aplicando  el   fórmico  a  un  caudal  de  0,7  ml  min−1  en  condiciones  isocráticas.  El  
factor  de  corrección  por  el  peso  molecular.  Los  datos  cuantitativos  se   volumen  de  inyección  fue  de  5  μL  y  la  temperatura  de  la  columna  fue  
calcularon  como  un  medio  de  mediciones  por  triplicado. de  30  °C.  Los  ajustes  de  la  fuente  de  ionización  (electrospray)  fueron  los  
siguientes:  la  temperatura  del  gas  de  secado  fue  de  350  °C,  el  flujo  de  
El  análisis  de  HPLC/MS  se  llevó  a  cabo  utilizando  una  CapPump   gas  fue  de  13  l  min−1  fue  de  60  psi  y  el  voltaje  del  capilar  fue  de  4000  V.
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Serie  1100  de  Agilent  Technologies  (Waldbronn,  Alemania)  acoplada  a   , la  presión  del  nebulizador
un  inyector  automático  Agilent  Micro  ALS,  ambos  totalmente  controlados  
desde  el  sistema  de  datos  API  4000.  Para  este  estudio  se  utilizó  un   Las  cuantificaciones  se  realizaron  analizando  en  modo  de  monitoreo  de  
espectrómetro  de  masas  Triple  Quad  de  sobremesa  API  4000  de   iones  seleccionados  (SIM)  los  iones  m/z  175.1  [M  −  H]−  para  ácido  
Applied  Biosystems­Sciex  (Toronto,  Canadá)  equipado  con  la  fuente   ascórbico.
TurboIonSpray.  La  fuente  TurboIonSpray  se  operó  en  modo  de  iones  
positivos  a  un  voltaje  de  5500  V  y  con  un  flujo  de  gas  “turbo”  de  10  L  
2.5.  Análisis  proximal,  contenido  mineral  y  composición  de  
min−1  de  aire  calentado  a  350  °C  (temperatura  nominal  de  la  pistola  de  
ácidos  grasos  
calentamiento).  Los  ajustes  de  resolución  y  calibración  de  masa  en  los  
cuadrupolos  de  resolución  se  realizaron  automáticamente  mediante  el   Se  analizó  la  composición  química  (humedad,  proteína,  grasa,  fibra  
uso  de  una  solución  de  PPG  10−7  mol  L−1  introducida  a  través  de  la   dietética,  carbohidratos  y  cenizas)  de  frutos  de  C.  pannosus.15  El  
bomba  de  infusión  incorporada.  La  resolución  se  fijó  en  ambos   contenido  de  humedad  se  calculó  secando  la  muestra  en  horno  hasta  
cuadrupolos  de  resolución  a  0,7  amu  (medida  a  la  mitad  de  la  altura)   un  peso  constante  (24  h,  133  °C).  El  contenido  de  proteína  cruda  se  
para  todos  los  experimentos  de  MS  y  MS/MS.  La  disociación  activada   estimó  utilizando  el  método  de  Kjeldahl;  la  grasa  cruda  se  determinó  
por  colisión  (CAD)  MS/MS  se  realizó  a  través  de  la  celda  de  colisión   extrayendo  un  peso  conocido  de  la  muestra  en  polvo  con  éter  de  
LINAC  Q2,  operando  con  10  mT  o  presión  de  nitrógeno  como  gas  de   petróleo,  utilizando  un  aparato  Soxhlet;  el  contenido  de  cenizas  se  
colisión.  El  potencial  de  desagrupamiento  (DP),  el  potencial  de  salida   determinó  por  incineración  a  600  ±  15  °C  durante  1  h.  El  contenido  de  
de  colisión  (CXP)  y  la  energía  de  colisión  (CE)  se  optimizaron   fibra  dietética  se  determinó  mediante  un  método  gravimétrico  después  
automáticamente  para  el  clorhidrato  de  queracianina  mediante  la  opción   de  la  hidrólisis  ácida  de  las  muestras.  Los  carbohidratos  totales  se  
de  "optimización  cuantitativa".  Se  monitorearon  las  siguientes   calcularon  por  diferencia,  restando  a  100  g  la  cantidad  de  diferentes  
transiciones:  m/z  449,3  >  287,2  m/z  y  m/z  595,4  >  287,2  m/z. nutrientes.  La  energía  total  se  calculó  de  acuerdo  con  las  siguientes  
CE  y  CXP  óptimos  se  encontraron  a  32,  28  V  y  8,  14  V  respectivamente.   ecuaciones:
El  DP  resultante  fue  de  +90  V  para  todas  las  transiciones.  Los  espectros  
Energía  ðkcalÞ  ¼  4  ðg  proteína  þ  g  carbohidratosÞ  þ  9  ðg  
MS  y  MS/MS  se  recopilaron  en  modo  de  flujo  continuo  conectando  la  
lípidosÞ:
bomba  de  infusión  directamente  a  la  fuente  TurboIonSpray.  Los  datos  
se  procesaron  utilizando  el  software  propietario  Analyst  1.5,2  que  incluye   También  se  utilizaron  frutos  de  C.  pannosus  para  determinar  las  
la  opción  'Explorar' (para  interpretación  cromatográfica  y  espectral)  y  la   concentraciones  de  macroelementos  (Mg,  Na,  K  y  Ca)  y  microelementos  
opción  'Cuantificar' (para  generación  de  información  cuantitativa). (Cu,  Zn  y  Fe).15  Un  g  de  cada  muestra  de  polvo  se  digirió  con  HNO3  y  
HClO4  en  la  proporción  4:1  durante  15  min  a  350  °C  hasta  obtener  una  
2.4.3.  carotenoides.  Los  análisis  se  realizaron  con  un  cromatógrafo   solución  transparente.  El  volumen  deseado
de  líquidos  HP1100L  acoplado  a  un  detector  DAD  (Agilent  Technologies,   de  agua  bidestilada  se  añadió  a  las  muestras  digeridas  y  enfriadas.  Los  
Palo  Alto,  CA,  EE.  UU.)  utilizando  una  columna  Luna  RP  18  (150  ×  3   contenidos  minerales  en  todas  las  muestras  digeridas  se  analizaron  a  
mm,  5  μm  id)  de  Phenomenex.  El través  de  ICP­MS  (Agilent  7500s,  Agilent  Technologies,

