Práctica 3

Determinación de la concentración sérica de proteínas totales y fraccionadas

I. Introducción (colocar 3 referencias con sus respectivas citas)

Las proteínas son moléculas esenciales para el mantenimiento de la vida, como se

indica (González, 2007) son macromoléculas compuestas por cadenas de
aminoácidos, que desempeñan funciones críticas en el cuerpo, tales como el
transporte de oxígeno y nutrientes, la defensa contra infecciones, la regulación del
metabolismo y el mantenimiento de la forma y estructura de las células.

En el contexto de la determinación de la concentración sérica de proteínas totales y

fraccionadas, se realiza una prueba de laboratorio para medir la cantidad de proteínas
en la sangre, así como la cantidad y proporción de sus diferentes fracciones tales
como la albúmina y las globulinas. La albúmina según (Brandan, 2008) es la fracción
proteica más abundante y se produce en el hígado. Tiene una función importante en la
regulación de la presión osmótica y el transporte de moléculas en la sangre. Las
globulinas son un grupo de proteínas que tienen funciones variadas, como la defensa
contra infecciones, la producción de hormonas y la regulación del sistema
inmunológico. En muchas enfermedades (Robles, 2016), los niveles de proteínas
totales y sus fracciones pueden estar alterados, lo que puede ser indicativo de
diferentes trastornos o enfermedades.

En el caso de las proteínas totales y fraccionadas, los valores de referencia varían

dependiendo de la técnica de medición utilizada y el laboratorio donde se realice la
prueba. En general, el rango normal para las proteínas totales en suero es de
aproximadamente 6 a 8.3 g/dL, mientras que el rango normal para la albúmina oscila
entre 3.5 y 5 g/dL y el rango normal para las globulinas varía entre 2.3 y 3.5 g/dL. Es
importante tener en cuenta que los valores de referencia pueden variar según la edad,
sexo y otros factores individuales de cada paciente. Por lo tanto, siempre es necesario
interpretar los resultados en el contexto clínico y consultar a un profesional capacitado
para determinar si los valores de proteínas totales y fraccionadas están dentro de lo
esperado o si es necesario tomar medidas adicionales.

II. Objetivos

● Determinar el nivel de las proteínas plasmáticas totales en el suero sanguíneo.

● Determinar el nivel de albúmina en el suero sanguíneo y de globulinas

● Interpretar los resultados obtenidos de acuerdo con los intervalos de referencia e

indicar posibles condiciones clínicas presente en el paciente.

III. Materiales y métodos

MATERIALES

MATERIALES EN LA MESA DE LOS ESTUDIANTES

• 01 gradilla

• 08 tubos de ensayo 13 x 100mm

• 01 piseta de agua destilada

• 03 pipetas de 5mL

• 03 propipetas

• 01 micropipeta 100-1000 µL y/o de 5-50µL

• puntas descartables respectivas

• cubetas para espectrofotometría

REACTIVOS EN LA MESA DE LOS ESTUDIANTES

• 01 muestra de suero comercial

• 01 estuche comercial para determinar la concentración de proteínas totales y

albúmina

MATERIALES EN LA MESA CENTRAL DEL PROFESOR

• 01 espectrofotómetro

• 01 baño maría 37°C

• 01 vórtex

PROCEDIMIENTOS

Parte experimental

✓ Determinación de proteínas plasmáticas total (Método de Biuret) La determinación de las

proteínas totales se realiza utilizando iones cúpricos que en medio alcalino reacciona con las
proteínas formando compuestos de coordinación de color violeta, cuyo pico de máxima
absorción es de 540 nm y su intensidad es proporcional a la concentración de proteínas.

Preparar los siguientes medios de reacción:

B x St

Suero o plasma (µL) - 20 -

Estándar de proteínas (µL) - - 20

Reactivo EDTA/Cu (mL) 1 1 1

Incubar durante 15 minutos a 37°C y leer en el espectrofotómetro a 540 nm.

VALORES DE REFERENCIA:

6.0 – 8.3 g/dL

✓ Determinación de albúmina

La albúmina reacciona con el bromo cresolftaleina a pH 3.8 formando un compuesto

coloreado que absorbe a 625 nm. Preparar el siguiente sistema:

B x St

Suero o plasma (µL) - 10 -

 Estándar de albúmina (µL) - - 10

Reactivo BCF (mL) 1 1 1

Colocar los tubos en una gradilla a temperatura ambiente durante 10 minutos y leer en el
espectrofotómetro a 625 nm.
VALORES DE REFERENCIA:
3.0 – 5.0 g/dL

IV. Resultados

Fórmula:

Resultado de la albúmina:

[st]= 3.1 g/dL

ABS st= 1.326

ABS mu= 1.291

 Resultados de Globulina:

V. Discusión (1 referencia con su respectiva cita por cada experimento)

1. Experimento 1 - Determinación de proteínas plasmáticas total (Método de Biuret)

PROTEÍNAS:

[st] = 3.1 g/dL

ABS st = 1,713

ABS mu= 1,867

DIAGNÓSTICO: El paciente sufre un caso de hiperprotinemia.

2. Experimento 2 - Determinación de albúmina

ALBÚMINA:

[st] = 3,378 g/dL

ABS st = 3,380

DIAGNÓSTICO: El paciente sufre un caso de hipoalbuminemia.

 3. Experimento 3 - determinación de la globulina

GLOBULINA :

[st] = 13,43 g/dL

ABS st = 3,80

ABS mu= 9.63 g/dL

DIAGNÓSTICO: El paciente sufre un caso de hipoglobulinemia.

VI. Conclusiones

- En conclusión , hicimos uso del método de biuret y usamos el

espectrofotómetro para hallar su concentración de proteínas y luego realizar
las ecuaciones con dichos resultados.
- Al finalizar , logramos utilizar diferentes fórmulas que nos ayudaron a hallar
las proteínas ,albúminas, y globulina . Que por culminar no dieron de resultado
en los niveles de proteína 13,43 g/dL.

VII. Recomendaciones

1. Se sugiere calibrar el espectrofotómetro a una absorbancia igual a cero después de

emplear la prueba en blanco.
2. Determinar bien los resultados del factor de concentración para poder hallar con
eficacia la concentración de la muestra.
3. Saber bien las referencias de proteínas totales y globulinas para poder tener un buen
diagnóstico.

VIII. Referencias bibliográficas

Brandan, N. (2008). Proteínas Plasmáticas. Universidad Nacional del Nordeste.

https://med.unne.edu.ar/sitio/multimedia/imagenes/ckfinder/files/files/Carrera-Medicina/
BIOQUIMICA/proteinas.pdf

González., L. (2007). Las Proteínas en la Nutrición. Revista de salud pública y nutrición, 8(2).

https://respyn.uanl.mx/index.php/respyn
Robles G. Jorge. Nutrición en el paciente críticamente enfermo. Primera Edición. Mc Graw
Hill. Interamericana. México 2016

https://www.medigraphic.com/pdfs/revcubalnut/can-2016/cans161h.pdf