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El espectro de absorción es la figura que se obtiene al graficar como ordenadas los valores
crecientes de la absorbancia sobre una escala lineal contra valores crecientes de longitud de
onda (en nm). La importancia del espectro de absorción estriba en que mediante la gráfica se
puede seleccionar la longitud de onda óptima en la cual se da el valor de absorbancia máximo.
Una técnica muy útil que permite trabajar en la presencia de una interferencia sin eliminarla y
realizar una determinación exacta de la concentración del analito, es el Método de Adición
Patrón. Se efectúan determinaciones exactas sin eliminar la interferencia preparando una curva
de calibración en la presencia de la interferencia. Se añaden los patrones a porciones de las
muestras con lo cual se permite que alguna interferencia presente en la muestra, afecte
también a las soluciones patrón.
II. OBJETIVOS
La medición de absorbancia de la luz por las moléculas se realiza en unos aparatos llamados
espectrofotómetros. Aunque pueden variar en diseño, en especial con la incorporación de
ordenadores para el análisis de datos, todos los espectrofotómetros constan de:
Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de luz y longitud de
onda a la que se va a realizar la medida. Hay espectrofotómetros de un solo haz (con una sola
celdilla para alojar la cubeta con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas para dos cubetas);
en nuestro caso se trabajará con los de un solo haz. Se mide primero la absorbancia del
disolvente (conocido como blanco) y al que se le asigna el valor de cero mediante el ajuste del
mando, de forma que la intensidad incidente y transmitida sean iguales (Io = It), y por tanto la
absorbancia es cero. A continuación, se pone en la celdilla la cubeta con la muestra y se lee la
absorbancia de ésta.
Obtención de un espectro de absorción
A partir de una solución diluida de un compuesto, cuya absorbancia máxima entra dentro del
rango de medida del espectrofotómetro, se verá el valor de absorbancia a diferentes longitudes de
onda frente a un blanco que contenga el disolvente de la solución de la muestra a caracterizar. A
partir del espectro de absorción se obtendrá el valor de λ al que el compuesto presenta la mayor
absorbancia (λmax). Dicho λ se utilizará a la hora de hacer determinaciones cualitativas y
cuantitativas del compuesto.
Curvas de calibrado
Primeramente se realizaron los cálculos correspondientes para sacar las concentración de cada
sustancia experimentada.
Longitud de Absorbanci
onda a
450 0.025
460 0.031
470 0.037
480 0.041
490 0.043
500 0.048
510 0.051
520 0.047
530 0.041
540 0.033
550 0.024
560 0.016
570 0.011
580 0.008
590 0.007
600 0.005
Siendo 510 la longitud optima, pues es la que mayor elevación tendrá en la gráfica, y por ende, mayor
absorbancia.
Absorbancia
0.45
0.4
0.35
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Y: Absorbancia.
m: pendiente de la recta y es el producto entre la absortividad a de la muestra y el espesor
b de la cubeta.
X: Concentración de la solución.
b: intercepto de la recta
la fórmula para calcular la concentración de la muestra utilizamos la siguiente formula
V 1C 1=V 2C 2
cómo se realizó una dilución conociendo una concentración inicial de 0.01 recalculó las nuevas
concentraciones de las soluciones diluidas dando los siguientes resultados:
solucion V1 muestra V2 sin C sin patron A C muestra
patron
C0 25 50 0.01 0.214 0.005
C1 25 50 0.01 0.047 0.0025
C2 25 50 0.01 0.038 0.00125
C3 25 50 0.01 0.012 0.000625
Para calcular Y’ se utiliza:
V1 V2 sin C sin
solucion A C muestra xy x²
muestra patron patron
C0 25 50 0.01 0.214 0.005 0.00107 0.000025
C1 25 50 0.01 0.047 0.0025 0.0001175 0.00000625
C2 25 50 0.01 0.038 0.00125 0.0000475 1.5625E-06
C3 25 50 0.01 0.012 0.000625 0.0000075 3.9063E-07
Sumatoria total 0.311 0.009375 0.0012425 3.3203E-05
1.12305E-
D
05
45.7321739
M
1
-
a
0.02943478
2. A partir de los gráficos calcule la concentración molar del Nitrato de Cobalto
hexahidratado y la concentración de Cobalto en ppm.
A=ᶓbC
A: Absortividad.
𝜉: Absortividad molar.
b: Longitud de la cubeta.
c: Concentración.
A
C=
ᶓb
Para la solución de nitrato de cobalto hexahidratado (Co(NO3)2*6H2O) con una longitud de la
celda de 1cm.
A
C 1= =1.35095448 M
ᶓb
A
C 2= =0.062248996 M
ᶓb
A
C 3= =1.11768573 M
ᶓb
calculamos la concentración de cobalto en ppm de cada una de las soluciones, utilizamos la
ecuación de la recta de la gráfica de absorbancia vs. Concentración. Y=0.0251x
Para una absorbancia de 0.214
0.214
X= =8.5259 ppm
0.0251
Para una absorbancia de 0.047
0.047
X= =1.87251 ppm
0.0251
Para una absorbancia de 0.038
0.038
X= =1.514 ppm
0.0251
Para una absorbancia de 0.012
0.012
X= =0.4781 ppm
0.0251
3.09761∗1.25
%Co= =0.2 %
250∗7.75