Primavera 2023 EQUIPO 2

Lic. en Biotecnología Aguilar Cano María Fernanda

Cirilo Hilario Héctor Alexis
Laboratorio de bioquímica I
Cruz Loya Fátima Isabel
Docente: Dr. Laura Morales Lara
García Rodríguez Antonio
NRC: 52109
Haro Montiel Angélica
Pablo Flores Alvarez

DETERMINACIÓN DE AMINOÁCIDOS AZUFRADOS EN PÉPTIDOS Y

PROTEÍNAS

INTRODUCCIÓN OBJETIVO MÉTODO

Los aminoácidos son macromoleculas las cuales se encuentran constituidas Determinar la presencia de los
por un grupo caboxilo (-COOH), un grupo amina (-NH3) y una cadena lateral
En un tubo de ensayo
aminoácidos azufrados en la
organica, todos conectados a un carbono. vertir 1 mL de clara de
proteína.
Esta cadena lateral unida al carbono alfa es una parte importante en la huevo
estructura, pues no solo nos dira la naturaleza del aminoacido, sino también
nos ayudara a poder saber caracteristicas especificas de ella, asi como el
comportamiento que estas tienen en el entorno, o en nuestro caso, en el
organismo. REACTIVOS Y MATERIALES Añadir 1ml de la
Por otra parte, algunas de estas cadenas laterales pueden contener azufre. El solución de NaOH
azufre es un elemento muy necesario para el cuerpo, por ello, es que su
presencia en los aminoacidos de las proteinas es de vital importancia. Reactivos
Hidroxido de sodio NaOH 20%
El huevo es considerado un prodcuto con un alto contenido en proteínas, Inhalar bajos niveles de hidróxido de sodio en forma
Calentar la solución
gracias a esto puede ser consumido varias veces a la semana. Su principal de polvos, neblinas o aerosoles puede producir
proteina es la ovoalbumina, la cual se encuentra presente en la clara de huevo irritación de la nariz, la garganta y las vías en baño maría hasta
y al ser expuesta en calor se puede desnaturalizar de manera muy rapida. respiratorias. la ebullición
Además la clara de huevo tiene muchos aminoacidos escenciales, entre ellos
cisteina y metionina los cuales contienen azufre.

Existe diversas maneras de identificar la presencia de aminoacido azufrados, Acetato de plomo Pb(CH₃COO)₂ 0.5% Retirar del baño maría
una de ellas se da al formar un precipitado negro de sulfuro de plomo, esta Puede afecatar por inhalación o ingestión.
y dejar enfriar
reacción se desarrolla en un medio basico tambien conocido como alcalino en
la presencia de acetato de plomo para la formacion de sulfuro de plomo. Agua destilada
La toxicidad del plomo esta dada por la finalidad a los grupos sulfhídocos (-SH)
de las proteinas, es decir, alteran su forma y función. Agregar dos gotas de
Material biológico Material acetato de plomo y
La cisteína se clasifica como un aminoacidos polar por la localización de su 1 Clara de huevo Dos tubos de enayo
grupo funcional tiol en el extremo de la cadena, sin embargo, en el caso de la Pinzas para tubo de ensayo
observar
metionina, el grupo sulfuro se encuentra entre medio de dos carbonos, Baño maria
haciendo la cadena no polar y por ello, que sea un poco más dificil Pipeta de 5ml
interaccionar.

DISCUSIÓN DE RESULTADOS
La presencia de aminoácidos azufrados en la clara de huevo se realizó mediante la
técnica de formación de precipitado.
La ovoalbúmina, proteína perteneciente a la clara de huevo es rica en cisteína y
metionina (aminoácidos conformados por azufre). Al agregar NaOH a la clara de
RESULTADO 1 RESULTADO 2 huevo y someterlo en calor, el hidróxido de sodio reaccionó directamente con el
aminoácido “cisteína” provocando que los enlaces petidicos se hidrolizaran y
separara el azufre.
Imagen 1. Coloración: Negra. Imagen 2. Coloración: Amarilla →
R-SH + 2 NaOH R-OH +Na2S + H2O
Presencia de aminoacidos claro. Desnaturalización de

proteínas Una vez calentada la mezcla se agregó acetato de plomo, al ser agregado se genera
Azufrados
una reacción de sustitución dando como resultado sulfuro de plomo. Esto se debe a
la gran interacción que existe entre el plomo y el azufre. Ademas, cuando el
Acetato de plomo reacciona en medio alcalino contribuye a la formación del
precipitado negro.

Na2S + (CH3-COO)2 Pb →2CH3-COONa + PbS (precipitado)

Al calentar el tubo de ensayo en baño maría con
ovoalbúmina e hidróxido de sodio, lo que sucedió fue que
los enlaces peptídicos de la proteína se hidrolizaron. El
hidróxido reaccionó con el aminoácido azufrado
correspondiente a la clara de huevo, separando el azufre
que este contiene. Posteriormente se le agregó acetato
de plomo, observando un precipitado de color oscuro
denominado sulfuro de plomo.
En otro tubo de ensayo se agregó clara de huevo e
NaOH al exponerlos en calor se obtuvo un color
amarillo claro espeso. En este caso el calor
únicamente logró desnaturalizar las proteínas que
contiene la albúmina, y al no ver interacción con
plomo no se distingue un precipitado negro en la CUESTIONARIO
reacción.
1. Escriba la fórmula de los aminoácidos azufrados que podemos
encontrar en las proteínas
Metionina Cisteína

CONCLUSIÓN 2. ¿Cuál es la diferencia entre cisteína y cistina? la cisteína es un

aminoácido y la cistina se forma cuando dos aminoácidos se unen a
En la practica de determinación de aminoácidos azufrados se realizo a identificación de azufre través de un enlace disulfuro.
en los aminoácidos metionina y cisteína mediante la técnica de formación de precipitado. Se 3. Escriba la reacción entre un aminoácido azufrado, el NaOH y el
concluye que la ovoalbúmina tiene aminoácidos azufrados que se pudieron identificar
acetato de plomo
agregando NaOH y Acetato de plomo. Sin embargo, el aminoácido no identificado fue la
metionina debido a que no posee grupos tiol en comparación con la cisteína, esto provoca que →
𝑅 − 𝑆𝐻 + 2𝑁𝑎𝑂𝐻 𝑅 − 𝑂𝐻 +𝑁𝑎2𝑆 + 𝐻20
en un medio alcalino no pueda protonarse en comparación con la cisteína. →
𝑁𝑎2𝑆 + (𝐶𝐻3− 𝐶𝑂𝑂)2𝑃𝑏 2𝐶𝐻3− 𝐶𝑂𝑂𝑁𝑎 + 𝑃𝑏𝑆
4. Diseñe un desarrollo experimental que le permita establecer si la
presencia del azufre, detectada en la proteína de la clara de huevo se
debe a la presencia de puentes disulfuro
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
Aula Virtual de Biología. (s. f.). https://www.um.es/molecula/prot02.htm
Clasificación de los aminoácidos. (s. f.). Hacer una Observar a que Realizar una Hacer otra electroforesis
electroforesis con la electrodo se dirige oxidación con ácido observando si hay algún
https://sitios.quimica.unam.mx/departamento/proteinas/estructura/EPamm3.html muestra la proteína perfórmico cambio electroforético
https://prezi.com/nxgacyg61vg8/reconocimiento-de-aminoacidos-azufrados-en-las-
proteinas/#:~:text=El%20reconocimiento%20de%20amino%C3%A1cidos%20azufrados
,formaci%C3%B3n%20de%20sulfuro%20de%20plomo.