ESPECTROFOTOMETRIA

OBJETIVOS El objetivo de esta prctica es calcular el factor de calibracin (Fc) de las soluciones estndar. MARCO TEORICO La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y bioqumicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Principios de la espectrofotometra
Todas las sustancias pueden absorber energa radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe radiacin de longitudes de ondas que no pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del infrarrojo. La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energa es absorbida; la energa radiante no puede producir ningn efecto sin ser absorbida. El color de las sustancias se debe a que stas absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y solo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbidas. La espectrofotometra ultravioleta-visible utiliza haces de radiacin del espectro electromagntico, en el rango UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm y en el de la luz visible de 400 a 700 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar los materiales en la regin ultravioleta y visible del espectro. Al campo de luz uv de 200 a 400 nm se le conoce tambin como rango de uv cercano, la espectrofotometra visible solamente usa el rango del campo electromagntico de la luz visible, de 400 a 700 nm. Adems, no est de ms mencionar el hecho de que la absorcin y trasmitancia de luz depende tanto de la cantidad de la concentracin como de la distancia recorrida.

Componentes de un espectrofotmetro Fuente de luz La fuente de luz que ilumina la muestra debe cumplir con las siguientes condiciones: estabilidad, direccionabilidad, distribucin de energa espectral continua y larga vida. Las fuentes empleadas son: lmpara de wolframio (tambin llamado tungsteno), acorde xenn y lmpara de deuterio que es utilizada en los laboratorios atmicos. Monocromador El monocromador asla las radiaciones de longitud de onda deseada que inciden o se reflejan desde el conjunto, se usa para obtener luz monocromtica. Est constituido por las rendijas de entrada y salida, colimadores y el elemento de dispersin. El colimador se ubica entre la rendija de entrada y salida. Es un lente que lleva el haz de luz que entra con una determinada longitud de onda hacia un prisma el cual separa todas las longitudes de onda de ese haz y la longitud deseada se dirige hacia otra lente que direcciona ese haz hacia la rendija de salida. Compartimiento de Muestra Es donde tiene lugar la interaccin, R.E.M con la materia (debe producirse donde no haya absorcin ni dispersin de las longitudes de onda). Es importante destacar, que durante este proceso, se aplica la ley de Lambert-Beer en su mxima expresin, con base en sus leyes de absorcin, en lo que concierne al paso de la molcula de fundamental-excitado. Detector El detector, es quien detecta una radiacin y a su vez lo deja en evidencia, para posterior estudio. Hay de dos tipos: a) los que responden a fotones; b) los que responden al calor. Foto detectores En los instrumentos modernos se encuentra una serie de 16 fotos detectores para percibir la seal en forma simultnea en 16 longitudes de onda, cubriendo el espectro visible. Esto reduce el tiempo de medida, y minimiza las partes mviles del equipo.

 DESARROLLO EXPERIMENTAL 1. Preparar la siguiente batera de tubos. TUBO I 1 ml 9 ml 8 mg % TUBO II 2 ml 8 ml 16 mg % TUBO III 3 ml 7 ml 24 mg % TUBO IV 4 ml 6 ml 32 mg %

BICROMATO DE POTASIO AGUA DESTILADA CONCENTRACION (mg %)

Solucin: Bicromato de potasio 80 mg % Calcular la concentracin en mg % de bicromato de K en cada uno de los tubos. 2. Con los datos obtenidos construir en un papel milimetrado la grafica de absorbancia vs concentracin de bicromato de potasio. 3. Una vez obtenida la curva de calibracin, medir la absorbancia de la muestra problema que el profesor le har entrega. 4. Obtener el factor de calibracin (Fc) promedio con las soluciones standard utilizadas para construir las curvas de calibracin ajustadas. 5. Calcular la concentracin de la muestra problema. DISCUSIN DE LOS RESULTADOS Al colocar la solucin en el espectrofotmetro tuvimos problemas ya que no arrojaba un resultado correcto, por lo que se tuvo que repetir el procedimiento hasta lograrlo. CONCLUSIONES La experimentacin tiene como fin obtener la concentracin de bicromato de potasio. CUESTIONARIO 1. Explique el mecanismo de funcionamiento de un espectrofotmetro Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromtica a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al operador realizar dos funciones: Dar informacin sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra Indicar indirectamente qu cantidad de la sustancia que nos interesa est presente en la muestra

2. Qu diferencias existen entre fotocolormetro y un espectrofotmetro?

El fotocolormetro mide la intensidad de a luz absorbida por una solucin y el espectrofotmetro relaciona la capacidad de absorcin de la radiacin ultravioleta y visible con la concentracin de una sustancia. 3. Grafique el espectro de luz, tanto en el rango visible como no visible con sus respectivas longitudes de ondas.

4. Qu relacin matemtica existe entre absorbancia y tramitancia.

El logaritmo: Abs = -log T = -log (It/Io) Donde Abs es absorbancia, T es tramitancia, I es intensidad transmitida (la intensidad de la luz luego de atravesar la muestra) y Io es intensidad incidente (la intensidad de luz antes de atravesar la muestra).

5. Construya una curva de calibracin con los siguientes valores. STANDARD I 5 ml/dl 0.025 STANDARD II 10 ml/dl 0.050 STANDARD III 20 ml/dl 0.100 STANDARD IV 30 ml/dl 0.150 STANDARD V 40 ml/dl 0.200

CONCENTRACION ABSORBANCIA

Con la curva hallar la concentracin de las siguientes muestras, sabiendo que sus absorbancias fueron:

Muestra A Muestra B Muestra C

-> -> ->

0.015 0.125 0.350

BIBLIOGRAFIA http://es.wikipedia.org/wiki/Espectrofotometr%C3%ADa http://www4.ujaen.es/~pedrajas/Espectrofotometria.html