Nombre: Angélica María González Albarracín

UNIVERSIDAD POLITÉCNICA ESTATAL DEL CARCHI

FACULTAD DE INDUSTRIAS AGROPECUARIAS Y CIENCIAS AMBIENTALES

PRACTICA DE LABORATORIO No. 2

TEMA: ESPECTROMETRÍA

Nombre: Angélica María González Albarracín

Materia: Análisis Instrumental I

Docente: Msc. Ing. Shirley Chang

Semestre: Cuarto Paralelo: B

Carrera: Ingeniería de Alimentos

Ciclo: Abril- Agosto 2018

Calificación ______
Nombre: Angélica María González Albarracín

INFORME DE LABORATORIO

Fecha: 31 de mayo de 2018 Practica No. 2

INTEGRANTES DEL GRUPO: Angélica González Albarracín.

Curso: Cuarto B

TEMA: ESPECTROMETRÍA

OBJETIVO GENERAL

Comprender y analizar los fundamentos básicos de la espectrometría y las características

analíticas de la técnica.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Reconocer el adecuado funcionamiento del espectrofotómetro

Determinar experimentalmente la longitud de onda de la glucosa por medio de la

realización de una curva.

Analizar los datos obtenidos en las pruebas de precisión y exactitud.

Comprender el funcionamiento del espectrofotómetro en calidad del tiempo.

RESUMEN

El objetivo del experimento realizado consistió en poner en práctica el conocimiento

teórico con respecto a la espectrofotometría, se determinó el espectro de absorción de una
sustancia y la concentración de esta al igual una vez obtenidos los datos se realizó la curva
de absorbancia con respecto a concentración. Para realizar las disoluciones se utilizaron
como materiales balones aforados de 100ml donde se colocó agua destilada, realizando así
las disoluciones madres donde la principal fue la glucosa, hasta que se llene el balón
aforado, se puso la mitad de soluto que se obtuvo de las muestras y se completó el balón
Nombre: Angélica María González Albarracín

aforado con agua hasta llegar a 100ml el mismo procedimiento se llevó a cabo con todas las
muestras.

Una vez realizada todas las muestras se analizaron con el espectrofotómetro para medir la
absorbancia concentración y transmitancia, para ello se colocó en cada una de las celdas
pequeñas una muestra de cada disolución, teniendo cuidado al colocar y manipular el
espectrofotómetro para que no se tengan resultados erróneos. Registrando cada uno de los
datos se logró graficar la curva de absorbancia con respecto a concentración para la
longitud de onda máxima.

PROCEDIMIENTO

ESPECTROFOTOMETRÍA

Se realizó una disolución teniendo como solución la glucosa para

poder utilizar el espectrofotómetro

Se utilizó 50 ml de agua destilada en cada uno del matraz aforado.

Para realizar cada una de las disoluciones se usaron balones

aforados de 100ml

En los balones aforados se colocó 50 ml de agua para obtener la

disolución madre que fueron 50ml de glucosa.

Se colocó la mitad de la cantidad del soluto que se obtuvo en la

muestra principal y se procedió a completar el balón con agua
destilada hasta llegar a 100ml

Una vez realizadas todas las muestras, se llevaron al

espectrofotómetro para medir la absorbancia transmitancia y
concentración de cada uno de los balones aforados
Nombre: Angélica María González Albarracín

Se apuntan cada uno de los datos obtenidos para realizar los

cálculos y poder obtener una buena gráfica.

RESULTADOS

Tabla 1. Datos obtenidos de absorbancia y transmitancia en la disolución de la glucosa.

Absorbancia Transmitancia
0,000625 0,052
0,00125 0,6
0,0025 0,64
0,005 0,94
 GRAFICO

Figura 1: Curva obtenida según los resultados

DISCUSIÓN

En los anteriores resultados se puede analizar que la gráfica obtenida no es lineal, pero si
tiene una pendiente que es 0,7435, se puede observar que la muestra tiene una mayor
absorbancia cuando hay mayor concentración de glucosa.
Nombre: Angélica María González Albarracín

CONCLUSIONES

Se comprendió de mejor manera los conocimientos aprendidos en clase sobre el

funcionamiento y características del espectrofotómetro .

