UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE QUÍMICA

CURSO: QUÍMICA ANALÍCA – TEORÍA

TAREA 16

Alumno: Angie Lucero Curay Correa

Código: 20211975

Facultad: Industrias alimentarias

Horario De Teoría: Mie 08:00 a 11:00

Grupo: E

Profesor: Juan Carlos Palma

LA MOLINA-LIMA-PERÚ

2022
1. Determinación de composición de aceites por GC-FID( 2)

https://www.youtube.com/watch?v=_wbzerZFrcc

CROMATOGRAFÍA :

CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

> Los elementos básicos de una cromatografía en columna son:

> la fase estacionaria: un sólido poroso, el cual queda soportado en el interior de una
columna generalmente fabricada en plástico o en vidrio

> la fase móvil: es un liquido.

> En sus comienzos se,realizaba en columnas de vidrio"ton diámetro de 1-5 cm. y

longitudes de 50 -500 cm. Utilizando distintos tipos de rellenos ¡alúmina (AL03), Sílica u
Oxido de Magnesio].

CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA

Con la utilización de la técnica se vio la posibilidad de conseguir grandes aumentos en

la eficacia de la columna disminuyendo el tamaño de las particulas de los rellenos
utilizados.

> Actualmente se utilizan rellenos de tamaños de partícula del orden de 3 - 10 ym. Este
tamaño de partícula requiere la utilización de instrumentos sofisticados (HPLC).

> La eficiencia de la columna en la cromatografía de liquidos está determinada por el

tamaño de la particulas.

COLUMNAS Y TIPOS DE RELLENOS

 > Las columnas para HPLC se construyen normalmente con acero inoxidable. La
mayoría tienen una longitud de 10 a 30 cm.

> Los tipos básicos de relleno utilizados son:

> Pelicular: Consiste en bolas de vidrio de polimero. no porosas y esféricas recubiertas

de una fina capa porosa de sílice, alúmina o de una resina de intercambio iónico. Este
tipo de relleno se utiliza normalmente en las precolumnas.

> Partícula porosa: formados por microparticulas porosas con diámetros de 3 a 10 ¡zm
de sílice, alúmina o de una resina de intercambio iónico. Las de silice son las más
comunes.

TIPOS DE DETECTORES

> Son de dos tipos básicos:

> Basados en una propiedad de la fase móvil (solución):

> Detector índice de refracción

> Detectores electroquímicos

> Detectores de dispersión de luz

> Basados en una propiedad del soluto:

> Detector de absorbancia en UV

> Detector de absorbancia en IR

> Detector de fluorescencia

APLICACIONES

> Su campo de aplicación es numeroso debido a las siguientes razones:

>Su sensibilidad

> Su fácil adaptación a las determinaciones cuantitativas exactas

> Su idoneidad para la separación de especies no volátiles o termolábiles

>Su gran aplicabilidad a sustancias de gran interés para la industria y los distintos
campos de la ciencia. Por Ejemplo:

> Ácidos nucleicos, Aminoácidos, Hidrocarburos, Carbohidratos,

drogas, terpenoides, plaguicidas, antibióticos, esteroides

2. Determinación de curcumina. por HPLC.

Mediante cromatografía líquida de alta resolución con detector de fluorescencia la
cúrcuma es un pigmento picante que se extrae de la raíz de la planta cúrcuma longa
tiene un intenso color por lo cual se utiliza como aditivo alimentario es el responsable del
color amarillo del curry las mostazas etcétera además es una especia que está de moda
debido a su presunto potencial biomédico ya que al parecer puede jugar algún papel en
enfermedades como el cáncer el alzheimer etc de hecho ya era utilizada por los griegos
y forma parte de la medicina ayurvédica o medicina tradicional hindú y la medicina china
 desde el punto de vista químico la cúrcuma contiene tres compuestos polifenólicos
denominados curcumina jdd es cuya fórmula molecular presentamos en la figura esa
diferencia únicamente en las posiciones r1 y r2 donde la curcumina lleva dos grupos
med occ si la de smet ocs y curcumina ha perdido uno de ellos y la bussiness metros y
curcumina ha perdido los dos si tiene dos hidrógenos por ello sus propiedades varían
gradualmente entre ellas la polaridad se sabe además que existe un cuarto compuesto
minoritario que es la ciclo curcumina y que en el caso de la curcumina existe amino en
dos formas de auto meras la excepto y la en el equilibrio desplazado hacia la forma
irónica ambas lógicamente son solubles en etanol ácido acético y acetonitrilo además la
estructura de la molécula nos sugiere que es fluorescente los objetivos de esta práctica
entonces van a ser separar e identificar los tres compuestos curcumina hoy de
mayoritarios del grupo comercial mediante cromatografía de líquidos de alta resolución
con detector de fluorescencia y en segundo lugar cuantificar la curcumina en diferentes
muestras de cúrcuma mostaza y curry utilizando el método del patrón externo vamos a
utilizar la cromatografía de líquidos de alta resolución que es una técnica de separación
en ella la fase móvil que va a ser líquida va a estar contenida en un recipiente si vamos a
trabajar en régimen socrático o más de uno si vamos a trabajar en régimen de gradiente
en esta fase móvil vamos a inyectar la muestra que va a ser arrastrada por la fase móvil
a través de la fase estacionaria contenida en una columna donante en la cual mediante
diversos mecanismos reparto absorción cambio niko etcétera se va a producir la
separación de los analitos que posteriormente vamos a registrar en un denominado
detector aunque se trata de un sistema de detección completo en este caso un espectro
flor y metro se necesita además un sistema de registro y control bien en esta técnica las
partículas de la fase estacionaria son extraordinariamente pequeñas y están
compactadas por tanto para que la eficacia sea apropiada y la fase móvil no tarde horas
en atravesar la columna necesitamos un sistema de bombeo a presión que genere una
presión entre 100 y 200 atmósferas o bartz en la fotografía puede verse el equipo que
vamos a utilizar tenemos los recipientes de la fase móvil que van a ser acetonitrilo y
ácido acético al 2% tenemos un sistema de desgasificación que es muy importante
porque las burbujas de aire generan un ruido extraordinario en la bomba donde
mezclamos los componentes de la fase móvil les suministramos presión y un sistema de
amortiguación de pulsos para que el flujo sea constante llegados a este punto la fase
móvil atraviesa la válvula de inyección donde arrastra a la muestra con los saladitos los
arrastra a través de la columna y los llevamos al espectro flor y metro tal y como hemos
explicado se observa también el sistema de control y registro bien en nuestro caso
vamos a utilizar una columna de 18 de oct de cyl silano qué es una sustancia a polar
bueno las partículas son de 5 micrómetros como hemos dicho la columna tiene 150
milímetros de largo y 46 milímetros de diámetro interno la fase móvil por el contrario está
compuesta por ácido acético y acetonitrilo es polar trabajamos por tanto en lo que los
cromos grafistas denominan la fase reversa o fase inversa los analitos que entran todos
juntos en la columna interaccionan con las partículas de la fase estacionaria y se
establece un equilibrio entre el analizó en la fase móvil y analizó en la fase estacionaria
que está descrito por la constante o coeficiente de distribución k en función de la cual
unos analitos avanzan más rápidamente que otros en este caso avanza más rápido
cuanto mayor sea su polaridad eso nos va a permitir separarlos y al final de la columna
vamos a registrar el denominado cromatógrafo en éste cromatógrafo.

