Universidad Autónoma de San Luis Potosí

Laboratorio de Análisis Instrumental

Sandoval Chávez Bárbara Valentina

6 de octubre de 2021, miércoles 12:00 pm – 14:00 pm

Tema: LEY DE BEER

Práctica 4: Espectrofotometría visible

OBJETIVOS

• Aplica las leyes de absorción de radiación luminosa e integra los elementos estructurales
de un espectrofotómetro.
• Demuestra la ley General de absorción luminosa y su desviación.
• Aplica el método de adición de estándar para el análisis cuantitativo.
• Interpreta el resultado con base a normas oficiales mexicanas.

Introducción

La parte de una molécula responsable de la absorción de la luz se llama cromóforo. Toda sustancia
que absorbe luz visible aparece coloreada cuando transmite o refleja la luz. La luz blanca contiene
todos los colores del espectro visible, la sustancia absorbe ciertas longitudes de onda de la luz
blanca, y nuestros ojos perciben las longitudes de onda que no se absorben. El color de una
disolución es el complementario del color de la luz que absorbe, es decir la radiación visible hace
que los electrones pasen a orbitales de mayor energía.

Cuando la radiación pasa a través de una solución, ciertas frecuencias pueden eliminarse por
absorción, un proceso en el que la energía se transfiere a las moléculas constitutivas de la
muestra. La absorción promueve a estas partículas desde su estado fundamental a uno o varios
estados de excitación de energía más elevada. La energía del fotón excitante debe coincidir con la
diferencia de energía de las especies absorbentes la cual nos proporciona información cualitativa,
y la intensidad de esa absorción nos proporciona información cuantitativa.

Los instrumentos que se utilizan para medir la absorción de la radiación son los fotómetros y los
espectrofotómetros.

Resumen de la investigación teórica:

1.a) Da el enunciado y la ecuación de la Ley General de Absorción de Radiación Electromagnética

(Ley de Beer).

✓ En el caso de la radiación monocromática, la absorbancia (A) es directamente proporcional

a:
o La trayectoria b que recorre el haz en el medio.
o La concentración c de la especie absorbente.
 a = absortividad, contante de la Ley de Beer, es característica para cada sustancia. Depende del
pH, temperatura y disolvente.
𝑢𝐴𝑏𝑠∗𝐿 𝑔
𝐴 = 𝑎𝑏𝑐 ; 𝐴 = ( 𝑔∗𝑐𝑚
) (𝑐𝑚) ( 𝐿 )

b) ¿Qué es luz analítica en los sistemas de absorción de radiación electromagnética? Y explica

cómo interacciona con la materia la radiación espectral de la región visible.

✓ La luz analítica es la potencia incidente. La forma más común de trabajar con la radiación
espectral de luz visible es con la fuente de tungsteno, los electrones son obligados a
circular por el filamento de tungsteno, como este filamento es muy delgado, ocasiona la
fricción entre los electrones y se desprende calor el cual absorben los electrones de los
átomos de tungsteno para brincar a estados energéticos superiores y al regresar a su
estado basal, emiten luz.

2. Integra por módulos un espectrofotómetro de un haz y de doble haz.

Espectrofotómetro de un haz. Espectrofotómetro de doble haz.

Espectrofotómetro de un haz Espectrofotómetro de doble haz

r Menor Más cercano a 1
Coeficiente de Mayor Menor, es más preciso
variación
Error por *preparación de soluciones estándar. No presenta error por fluctuación de corriente debido a
*fluctuaciones de corriente eléctrica. que la diferencia de intensidad del haz es la misma en
ambos detectores, solo puede presentarse el error por
preparación de soluciones estándar.
3. a) Haz un esquema de un monocromador e indica la función de cada uno de los elementos que
lo constituyen.

✓ Ranura de entrada o rendija de salida: abertura rectangular angosta por la que entra la
radiación.
✓ Lente colimador o lente condensadora: alinea el haz.
✓ Elemento dispersor (prisma): dispersa la radiación gracias al fenómeno de refracción.
✓ Lente de enfoque o lente focalizadora: enfoca la radiación dispersada en una superficie
plana denominada “plano focal”.
✓ Ranura de salida o rendija de salida: aísla la banda espectral deseada.

b) El prisma y la rendija son dos tipos fundamentales de dispersores de radiación lumínica; ¿Cómo
dispersa la luz cada uno de ellos?

✓ Prisma: fenómeno de dispersión, separación de la

luz en las longitudes de onda que la componen. Se
origina debido a que, cuando la luz “blanca”
atraviesa un prisma, las distintas radiaciones
monocromáticas son más desviadas por la
refracción entre menor es su longitud de onda.
 ✓ Rendija: fenómeno de difracción, capacidad de la
radiación electromagnética para deflectarse
alrededor de los obstáculos que se encuentran en
su trayectoria.