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Waldbronn,  Alemania).  Los  resultados,  expresados  como  porcentaje  en  peso   contenía  una  mezcla  de  10  μL  de  extractos  de  C.  pannosus  en  DMSO,  40  μL  
sobre  la  base  del  peso  fresco,  se  obtuvieron  a  partir  de  mediciones  por   de  L­DOPA,  80  μL  de  tampón  fosfato  (pH  =  6,8)  y  40  μL  de  tirosinasa.  
triplicado  de  cada  muestra. También  se  consideraron  pocillos  de  control  y  blancos  en  la  placa.  Se  midió  
Para  determinar  la  composición  de  ácidos  grasos  se  utilizó  el  procedimiento   la  absorbancia  a  475  nm.  El  ácido  α­kójico  se  utilizó  como  sustancia  de  
informado  en  Caprioli  et  al.  15  Brevemente ,  la  fracción  lipídica  de  una   referencia  en  este  ensayo.
alícuota  de  5  g  de  frutos  de  C.  pannosus  se  obtuvo  con  hexano  y  etanol  y   Los  resultados  se  expresaron  como  porcentaje  del  control.
luego,  para  obtener  ésteres  metílicos  de  ácidos  grasos,  se  sometió  a   RSC  (%)  =  [(Abscontrol  −  Absmuestra)/Abscontrol]  ×  100.
transmetilación  con  hidróxido  de  potasio  metanólico  y  finalmente  se  analizó.   2.6.5.  Inhibición  de  la  α­glucosidasa.  La  capacidad  de  los  extractos  de  C.  
por  cromatografía  de  gases  junto  con  detección  de  ionización  de  llama. pannosus  para  inhibir  la  α­glucosidasa  se  midió  en  un  lector  de  microplacas  
de  96  pozos  a  405  nm  como  se  describió  anteriormente.20  Cada  pozo  
contenía  50  μL  de  muestra  y  100  μL  de  enzima.  Después  de  10  min  de  
2.6.  Bioactividades  de  extractos  de  frutos  de  C.  pannosus
preincubación,  se  agregaron  50  μL  de  pNPG  y  se  incubaron  a  37  °C  durante  
Extractos  preparados  siguiendo  los  procedimientos  informados  en  las   20  min.  pozos  de  control  y
secciones  2.3.1.  y  2.3.3.  corresponden  a  las  fracciones  polar  y  apolar  de  los   También  se  consideraron  espacios  en  blanco  en  la  placa.  Se  utilizó  acarbosa  
frutos  de  C.  pannosus  y  fueron  evaluados  para  las  siguientes  actividades. como  compuesto  de  referencia.  Los  resultados  se  expresaron  como  porcentaje  
del  control.  RSC  (%)  =  [(Abscontrol  −  Absmuestra)/  Abscontrol]  ×  100.
2.6.1.  Actividad  antioxidante  frente  a  los  radicales  DPPH.  La  actividad  
antioxidante  de  los  extractos  de  C.  pannosus  se  midió  utilizando  un  método  
colorimétrico  basado  en  la  capacidad  de  eliminación  de  los  antioxidantes  para  
eliminar  los  radicales  libres  DPPH  (2,2­difenil­1­picrilhidrazilo).16  El  electrón   3.  Resultados  y  discusión
impar  del  átomo  de  nitrógeno  en  DPPH  se  reduce  al  recibir  un  átomo  de  
3.1.  Cuantificación  de  flavonoides,  ácidos  fenólicos  y  shikímicos
hidrógeno  de  los  antioxidantes  a  la  correspondiente  hidrazina.  Se  agregaron  
150  μL  de  una  solución  metanólica  de  DPPH  (0.04  mg  mL−1 )  a  150  μL  de  
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muestras  de  diferentes  concentraciones  disueltas  en  metanol.  La  absorbancia   Realizamos  el  análisis  simultáneo  de  doce  compuestos,  a  saber,  ácido  
se  midió  a  517  nm  después  de  30  min  de  reacción  a  temperatura  ambiente   shikímico,  ácido  gálico,  catequina,  epicate  chin,  ácido  3­O­cafeoilquínico,  
en  un  lector  de  microplacas.  Los  controles  contenían  una  solución  de  DPPH   ácido  5­O­cafeoilquínico,  ácido  3,5­di­O  cafeoilquínico,  rutina,  hiperósido,  