3. Determinación de toxinas en vino

https://www.youtube.com/watch?v=bt2auoHhQbY
Se toma un mililitro de ácido acético glacial se introduce en una probeta y se completa hasta 500
mililitros con agua a continuación el líquido se filtra vacío y se transfiere a un aforado de un litro
posteriormente se completa el volumen hasta un litro con acetonitrilo y sedes gasifica dicha fase
móvil durante 10 minutos en un baño de ultrasonido para la preparación de la curva de calibrado
se partirá de una disolución de un microgramo de ocratoxina por mililitro que se habrá preparado
previamente a partir de esta disolución se añadirán volúmenes crecientes del patrón para
obtener una curva de calibrado que cubre adecuadamente el intervalo lineal del método
finalmente se procederá a engrasar las disoluciones con metanol en primer lugar y para evaluar
la recuperación del método se preparan tres muestras aditiva das tomando tres alícuotas de 5
mililitros de vino exento de ocra toxina que se introducirán en tres aforados de 10 mililitros a
continuación se añadirán porciones de 0 40 y 60 microlitros de una disolución de ocratoxina a de
un microgramos por mililitro y se completa el volumen con agua a continuación se preparan tres
muestras de vino contaminado tomando cinco mililitros de muestra a un aforado de diez mililitros
y se engrasa con agua en este esquema se muestra un cartucho de extracción en fase sólida
así como las etapas habituales a realizar en primer lugar se colocan los cartuchos en el colector
de vacío que contiene tubos de recolección en su interior a continuación se procede con la etapa
de acondicionamiento que consiste en hacer pasar 5 mililitros de metanol a través del solvente
situado en el cartucho posteriormente se abren los canales permitiendo que el líquido fluya a
través del solvente una vez todo el líquido haya pasado se repite el proceso pero esta vez con 5
mililitros de agua finalmente el líquido recogido en los tubos de recolección se desecha para la
etapa de carga los 10 mililitros de muestra preparados anteriormente se pasan por los cartuchos
y se recogen en un tubo de recolección una vez que todo el líquido ha fluido a través del
solvente se desconecta el vacío y se desecha el líquido que se encuentra en los tubos de
recolección posteriormente se realiza la etapa de lavado adicionando 2 mililitros de agua
seguido de 2 mililitros de una mezcla metanol agua 60 40 que ha de haber sido preparada
previamente finalmente se realiza la etapa de ilusión para ello se adicionan 2 mililitros de
metanol sobre el cartucho los cuales se recogerán sobre un tubo de recolección con rosca
perfectamente limpio y etiquetado una vez que el líquido ha pasado completamente a través del
cartucho se guardan los tubos para la posterior inyección de las muestras en h plc una vez
realizado todo el procedimiento se procederá a la inyección en h plc de los patrones y las
muestras con este fin se tomarán con una jeringa un volumen aproximado de medio mililitro se
conectará al filtro y a la aguja de inyección y se introducirá en el inyector para llenar el bucle
finalmente se girará la válvula de inyección de posición load a posición inyecta es importante
limpiar la jeringa entre las distintas inyecciones a modo de ejemplo se muestra un cromatógrafo
ha obtenido para una muestra contaminada puede observarse el pico correspondiente a la obra
toxina y sobre los 39 minutos