4. Discute las desviaciones de la Ley de Beer instrumentales, reales y químicas.

✓ Desviaciones instrumentales: por lo general, la radicación que emerge del monocromador

está contaminada con pequeñas cantidades de radiación dispersa llamada luz parasita, y
se define como la que proviene de un instrumento y que está fuera de la banda de
longitud de onda seleccionada para la determinación. Esta radiación parasita es resultado
de la dispersión y reflexión desde superficies de redes, lentes, espejos, filtros o ventanas.
✓ Desviaciones reales: a concentraciones altas, el grado de las interacciones soluto-
solvente, soluto-soluto o los puentes de hidrógeno pueden afectar al ambiente del analito
y su capacidad de absorción. Por ejemplo, a concentraciones altas, la distancia promedio
de moléculas y iones responsables de la absorción disminuye hasta el punto en que cada
partícula altera la distribución de carga de las moléculas vecinas. Estas interacciones
soluto-soluto modifican la capacidad de las especies del analito para absorber la radiación
de una determinada longitud de onda. Como la magnitud de la interacción depende de la
concentración, surgen desviaciones respecto a la relación lineal entre la absorbancia y la
concentración.
✓ Desviaciones químicas: se producen cuando un analito se disocia, se asocia o reacciona
con un solvente para originar un producto con un espectro de absorción diferente al del
analito. Las soluciones acuosas de los indicadores ácido/base son un ejemplo
característico de este comportamiento.

5. Describe el fundamento analítico del método de adición de estándar para curva de calibración y
del método de dilución.

✓ Adición de estándar (o patrón): Consiste en añadir diversas cantidades conocidas de

solución patrón a alícuotas conocidas de la muestra problema. A partir del aumento de
señal se deduce cuanto analito había en la muestra problema. El método de adición
estándar es especialmente apropiado cuando la composición de la muestra es
desconocida o tiene muchas impurezas, es decir, cuando es imposible suprimir
interferencias físicas o químicas presentes en la matriz de la muestra. La matriz es todo lo
que hay en el problema, que no sea el analito. El efecto de la matriz es el cambio que
experimenta una señal analítica por todo lo que hay en la muestra excepto el analito.
 ✓ El análisis de dilución: es un método para determinar la cantidad de sustancias químicas.
En su concepción mas simple, comprende la adición de cantidades conocidas de sustancias
isotópicamente enriquecidas a la muestra analizada. La mezcla del estándar isotópico con
la muestra efectivamente diluye el enriquecimiento isotópico del estándar y esto es la
base del método de dilución isotópica. Es clasificada como un método de estandarización
interna, porque el estándar es añadido directamente a la muestra.

Bibliografía
Harris. D.C., Análisis Químico Cuantitativo, Ed. Reverté, 3° ed., España, 2007, p. 88-90

g) Para la determinación espectrofotométrica de una solución de hierro con una solución de 1, 10,
fenantrolina, describe:

1. El fundamento de la determinación.

✓ La determinación de hierro mediante espectrofotometría se puede llevar a cabo si éste se

compleja con 1, 10 fenantrolina, pues el producto de la reacción es un complejo color
naranja, cuyo color es proporcional a la concentración de Fe2+. Este complejo absorbe a
515 nm. La intensidad del color es independiente de la acidez a pH entre 2 y 9, y el
complejo es estable por varios días. El clorhidrato de hidroxilamina es usado como agente
reductor para reducir el Fe3+ a Fe2+ y mantenerlo en ese estado.

2. La reacción estequiométrica.

Relación 1:3

3. Algunos factores de influencia en esta reacción.

El cobre, níquel y cobalto interfieren seriamente; otros iones interfieren en menor grado, aunque
se puede alterar el pH o usar agentes complejantes para evitarlo. Antes de efectuar mediciones de
absorbancia, deben transcurrir por lo menos 15 minutos después de haber añadido los reactivos,
para que el color del complejo se desarrolle en su totalidad.
h) 1. Menciona los principales materiales que se utilizan en la elaboración de cubetas o celdas
portamuestras para usos en absorción de radiación visible y ultravioleta.

✓ Debe ser transparente a la región del espectro en la que se está trabajando:

o El cuarzo es transparente tanto a la región UV-Visible.
o El vidrio corex, vidrio de silicato o el de plástico es transparente para la región Visible.

Bibliografía

✓ Skoog, D. A., West, D. M., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2015). Fundamentos de química
analítica (9a. ed. --.). México D.F.: Cengage Learning.
✓ Harris. D.C., Análisis Químico Cuantitativo, Ed. Reverté, 3° ed., España, 2007.
✓ Apuntes de la clase teórica de Fundamentos de Análisis Instrumental impartida por la
maestra Hernández Alvarado Laura Angélica.