y  el  disolvente  de  la  muestra  (metanol).  Las  interferencias  de  fondo  de  los   quercitrina,  ácido  cinámico  y  naringina,  en  el  extracto  del  fruto  polar  de  C.  
solventes  se  dedujeron  de  las  actividades  antes  de  calcular  la  capacidad  de   pannosus  (ver  sección  2.3.1.).  En  el  Cuadro  1  se  reporta  su  determinación  
captación  de  radicales  mediante  la  fórmula:  RSC  (%)  =  [(Abscontrol  −   cuantitativa  en  los  frutos  y  las  concentraciones  se  expresan  en  mg  por  kg  de  
Abssample)/Abscontrol]  ×  100. peso  fresco.  Solo  el  ácido  3,5­di­O­cafeoilquínico  y  la  quer  citrina  no  estuvieron  
presentes  en  los  frutos.  El  ácido  shikímico  (1370,1  mg  kg−1 ),  el  ácido  5­O­
El  ácido  ascórbico,  como  antioxidante  de  referencia,  también  se  midió  para   cafeoilquínico  (1254,0  mg  kg−1 )  y  el  ácido  3­O  cafeoilquínico  (865,3  mg  
compararlo  con  la  actividad  antioxidante  de  los  extractos  de  C.  pannosus. kg−1 )  fueron  los  compuestos  más  abundantes.  A  los  derivados  del  ácido  
2.6.2.  Inhibición  de  la  MAO­A.  El  bioensayo  se  realizó  en  una  microplaca   cafeoilquínico,  como  el  ácido  3­O  cafeoilquínico  y  el  ácido  5­O­cafeoilquínico,  
de  96  pocillos  siguiendo  un  protocolo  previo17.  Cada  pocillo  contenía  50  μL   se  les  pueden  atribuir  una  gran  cantidad  de  propiedades  farmacológicas,  
de  extractos  de  C.  pannosus  en  metanol  (o  disolvente  DMSO  como  control),   incluida  la  anti
50  μL  de  solución  cromogénica  (ácido  vanílico  0,8  mM,  417  mM  4­
aminoantipirina  y  4  U  mL­1  de  peroxidasa  de  rábano  picante  en  tampón  de  
fosfato  de  potasio  pH  7,6),  100  μL  de  tiramina  3  mM  y  50  μL  de  8  U  mL­1  de  
MAO­A. Cuadro  1  Determinación  cuantitativa  de  los  compuestos  analizados  en  frutos  de  Cotoneaster  
También  se  consideraron  pocillos  de  control  y  blancos  en  la  placa. pannosus  (mg  por  kg  de  peso  fresco);  las  desviaciones  estándar  relativas  están  en  un  rango  
de  0.5  a  4.7%  (n  =  3)
Se  leyó  la  absorbancia  a  490  nm  cada  5  min  durante  30  min.
Clorgyline  se  utilizó  como  sustancia  de  referencia.
Retención Concentración
2.6.3.  Inhibición  de  la  acetilcolinesterasa.  La  actividad  se  midió  aplicando   Compuesto hora  (min) (mg  kg−1  fruta  fresca)
el  método  de  Ellman  a  microplacas  de  96  pocillos.18  Cada  pocillo  contenía  
ácido  shikímico 3,4   1370.1  ±  308  
25  μL  de  ATCI  15  mM  en  agua  Millipore,  125  μL  de  DTNB  3  mM  en  tampón   ácido  gálico 4,9   .4  ±  4.224.0  
(Tris  HCl  50  mM,  pH  8,  NaCl  0,1  M,  MgCl2∙6H2O  0,02  M ),  50  μL  de  tampón   Ácido  5­O­cafeoilquínico 5,3   ±  591  ±  59.9  ±  
Ácido  3­O­cafeoilquínico 6,7   59.9  ±  29.9  ±  
(Tris­HCl  50  mM,  pH  8,  suero  bovino  al  0,1  %),  25  μL  de  extractos  de  C.  
Ácido  3,5­Di­O­cafeoilquínico 10,8   59  ±  
pannosus  disueltos  en  metanol  y  25  μL  de  AchE  0,22  U  mL−  1 .  También  se   7,5   037.7  ±  15  
(+)­Hidrato  de  catequina
consideraron  pocillos  de  control  y  blancos  en  la  placa.  La  absorbancia  se   (­)­Epicatequina 7,9   ±  40
midió  ocho  veces  durante  6  min  a  405  nm.  Se  usó  galantamina  como  inhibidor   Rutina 8,2  
hiperósido 9,2  
positivo. 9,9  
Naringín
quercitrina 10,3  
ácido  cinámico 15,2
Contenido  total
2.6.4.  Inhibición  de  tirosinasa.  El  ensayo  se  realizó  en  microplacas  de  96  
a nd  significa  no  detectado.
pocillos  utilizando  un  método  descrito.19  Cada  pocillo