Las medidas de absorción y concentración dependen de la longitud de onda con la que se

está trabajando

Los resultados que se obtienen se en prácticas de espectrofotometría se deben analizar

mediante graficas

Las curvas de calibración que se obtienen son de gran utilidad para la Identificación de
sustancias a partir de la absorción.

RECOMENDACIONES

Se recomienda calibrar adecuadamente el espectrofotómetro y esperar el tiempo necesario

(15 minutos) después de encenderlo, para que los circuitos alcancen temperatura.

Ingresar a laboratorio con los implementos necesarios para buena realización de la practica

REFERENCIAS

Brunatti. C & Martín. A. (2011). Introducción a la Espectroscopia de Absorción Molecular

Ultravioleta, Visible e Infrarrojo Cercano. Recuperado de
http://materias.fi.uba.ar/6305/download/Espectrofotometria.pdf

Arias. J (2010). Usos del Espectrofotómetro. Recuperado de

https://elespectrofotometro.com/usos/

Fernández, G. (2015). Espectrofotómetro. Recuperado de:

http://www.quimicaorganica.net/esquema-espectrofot%C3%B3metro.html

ANEXOS
 Nombre: Angélica María González Albarracín

FIGURA 1. Diluciones de la Glucosa para llevar

al espectrofotómetro. FIGURA 2, Uso de la gramera

CUESTIONARIO

1. Describa la función de cada parte del espectrofotómetro

Monocromador

Aísla las radiaciones de longitud de onda deseada, logrando obtener luz monocromática. Un
monocromador está constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el
elemento de dispersión.

Colimador

Es un lente que lleva el haz de luz entrante con una determinada longitud de onda hacia un
prisma, el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz logrando que se redirección
hacia la rendija de salida

Compartimiento de muestra

Se lleva a cabo la interacción R.E.M. con la materia.

Detector

Se encarga de evidenciar una radiación para que posteriormente sea estudiada y saber a qué
tipo de respuesta se enfrentarán (fotones o calor).

Registrador
Nombre: Angélica María González Albarracín

Convierte el fenómeno físico en números proporcionales al analito en cuestión.

Fotodetectores

Perciben la señal en forma simultánea en 16 longitudes de onda y cubren al espectro

visible, de esta manera se reduce el tiempo de medida y minimiza las partes móviles del
equipo.

Fuente de luz

Ilumina la muestra. Debe cumplir con las condiciones de estabilidad, direccionalidad,

distribución de energía espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son lámpara
de tungsteno y lámpara de arco de xenón.

2. Función del espectrofotómetro

Tiene dos funciones fundamentales :

 Ofrece información de una muestra sobre la naturaleza de la sustancia que contiene.

 Señala indirectamente la cantidad de la sustancia a investigar que se encuentra
presente en la muestra.
3. Dibuje un esquema del funcionamiento del espectrofotómetro y explíquelo de
manera sencilla.
Nombre: Angélica María González Albarracín

El espectrofotómetro se encuentra compuesta de una fuente de luz que produce luz blanca.
La primera rendija selecciona un rayo que contiene todas las frecuencias emitidas.  Este
rayo pasa a través de un prisma de vidrio que descompone la luz blanca en sus diferentes
frecuencias . Una segunda rendija selecciona una de las frecuencias que incidirá sobre la
cubeta que contiene la muestra.  Al conjunto del prisma y segunda rendija se la denomina
monocromador. Luego el rayo monocromático que atraviesa la muestra incide sobre el
detector, que transfiere los datos a un sistema informático donde se genera el espectro. Si la
frecuencia seleccionada en la segunda rendija no es absorbida por la muestra se produce un
punto de la línea base del espectro.

