Benemérita Universidad Autónoma de Puebla

Facultad de Ciencias Biológicas Licenciatura en Biotecnología

Biología Celular
Dra. Yolanda Elizabeth Morales García
NRC: 52114

Practica 5: TINCIÓN Y FISIOLOGÍA DEL FLAGELO Y DE LA

PARED CELULAR

Pablo Flores Álvarez 202035580

AGRADECIMIENTOS: A MicroBST Yoliza S.R.L de C.V. por aportar los materiales

necesarios para la práctica.
INTRODUCCION
La tinción y la fisiología del flagelo y de la pared celular son temas importantes en
biología celular y microbiología. El flagelo es una estructura celular en forma de
látigo que se encuentra en algunas células y se utiliza para la locomoción, mientras
que la pared celular es una estructura rígida que rodea la célula y le brinda
protección y soporte.
La tinción es una técnica utilizada para visualizar estructuras celulares mediante la
adición de colorantes específicos que se unen a componentes específicos de la
célula, como la pared celular o el flagelo. Estos colorantes pueden ser naturales o
sintéticos y permiten la identificación y clasificación de microorganismos en función
de su morfología y características específicas.
La fisiología del flagelo y de la pared celular es importante para comprender la
función y la supervivencia de los organismos que las poseen. La pared celular
proporciona protección contra agentes externos, incluidos los antibióticos, y
mantiene la forma celular. Por otro lado, el flagelo permite la movilidad de las células,
lo que puede ser crucial para la colonización de nuevos ambientes o para la
respuesta a estímulos ambientales.
OBJETIVOS
Realizar las tinciones que permiten identificar el flagelo y la pared celular de
procariontes y observar la funcionalidad flagelar de células eucariontes.
MATERIALES Y REACTIVOS
• Microscopio óptico
• Cámara Moticam
• Fucsina básica
• Acido tánico
• Cloruro de sodio
• Porta objetos
• Cubreobjetos
• Asa bateriológica
• Pipeta Pasteur
• Agua destilada
• Vaso de precipitado de 250 mL
• Mechero bunsen
• Piseta con agua destilada
• Alcohol-Acetona
 RESULTADOS Y METODOLOGIA
I. Tinción de Flagelos
1)Se debe esterilizar el portaobjetos perfectamente limpio con agua destilada,
enjuagado con alcohol y secado con un trozo de tela limpio y hacer un círculo
en el portaobjetos. Desengrasarlo pasando por una flama varias veces.
2)Colocar dentro del círculo con pipeta Pasteur, una gotita de la suspensión
bacteriana e inclinar el portaobjetos de uno y otro lado para extender la
muestra.
3)Fijar la preparación al aire ya que si esta operación se hace usando la flama
del mechero se pueden destruir los flagelos.
4)Humedecer la preparación con el colorante y dejarlo en reposo a
temperatura ambiente durante 10 minutos aproximadamente.
5)Lavar con agua destilada y observar los resultados

Resultados
En nuestro intento de teñir los flagelos de las bacterias, logramos obtener
resultados positivos. La técnica de tinción que utilizamos nos permitió
visualizar claramente los flagelos, lo que nos brindó información valiosa
sobre la morfología y la estructura de estas estructuras celulares.
Sin embargo, durante el proceso de tinción, nos enfrentamos a algunas
dificultades. Una de ellas fue la necesidad de realizar varios intentos antes de
obtener un resultado satisfactorio. Esto se debió a que la técnica de tinción
de flagelos requiere de un protocolo riguroso, y cualquier pequeño error en la
preparación de las muestras o en la aplicación de los reactivos puede afectar
los resultados.
II.Tinción de pared celular
1)Limpiar previamente un portaobjetos paracada uno de los microorganismos
2)Depositar 20microlitros de agua destilada en el portaobjeto
3)Con una asa bacteriológica previamente esterilizada tomar una pequeña muestra
bacteriana uniéndola a la gota de agua, con movimientos circulatorios homogenizar la
muestra y extenderla.
4)Dejar secar las muestras al aire libre o con calor, para su tinción.
5)Cubrir los frotis con cristal violeta durante un minuto.
6)Lavar suavemente con agua destilada para eliminar el exceso de colorante.
7)Cubrir con lugol los frotis durante un minuto. El lugol actúa como mordiente aumentando
la afinidad del colorante por la bacteria.
8)Lavar nuevamente con agua el exceso de lugol.
9)Decolorar con alcohol-acetona de 5 a 30 seg. y se lava enseguida con agua
abundante.
10)Adicionar a los frotis safranina, durante un minuto y lavar con chorro suave.
11)Secar al aire, observándose a continuación con el objetivo de inmersión