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oxidante,  antibacteriana,  antihistamínica,  hepatoprotectora  y  neuroprotectora.14  Por  otra  parte,  podemos  concluir  que  las  pepitas  rojas  de  C.  pannosus  
La  presencia  y  la  cantidad  de  estos  ácidos  hidroxicinámicos  en  la  fruta  de  C.   demostraron  ser  una  buena  fuente  de  polifenoles.
pannosus  es  mayor  que  la  de  los  arándanos  (1130–2310  mg  kg−1 ),  las  
3.2.  Cuantificación  de  pigmentos
frambuesas  (230–270  mg  kg−1 ),  fresas  (470–530  mg  kg−1 )  en  extractos  
crudos  obtenidos  con  70  %  de  acetona,  60  %  de  metanol,  agua  y  hexano   3.2.1.  antocianinas.  En  el  presente  estudio,  se  identificaron  dos  
como  diferentes  solventes  de  extracción  según  lo  informado  por  Kähkönen   antocianinas  individuales,  en  particular  diglucósidos  y  glucósidos  de  
et  al.21  Otros  polifenoles  presentes  en  las  bayas  de  C.  pannosus  fueron   antocianidinas  (pelargonidina  y  cianidina),  mediante  análisis  HPLC/DAD,  
ácido  gálico  (308,4   HPLC/ESI­MS  y  MS/MS  como  se  indica  en  la  Fig.  1.  En  la  Tabla  2,  Se  
mg  kg­1 ),  los  dos  flavanoles  catequina  (59,9  mg  kg­1 )  y  epicatequina   informan  los  compuestos  individuales  analizados,  junto  con  el  peso  
(101,0  mg  kg­1 ),  y  el  glucósido  de  flavonol  rutina  (64,1  mg  kg­1 ).  Finalmente,   molecular,  los  fragmentos  relativos  obtenidos  del  análisis  de  masas  y  la  
se  encontraron  niveles  bajos  de  naringina  (10,9  mg  kg−1 ),  hiperósido  (2,5   cantidad  de  antocianinas  detectadas  (µg  g−1  de  bayas  frescas).  La  
mg  kg−1 )  y  ácido  cinámico  (1,4  mg  kg−1 ). antocianina  más  abundante  en  las  bayas  de  C.  pannosus  fue  el  glucósido  
pelargoni  din­3­O  (72,66  ±  1,9  µg  g−1  fw),  seguida  de  la  cianidina  3,5­
rutinósido  (32,16  ±  2,5  µg  g−1  fw).  El  primero  representó  el  69%  de  la  
El  nivel  de  ácido  gálico  detectado  en  el  extracto  de  la  fruta  de  C.  pannosus   cantidad  total  de  antocianinas  (104,81  ±  2,99  µg  g−1  pf).  Este  valor  está  de  
(308,4  mg  kg­1 )  es  más  alto  que  los  informados  en  la  mayoría  de  las   acuerdo  con  lo  reportado  en  estudios  previos  realizados  en  frutos  de  la  
muestras  de  arándanos  y  moras  (de  falta  a  64,2  mg  kg­1 ).22  Los  niveles  de   especie  Cotoneaster.23  3.2.2.  carotenoides.  El  perfil  cromatográfico  de  la  
catequina  y  epicatequina  fueron  en  cambio  comparables  a  los  reportados  en   fracción  carotenoide,  presentado  en  la  Fig.  2,  mostró  8  
arándanos  y  moras  (rango  de  98.7–3874.4  mg  kg−1  para  catequina  y  de  falta   compuestos  diferentes,  siendo  el  β­caroteno  (C4)  el  principal  y  
a  1295.1  mg  kg−1  para  epicatequina),22  aunque  sus  concentraciones  son   representando  el  74%  del  contenido  total  de  carotenoide.  La  identificación  de
muy  variables  de  acuerdo  a  los  diferentes  cultivares  y  áreas  geográficas.  
origen  de  las  muestras.  Con  base  en  lo  anterior
este  compuesto  se  hizo  por  comparación  de  Rt  y  UV­Vis
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Fig.  1  Perfil  cromatográfico  de  antocianinas  a  520  nm  presentes  en  muestras  de  frutos  de  Cotoneaster  pannosus.  A1,  cianidina­3,5­diglucósido;  A2,  gonidin­3­O­glucósido  pelar.