4. Tipos de espectrofotómetros

ESPECTROFOTOMETRO DE ABSORCIÓN ATÓMICA

Rango de longitud de onda: 190 a 860 nm - Paso de banda espectral: 0,2 n a 200 nm -
Dispersión lineal recíproca: . a 200 nm - 0,1 nm/mm . a 800 nm - 0,4 nm/mm - Efecto
Zeeman, longitudinal inverso - Atomización: calentamiento transversal del horno de
grafito, calentamiento eléctrico - Rango de medidas de: . Absorbancia -0,5 a 2000 .
Concentración 0,0001 a 9999 unidades de concentración . Factor de expansión 0,01 a 100 .
Tiempo de lectura 1 a 60 segundos . Tiempo de demora 0 a 60 segundos.

ESPECTROFOTÓMETRO UV-VISIBLE UVMINI-1240

•Modo fotométrico para longitud de onda fija

Con el modo fotométrico, se puede medir la absorbancia o la transmitancia en la longitud

de onda fija. Análisis cuantitativo fijo usando el método Factor-K puede también ser usado.
Resultados son automáticamente impresos o son mandados a la puerta RS-232C. Con
varios posicionadores de celda

opcionales o con configuración sipper/auto-muestra, medidas continuas de muestras

también es posible.

• Modo espectro para barrido de longitud de onda

Nombre: Angélica María González Albarracín

Con ese modo estándar, Ud. puede lograr espectro UV-Visible completo de muestras de
190nm a 1100nm. Barrido repetido le permite a Ud. medir automáticamente cualquier
cambio espectral en todo el rango. También disponible en la configuración estándar, la
función de procesamiento de datos espectral como plotar gráfico y detección de picos /
valles.

• Modo cuantificación para análisis de longitud simple

Este modo le permite a Ud. preparar curva de calibración para determinaciones fáciles de
concentraciones de muestras desconocidas. Están disponibles modos de uno, dos o tres
longitudes de onda. Métodos cuantitativos posibles de seleccionar incluyendo factor-K,
curva de calibración de un punto o multi-puntos . Ajuste de primero, segundo o tercero
orden también son posibles de seleccionar.

ESPECTROFOTOMETRIA UV-VIS TU 1800

El TU1800/1800S es el más popular espectofotómetro de P-General. Su óptica adopta el

sistema de medición SPLIT-BEAN con un detector formado por dos fotodiodos de estado
sólido de alta sensibilidad. Las operaciones del instrumento estan controladas a través de un
microchip interno en conjunto con una pantalla de cristal líquido (LCD) y un teclado Soft-
Touch con salida para impresora. Su compartimiento es para 8 celdas y además posee una
fuente de luz accesible

ESPECTROFOTOMETRO INFRAROJO

Equipo que permite la identificación de grupos funcionales de materiales orgánicos,

pinturas y determinadas estructuras de muestras sólidas y líquidas por transmisión
espectroscópica de infrarrojo por transformada de Fourier (FTIR), en el rango espectral
comprendido entre 400 y 4 000 . Dispone de un accesorio para trabajar en reflectancia total
atenuada (ATR)

5. Cómo se calibra un espectrofotómetro?

Se calibra de la siguiente manera. Primero se oprime la tecla MODE, hasta que la luz roja
se encuentre en A (absorbancia). Luego se selecciona la longitud de onda girando la perilla,
Nombre: Angélica María González Albarracín

introducir la celda con el blanco (con un volumen por arriba de la mitad; nunca llena) en la
porta-celda, oprime la tecla Λ (0A/100%T) y esperar a que se ponga en ceros la
absorbancia, después tomar la lectura de absorbancia de la solución propuesta a una
longitud de onda baja (λ nm). utilizar como blanco agua destilada

6. Que es un espectrofotómetro ?

El espectrofotómetro es un instrumento usado en la física óptica que sirve para medir, en

función de la longitud de onda, la relación entre valores de una misma magnitud
fotométrica relativos a dos haces de radiaciones. También es utilizado en los laboratorios de
química para la cuantificación de sustancias y microorganismos.

7. ¿Por qué es importante introducir el prisma o celda totalmente seco y limpio?

Es importante introducir el prisma o celda totalmente seco y limpio porque de esta manera
los resultados no se alterarán.