Resultados
En nuestro intento de realizar la tinción de pared celular en las muestras de bacterias,
logramos obtener resultados efectivos y precisos, y pudimos identificar claramente los tipos
de células bacterianas presentes. La técnica de tinción de pared celular que utilizamos nos
permitió diferenciar entre bacterias Gram positivas y Gram negativas, y logramos identificar
que las bacterias presentes en nuestras muestras eran Gram negativas.
Sin embargo, durante el proceso de tinción de pared celular, nos enfrentamos a ciertas
dificultades. Una de ellas fue la necesidad de asegurarnos de que todos los pasos de la
técnica se realizaran de manera correcta y precisa, ya que cualquier pequeño error puede
afectar los resultados.
CUESTIONARIO
1.- ¿Qué función tiene el flagelo?
La función principal del flagelo es permitir que las células se muevan de un lugar a
otro en su entorno, ya sea para buscar nutrientes, huir de depredadores o colonizar
nuevos ambientes.
2.- ¿En qué estructura celular se sujeta el flagelo? Apóyate de un esquema
El flagelo se sujeta en la membrana celular y en la pared celular de las células que
lo poseen. En las células bacterianas, el flagelo se inserta en la pared celular y en
la membrana citoplasmática a través de un complejo proteico llamado "cuerpo
basal" o "motor del flagelo". Este complejo es esencial para la función del flagelo,
ya que es responsable de la rotación y del movimiento del flagelo
3.-Enlista la clasificación microbiana, de acuerdo con el número y posición del
flagelo
• Monotricos: Son microorganismos que tienen un solo flagelo en un extremo
de la célula. Ejemplos de bacterias monotricas son la especie Pseudomonas
aeruginosa.
• Anfitricos: Son microorganismos que tienen un solo flagelo en cada uno de
los extremos de la célula. Ejemplos de bacterias anfitricas son la especie
Vibrio cholerae.
• Lofotricos: Son microorganismos que tienen varios flagelos en uno o ambos
extremos de la célula. Ejemplos de bacterias lofotricas son la especie
Spirillum volutans.
• Peritricos: Son microorganismos que tienen varios flagelos distribuidos
alrededor de toda la célula. Ejemplos de bacterias peritricas son la especie
Escherichia coli.
4.- ¿Qué células contiene pared celular? y ¿Cuál es su función?
• En bacterias, la pared celular se encuentra por fuera de la membrana
citoplasmática y cumple varias funciones, como brindar protección contra la
presión osmótica y proporcionar resistencia frente a ciertos antibióticos.
• En plantas, la pared celular se encuentra por fuera de la membrana
plasmática y desempeña funciones muy importantes en el crecimiento y
desarrollo de la planta, como dar soporte estructural, proteger las células
frente a daños mecánicos, y permitir el intercambio de agua, nutrientes y
gases entre las células.
• En los hongos, la pared celular es importante para mantener la integridad
estructural y proteger a las células de la desecación y la presión osmótica.
5.- ¿Cómo está constituida la pared de un unicelular (bacteria) y cómo de un
pluricelular (vegetal)?
• La pared celular de una bacteria está compuesta principalmente por
peptidoglicano, una red de polisacáridos y péptidos que se encuentra por
fuera de la membrana citoplasmática. El peptidoglicano es una estructura
resistente que brinda protección contra la presión osmótica y ayuda a
mantener la forma de la célula. Además del peptidoglicano, algunas bacterias
pueden tener otros componentes en su pared celular, como ácidos teicoicos
o lipopolisacáridos.
• Por otro lado, la pared celular de una célula vegetal está compuesta
principalmente por celulosa, un polisacárido que se encuentra por fuera de la
membrana plasmática. La celulosa es una estructura resistente que brinda
soporte estructural y protección contra la desecación y los daños mecánicos.
Además de la celulosa, la pared celular de las células vegetales puede
contener otros componentes como lignina y pectina.
6.-En la tinción celular ¿Qué papel juega el lugol y el alcohol-acetona?
• En la técnica de tinción celular conocida como tinción de Gram, el Lugol y el
alcohol-acetona juegan un papel importante en la diferenciación de las
células según su pared celular. Después de teñir la muestra con cristal
violeta, se agrega Lugol, una solución de yodo, que actúa como mordiente y
ayuda a fijar el colorante dentro de la célula. Luego se realiza un lavado con
alcohol-acetona, que es un agente decolorante. El alcohol-acetona elimina el
colorante delgadamente retenido en la pared celular de las bacterias Gram
negativas, pero no de las bacterias Gram positivas, debido a las diferencias
en la composición de sus paredes celulares.

DISCUSION
En general, los resultados obtenidos en la tinción de flagelos y pared celular son positivos,
ya que lograron identificar con éxito la presencia de estas estructuras celulares en las
bacterias analizadas. La observación clara de los flagelos brinda información valiosa sobre
la morfología y estructura de las bacterias, lo que es importante para entender sus funciones
y características.
Por otro lado, la tinción de pared celular también brindó resultados precisos y efectivos,
permitiendo identificar claramente los tipos de células bacterianas presentes en las
muestras. La capacidad de diferenciar entre bacterias Gram positivas y negativas es
fundamental en la identificación y clasificación de las bacterias, lo que es relevante en
distintos campos de estudio.
Sin embargo, se mencionan algunas dificultades encontradas durante la realización de
ambas técnicas. En el caso de la tinción de flagelos, se resalta la necesidad de seguir un
protocolo riguroso y la posibilidad de cometer errores que afecten los resultados. En el caso
de la tinción de pared celular, se destaca la necesidad de realizar cada paso de manera
precisa y cuidadosa para obtener resultados precisos.
CONCLUSION
En conclusión, la tinción celular es una técnica valiosa y esencial en la identificación
y clasificación de las bacterias. Aunque se encontraron dificultades en su
realización, se lograron resultados efectivos y precisos en la observación de flagelos
y la identificación de bacterias Gram negativas a través de la tinción de pared
celular. Es importante destacar la importancia de seguir un protocolo riguroso y
realizar cada paso con precisión para obtener resultados fiables y consistentes.
Estas técnicas son esenciales en el campo de la microbiología y son herramientas
valiosas en el estudio de la morfología, estructura y características de las bacterias.
BIBLIOGRAFÍA:
Madigan, M. T., Martinko, J. M., Bender, K. S., Buckley, D. H., & Stahl, D. A. (2018).
Brock Biology of Microorganisms, 15th Edition. Pearson.
Brown, T. A., & Blackwell, T. K. (2017). Microbiología. Médica Panamericana.
Hengge-Aronis, R. (2002). Signal transduction and regulatory mechanisms involved
in control of the σS (RpoS) subunit of RNA polymerase. Microbiology and molecular
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