Tabla  2  Identificación  y  cuantificación  de  antocianinas  en  extracto  etanólico­acuoso  de  muestras  de  frutos  de  Cotoneaster  pannosus  (μg  g−1  pepitas  frescas)

Compuesto Molecular  (m/z) Fragmentos  (m/z) Nombre μg  g−1  FW

1   595   449,  287   Cianidina­3,5­rutinósido 32,155  ±  1,9  

2 433 271 Pelargonidin­3­glucósido 72,66  ±  2,5  
Suma  de  antocianinas 104,81  ±  2,99

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Fig.  2  Perfil  cromatográfico  de  carotenoides  a  430  nm.  C4,  β­caroteno;  C1­C8,  carotenoides  no  identificados.

espectro  con  respecto  a  los  del  estándar  comercial  de  β­caroteno.   Tabla  3  Composición  proximal  y  contenido  mineral  de  los
El  contenido  de  carotenoides  en  la  fruta  de  C.  pannosus  se  informa   Frutos  de  cotoneaster  pannosus
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en  la  Fig.  3  y  la  cantidad  total  fue  de  14  μg  g­1  pf.
Este  es  el  primer  informe  sobre  el  contenido  de  carotenoides  de   Bayas  de  cotoneaster  pannusus

frutos  de  C.  pannosus.  En  la  literatura  se  documentó  la  presencia   Humedad  (%) 75,37  ±  3,17

de  carotenos  en  frutos  de  especies  de  Cotoneaster  y  afines.  Por   Macronutrientes  (%)
Proteína 1,3  ±  0,1  
ejemplo,  se  informó  que  la  fruta  madura  de  Pyracantha  angustifolia   17,0  ±  0,5  
Carbohidrato
es  una  buena  fuente  de  pro­γ­caroteno.24  Se  encontró  una  cantidad   Gordo 0,05  ±  0,01  
1,42  ±  0,04  
muy  pequeña  de  β­caroteno  en  el  extracto  etanólico  de  rama  de  C.   Ceniza

Fibra  bruta 4,6  ±  0,1  
horizontalis.25  Schaefer  et  al.  informó  que  el  contenido  de   75  ±  2,0  
Energía  (kcal)
carotenoides  en  frutos  de  siete  especies  de  Cotoneaster  (p.  ej.,  C.   Ácido  ascórbico  (mg  por  100  g) 29,53  ±  1,11

affinis,  C.  dammeri,  C.  dielsianus,  C.  melanocarpa,  C.  moupensis,   Minerales  (mg  kg−1 )
23
277  ±  77,6  
C.  nebrodensis)  estaba  en  el  rango  de  0–55  mg  g−  1 .
magnesio

Ya 49,3  ±  13,8
k 2607,9  ±  730,2  
Eso 2950,9  ±  826,25  1,5  
3.3.  Análisis  aproximado
Con ±  0,1  7,4  ±  
Los  resultados  de  la  composición  química  y  el  valor  energético   zinc 2,1  13  ±  3,6
Fe
estimado  (estimado  sobre  la  base  del  peso  fresco)  obtenidos  para  
C.  pannosus  se  muestran  en  la  Tabla  3,  mientras  que  la  composición   a Los  valores,  referidos  a  materia  fresca,  son  medias  de  tres  determinaciones  ±  DE.
de  ácidos  grasos  se  informa  en  la  Tabla  4.  El  contenido  de  humedad  fue

Fig.  3  Resultados  cuantitativos  del  contenido  de  carotenoides  expresado  en  μg  g−1
frutas  frescas.
75,4%.  Se  encontró  que  la  proteína  era  1.3%,  mientras  que  los  
carbohidratos  eran  17.0%.  Las  grasas  fueron  0,05%.  El  ácido  graso  
más  abundante  de  la  fracción  lipídica  fue  el  ácido  Z,Z­9,12­
octadecadienoico  (ácido  linoleico),  representando  el  66,8%  de  la  
composición  total  de  ácidos  grasos.  El  ácido  linoleico  es  un  ácido  
graso  esencial  perteneciente  a  la  serie  n­6;  se  requiere  para  la  
biosíntesis  de  eicosa  noids  pero  no  puede  ser  sintetizado  por  el  
cuerpo  humano;  es  el  principal  ácido  graso  poliinsaturado  en  la  
mayoría  de  las  dietas.  La  sustitución  de  ácidos  grasos  saturados  en  
la  dieta  por  ácido  linoleico  se  ha  asociado  con  mejores  perfiles  de  
lipoproteínas  séricas  y  menor  riesgo  de  enfermedad  arterial  
coronaria.26  El  ácido  graso  Z­9­  octadecanoico  (ácido  oleico)  
representó  el  22,8%  de  la  composición  total. .  El  ácido  oleico  es  el  principal  gras

