UNIVERSIDAD PRIVADA ANTENOR ORREGO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE ENFERMERÍA

CURSO:
BIOQUIMICA (PRACTICA) NRC 8944

PROFESOR:
Moya Fernández, Walter Santiago.

HORARIO:
VIERNES 4:10PM – 5:55 P

INTEGRANTES:
-Castillo Vásquez, Mara.
-Heras Acuña, Liseth.
-Martínez Cabos, María Belén.

TRUJILLO

2020
 DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES Y ALBUMINA

1. INTRODUCCIÓN:

Las proteínas son un conjunto de compuestos orgánicos macromoleculares, de un peso

molecular elevado, ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para la vida
que están formadas por moléculas llamadas aminoácidos que se unen entre sí por
enlaces peptídicos. La secuencia con la que estos aminoácidos se encadenan y el
número de cadenas de aminoácidos, determinan cuál es la estructura primaria de las
proteínas. Las proteínas son introducidas en el organismo a través de los alimentos,
donde se dividen en aminoácidos para formar posteriormente las nuevas proteínas a
través del proceso conocido como síntesis de proteínas. Las proteínas realizan multitud
de funciones en nuestro organismo para su correcto funcionamiento. Actúan como
elementos estructurales, de transporte y movimiento y aparecen bajo la forma de enzimas,
hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc.

La proteína más abundante en plasma es la albúmina. Una de sus funciones más

importantes es la de permitir el transporte de ácidos grasos, hormonas esteroides,
bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son insolubles en medio acuoso. La
concentración de albúmina en plasma influye notablemente en el mantenimiento de la
presión coloidosmótica, lo que estaría relacionado con su relativamente bajo peso
molecular y su gran carga neta.

En condiciones patológicas como pérdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas,

etc., suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple,
endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de diversos orígenes, se observan
hiperproteinemias. En general, ambas situaciones se ven acompañadas también por
hipoalbuminemias. Los aumentos anormales de albúmina son ocasionales y se relacionan
casi siempre con deshidratación que produce el consecuente aumento en el contenido
proteico del plasma.

A. FUNDAMENTOS DEL METODO

 Determinación de Proteínas Totales:

Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico, en medio alcalino,
para dar un complejo color violeta con máximo de absorción a 540 nm, cuya intensidad es
proporcional a la concentración de proteínas totales en la muestra.

B. MATERIALES Y METODO

 PROCEDIMIENTO :

En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:

B S D
 Agua destilada 50 ul - -
Standard - 50 ul -
Muestra - - 50 ul
Reactivo EDTA/Cu++ 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar con varilla. Incubar 15 minutos a 37°C. Leer en espectrofotómetro a 540 nm o en

fotocolorímetro con filtro verde (520-560 nm) llevando a cero con el Blanco de Reactivo.

 Determinación de Albúmina:
La albúmina reacciona específicamente con la forma aniónica del tetrabromo cresolsulfon
ftaleína (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio tamponado a pH 3,8. La
absorbancia a 625 nm es proporcional a la cantidad de albúmina presente en la muestra.

C. PROCEDIMIENTO

En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:

B S D

Standard - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
Reactivo BCF 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml

Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28°C durante 10 minutos. Leer en
espectrofotómetro a 625 nm o en fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm) llevando a
cero con el Blanco de Reactivo.

D. RESULTADOS

ABSORBANCIA PROTEÍNAS ALBUMINA

TOTALES
Blanco 0.001 0.001

Estándar 0.246 0.175

Desconocido 0.210 0.149

E. CALCULO DE LOS RESULTADOS

Empleando los valores de absorbancia obtenidos, calcular la concentración de PT y Alb
como sigue:

 Proteínas Totales (g/dl) = =

P . T .( D) x 4,9(g/dL)
S
g
ALB ( D ) X 2.9 ( )
dL
 Albúmina (g/dl) = S

 VALORES DE REFERENCIA

 Proteínas Totales: 6,1 a 7,9 g/dl

 Albúmina: 3,5 a 4,8 g/dl

PT= 0.210 × 4.9 / 0.246= 4.10 g/dl

ALB= 0.149 × 2.9 / 0.175= 2.47 g/dl

INTERPRETACIÓN:

 Las proteínas totales se encuentran entre un valor normal que es 4.10 g/dl.
 La Albúmina se encuentra disminuida con un valor de 2.47 por debajo de lo
normal.

F. CUESTIONARIO

a) ¿Qué influencia tiene la dieta sobre la concentración de proteínas totales y de

albumina?

 La concentración de albúmina en plasma influye mucho en el mantenimiento de la

presión coloidosmótica, lo que estaría relacionado con su bajo peso molecular y
su gran carga neta. Sin embargo, aún no se ha resuelto la incógnita sobre las
consecuencias que la práctica de los tipos de dietas puede llegar a generar en la
población sana.

b) ¿Cuáles son las funciones de la albumina en el organismo humano?

 La albúmina ayuda a mantener el líquido dentro del torrente sanguíneo sin que se
filtre a otros tejidos. También transporta varias sustancias por el cuerpo, por
ejemplo, hormonas, vitaminas y enzimas. Los niveles de albúmina bajos podrían
indicar un problema del hígado o los riñones.
c) ¿Esquematice y explique la utilización de aminoácidos en el metabolismo de
compuestos nitrogenados?

 El Nitrógeno (N) junto a otros elementos, como Carbono, Oxigeno e Hidrogeno

participan en la constitución de las moléculas orgánicas fundamentales de la
materia viva. Entre los compuestos constituyentes del organismo, el N forma parte
de un grupo de compuestos orgánicos de gran jerarquía biológica a los cuales
están asignadas funciones muy importantes, como lo son las proteínas y los
nucleótidos. Este elemento constituye por si solo el 3% del peso corporal. En la
atmósfera, el N molecular (N2), es muy abundante.

Esta molécula es casi no reactiva o inerte debido a su triple enlace que la

estabiliza. Antes de poder ser utilizado por los animales, el N atmosférico debe ser
“fijado” mediante una cadena de reacciones. En primer lugar, el nitrógeno debe ser
reducido de N2 a NH3 (amoniaco) en un proceso llamado amonificación, llevado a
cabo por microorganismos y descargas eléctricas en la naturaleza. Posteriormente,
el NH3 es oxidado a nitritos y nitratos (NO2 - y NO4 =) por bacterias saprofitas,
proceso llamado nitrificación. En el suelo, estas formas oxidadas son “asimiladas”
por los vegetales incorporando el N a estructuras biológicas, los aminoácidos,
proteínas y demás compuestos; de esta manera este elemento pasa a formar parte
de la cadena alimentaria, en la cual el ser humano es un eslabón más.

 Los aminoácidos desempeñan muchas funciones importantes en los seres vivos ya

que participan en la biosíntesis de compuestos nitrogenados tales como:
nucleótidos (púricos y pirimidínicos) hormonas (tiroxina y adrenalina) coenzimas
Porfirinas Además los aminoácidos son las unidades estructurales de las
proteínas. Estas moléculas extraordinarias cumplen diferentes funciones
dependiendo del tejido y de la ubicación celular, por ejemplo: estructurales
 (colágeno o elastina) funcionales (Miosina del músculo, hemoglobina) protectoras
(queratina del pelo y uñas) catalíticas (enzimas)defensa (anticuerpos)

2. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:
 Romero-Gómez M, Córdoba J, Jover R et al. Valor de la frecuencia crítica de
parpadeo en pacientes con encefalopatía hepática mínima. Hepatología 2007;
45: 879-885.