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Cuadro  4  Composición  de  ácidos  grasos  de  los  frutos  de  Cotoneaster  pannosus 100  g−1 )  y  naranja  (76  mg  100  g−1 ),  pero  comparable  
con  respecto  a  otras  frutas  y  verduras  como  perejil  (26,84  
Ácido  graso Promedioa  (%) RSDa,b  (%) mg  100  g−1 ),  piña  (24,22  mg  100  g−1 )  y  carambola  
ácido  hexadecanoico 5,1   12,5   (18,65  mg  100  g−1 ).15,30,31
ácido  octadecanoico 0,9   6,4  
Ácido  Z­9­Octadecenoico 22,8   6,6  
Ácido  Z­11­Octadecenoico 1,3   2,4  
3.4.  Bioactividades  de  los  extractos  de  frutos  de  Cotoneaster  
Ácido  Z,Z­9,12­Octadecadienoico 66,8   3,0  
Ácido  Z,Z,Z­9,12,15­Octadecatrienoico 2,9 7,3
pannosus  El  ensayo  DPPH  indicó  que  los  extractos  de  C.  pannosus  tienen  

SFA  totalesc 6,1   propiedades  antioxidantes  debido  a  su  capacidad  para  eliminar  los  radicales  libres.

Total  MUFAsd 24,2   Los  extractos  mostraron  una  actividad  antirradical  dependiente  de  la  dosis  
AGPI  totales 69,8  
(Fig.  4A),  y  los  valores  de  IC50  se  calcularon  mediante  regresión  no  lineal,  
Ratio  n­6  PUFAs/n­3  PUFAs 22,9
siendo  47,3  y  54,9  µg  mL−1  para  los  extractos  polar  y  apolar  de  C.  
a b
Número  de  réplicas:  n  =  4. Desviación  estándar  relativa  (RSD),  n  =  4. pannosus,  respectivamente,  y  2,7  µg  mL−1.  por  ácido  ascórbico.  Estos  
C d
Ácidos  grasos  saturados  (AGS). Ácidos  grasos  monoinsaturados  (MUFA). resultados  muestran  que  C.  pannosus  puede  representar  una  fuente  
Es
Ácidos  grasos  poliinsaturados  (PUFA).
interesante  de  compuestos  antioxidantes.
Otras  especies  del  género  Cotoneaster  ya  han  demostrado  propiedades  
antioxidantes  e  inhibidoras  de  algunas  enzimas  (colinesterasa,  tirosinasa,  α­
ácido  en  la  dieta  y  su  ingesta  se  ha  asociado  en  varios  estudios  con  los   amilasa  y  α­glucosidasa)32–34.  Sin  embargo,  las  propiedades  bioactivas  
efectos  beneficiosos  de  la  dieta  mediterránea27.  El  único  ácido  graso   de  la  especie  C.  pannosus  nunca  han  sido  estudiadas  ni  estudiadas.  descrito  
saturado  detectado  fue  el  ácido  hexadecanoico  (ácido  palmítico),  y  se   debido  a  su  uso  principal
encontró  en  una  cantidad  globalmente  baja  (5,1%). . como  planta  ornamental.
La  capacidad  de  los  extractos  de  C.  pannosus  para  inhibir  enzimas  
La  fibra  bruta,  un  componente  importante  con  efectos  beneficiosos  para   fisiológicas  se  ha  estudiado  utilizando  enzimas  clave  del  metabolismo  de  
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los  organismos,  fue  bastante  alta  (4,6%)  en  las  pepitas  rojas  de  C.  pannosus.   los  neurotransmisores  (MAO­A,  AChE  y  TYR)  y  la  regulación  de  la  glucemia  
El  porcentaje  de  ceniza  fue  del  1,4%.  Este  valor,  que  significa  la  parte   (α­glucosidasa).
inorgánica  del  fruto,  es  elocuente  del  alto  contenido  mineral.  Con  base  en   Los  resultados  para  las  enzimas  del  sistema  nervioso  central  fueron  
el  análisis  proximal,  se  calculó  que  cien  g  de  frutos  de  C.  pannosus   positivos  excepto  para  el  ensayo  de  AChE,  donde  los  extractos  no  mostraron  
aportaban  75  kcal.  El  contenido  de  minerales,  expresado  en  mg  kg−1  fw,  se   actividad  (datos  no  mostrados).  Sin  embargo,  ambos  extractos  mostraron  
da  en  la  Tabla  3.  Los  minerales  desempeñan  funciones  esenciales  como  la   una  clara  actividad  inhibidora  dependiente  de  la  dosis  sobre  las  enzimas  
estructura  esquelética,  el  mantenimiento  del  sistema  coloidal  y  la  regulación   MAO­A  y  TYR  (Fig.  4B  y  C),  con  valores  de  IC50  calculados  mediante  
del  equilibrio  ácido­base;  también  son  los  componentes  de  hormonas,   regresión  no  lineal.  En  ambas  enzimas,  la  inhibición  fue  superior  al  50%  a  
enzimas  y  activadores  de  enzimas.  Los  frutos  frescos  de  C.  pannosus   dosis  más  altas  de  extractos  de  C.  pannosus.  En  el  ensayo  MAO­A,  los  
resultaron  ser  ricos  en  macroelementos  como  Ca  (2950,9  mg  kg−1 )  y  K   valores  de  IC50  fueron  148,64  y  291,61  µg  mL−1  para  las  fracciones  polar  
(2607,9  mg  kg−1 ),  seguidos  de  cantidades  menores  de  Mg  (277  mg  kg−1 )   y  apolar  de  C.  pannosus,  respectivamente,  y  0,15  µg  mL−1  para  la  clorgilina.  
y  Na  (49,3  mg  kg­1 ).  Entre  los  microelementos  encontramos  niveles   En  el  ensayo  TYR,  los  valores  de  IC50  fueron  2240,56  y  1270,37  µg  mL−1  
destacables  de  Fe  (13,0  mg  kg−1 ),  Cu  (1,5  mg  kg−1 )  y  Zn  (7,4  mg  kg−1 ). para  las  fracciones  polar  y  apolar,  respectivamente,  y  3,52  µg  mL−1  para  
el  ácido  kójico.  En  estos  dos  ensayos,  los  valores  de  IC50  fueron  muy  
similares  para  ambos  extractos,  sin  diferencias  significativas  y  lejos  de  los  
Se  sabe  que  la  suplementación  con  calcio  puede  jugar  un  papel   inhibidores  enzimáticos  de  referencia.  MAO­A  participa  en  la  desaminación  
fundamental  en  la  prevención  de  la  aparición  de  osteoporosis  en  personas   de  catecolaminas  y  serotonina  generando  peróxido  de  hidrógeno;  Ciertos  
mayores28.  Así,  los  altos  niveles  de  este  elemento  que  se  encuentran  en   compuestos  que  participan  en  esta  inhibición  pueden  conducir  a  efectos  
C.  pannosus  lo  convierten  en  un  potencial  complemento  alimenticio  en   neuroprotectores.35  La  tirosinasa  es  una  enzima  que  contiene  cobre  que  
casos  de  ingesta  inadecuada  de  calcio.  También  vale  la  pena  señalar  que   es  esencial  para  la  pigmentación  de  la  tirosina­melanina,  y  también  en  el  
una  ingesta  elevada  de  potasio  en  la  dieta  puede  proteger  a  las  personas   daño  neuronal  inducido  por  la  dopamina.36  La  inhibición  de  TYR  puede  
del  riesgo  de  enfermedades  cardiovasculares.29  Sobre  esta  base,  el   representar  un  estrategia  neuroprotectora  potencial,  aunque  los  inhibidores  
consumo  de  frutos  de  C.  pannosus  puede  proteger  a  los  pacientes  que   de  TYR  son  ampliamente  utilizados  en  cosmetología  para  prevenir  la  
padecen  problemas  cardíacos.  Además,  los  altos  niveles  de  potasio   pigmentación  de  la  piel.37  La  actividad  inhibidora  de  enzimas  relacionadas  
detectados  en  estas  frutas  pueden  corroborar  el  uso  tradicional  informado   con  el  sistema  nervioso  ha  sido  reportada  en  otras  plantas  de  la  familia  
como  cardiotónico.9 Rosaceae  o  en  plantas  productoras  de  frutos  rojos.19  ,38,39  Sin  embargo,  
Nuestro  método  previamente  desarrollado  y  validado  se  aplicó  para   no  existe  evidencia  científica  de  estas  propiedades  para  C.  pannosus,  ya  
determinar  la  cantidad  de  ácido  ascórbico  en  frutos  de  C.  pannosus,  y  el   que  se  ha  utilizado  principalmente  como  arbusto  ornamental  sin  bioactivos  
nivel  encontrado  fue  de  29.53  mg  100  g−1  fw  (Tabla  3).15  La  extracción  se   ni  nutrientes  conocidos.
realizó  por  cuadriplicado  con  RSD%  menor  que  3,75%.  Este  valor  es  menor  
con  respecto  a  lo  reportado  en  la  literatura  para  otros  frutos  como  los  de   aplicaciones  Un  aporte  importante  en  la  inhibición  de  MAO­A  y  TYR  que  
Hypericum  androsaemum  (135  mg  100  g−1 ),  escaramujo  (417  mg presenta  el  extracto  polar  puede  estar  dado  por  el  alto  nivel  de  ácidos  
clorogénicos.39

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Fig.  4  (A)  Actividad  antioxidante  de  extractos  de  C.  pannosus  y  ácido  ascórbico  frente  a  radicales  DPPH.  (B)  Inhibición  de  MAO­A  realizada  por  extractos  de  C.  pannosus  y  clorgilina.  (C)  
Inhibición  de  tirosinasa  (Tyr)  realizada  por  extractos  de  C.  pannosus  y  ácido  kójico.  (D)  Inhibición  de  α­glucosidasa  realizada  por  extractos  de  C.  pannosus  y  acarbosa.  Los  valores  de  
IC50  se  calcularon  mediante  regresión  no  lineal.

Además,  los  extractos  de  C.  pannosus  pudieron  inhibir  la  α­ La  capacidad  inhibidora  de  la  α­glucosidasa  se  ha  demostrado  en  
glucosidasa,  que  es  una  enzima  involucrada  en  el  metabolismo  de   otras  especies  de  Cotoneaster34 .  Por  estos  motivos,  C.  pannosus  
la  glucosa.  La  Fig.  4D  muestra  la  inhibición  dependiente  de  la  dosis   podría  ser  una  fuente  interesante  de  antioxidantes  y  moléculas  
de  esta  enzima.  Los  valores  de  IC50  se  calcularon  mediante   bioactivas  para  prevenir  trastornos  metabólicos  como  la  hiperglucemia  
regresión  no  lineal,  siendo  27,82  y  12,74  µg  mL−1  para  extractos   o  enfermedades  neurodegenerativas.
polares  y  apolares  de  C.  pannosus,  respectivamente,  y  381,08  µg  
mL−1  para  acarbosa,  un  inhibidor  de  referencia  para  tratar  y  prevenir  
la  diabetes  tipo  2.  Ambos  extractos  presentaron  un  IC50  similar  y  los  
mejores  valores  de  inhibición  (Cuadro  5),  incluso  mejor  que  el  del  
4.  Conclusión
compuesto  de  referencia.  En  este  caso,  debe  excluirse  el  papel   C.  pannosus  se  ha  utilizado  tradicional  y  exclusivamente  con  fines  
principal  de  los  ácidos  clorogénicos,  y  otros  componentes  del  
ornamentales.  Esta  investigación  mostró  por  primera  vez  que  sus  
extracto,  como  los  flavonoides,  pueden  dar  una  contribución  importante.40   Esto rojas  son  una  fuente  prometedora  de  nutracéuticos  dotados  
pepitas  
in  vitro  de  propiedades  antioxidantes,  antidiabéticas  y  
neuroprotectoras.  Curiosamente,  tanto  las  fracciones  polares  como  
las  apolares,  que  representan  el  fitocomplejo  de  la  fruta  entera,  
Tabla  5  Valores  de  IC50  para  extractos  de  Cotoneaster  pannosus  y  los  inhibidores  de  
referencia mostraron  una  actividad  importante.  Estos  hallazgos  brindan  nuevos  
conocimientos  sobre  una  posible  aplicación  de  C.  pannosus  en  las  
industrias  farmacéutica  y  alimentaria.
Valores  IC50  (μg  mL−1 )

Ensayos Extracto  polar  Extracto  apolar  Inhibidor  de  referencia

Eliminación  de  DPPH  47,33  Inhibición   54,89   Ácido  ascórbico:  2,74  

de  MAO­A  148,64  Inhibición  de  TYR   291,61   Clorgilina:  0,15  
Conflicto  de  intereses
2240,56  Inhibición  de  α­GLU  27,82 1270,37   Ácido  kójico:  3,52  
12,74 Acarbosa:  381,08 Los  autores  declaran  que  no  existe  conflicto  de  intereses.

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Alimentos  y  Función Papel

actividad  biológica  in  vitro  de  tres  especies  de  Hypericum  de  
Agradecimientos Canarias  (Hypericum  reflexum,  Hypericum  canariense  y  Hypericum  
Los  autores  agradecen  a  la  Universidad  de  Camerino  (FAR  2014­2015,   grandifolium),  Fitoterapia,  2015,  100,  95–109.
Fondo  di  Ateneo  per  la  Ricerca,  beca  no.  FPI000044)  y  la  Universidad  
San  Jorge  por  el  apoyo  financiero. 14  G.  Caprioli,  A.  Alunno,  D.  Beghelli,  A.  Bianco,  M.  Bramucci,  C.  
Frezza,  et  al.,  Polar  Constituyentes  and  Biological  Activity  of  the  
Berry­Like  Fruits  from  Hypericum  androsaemum  L,  Front.  PlantSci.,  

Referencias 2016,  7,  232.
15  G.  Caprioli,  R.  Iannarelli,  K.  Cianfaglione,  D.  Fiorini,  C.  Giuliani,  D.  
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C.  gracilis  Rehder  y  EH  Wilson  var  difficilis  LT  Lu,  New  Combinations   18  IK  Rhee,  M.  van  de  Meent,  K.  Ingkaninan  y  R.  Verpoorte,  Detección  
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cromatografía  en  capa  fina  de  gel  de  sílice  en  combinación  con  
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Papel Alimentos  y  Función

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