Universidad Tecnológica del Valle

de Toluca.
“Unidad Académica Capulhuac”.

REPORTE DE PRACTICA No.10

“CROMATOGRAFÍA EN CAPA
FINA”

Nombre de los alumnos: Ayolany Farfan Villegas

Misael Madero Martinez
Nombre del profesor (a): Ma.Ines Coahuila Hernández

Materia: Química Analítica

Grupo: QBT 33
Introducción
La cromatografía, es una técnica que nos permite purificar e identificar sustancias
presentes en una muestra. Existen dos métodos, la cromatografía de capa fina y la
cromatografía en columna. La cromatografía en capa fina nos permite identificar
las sustancias presentes en una muestra, por otro lado, la cromatografía en
columna nos permite separara las sustancias presentes en la mezcla
La cromatografía en capa fina (TLC) es un método de afinidad que se utiliza para
separar los compuestos de una mezcla. La TLC es un método de separación muy
versátil que se utiliza ampliamente para el análisis cualitativo y cuantitativo de las
muestras. La TLC puede utilizarse para analizar prácticamente cualquier clase de
sustancia: plaguicidas, esteroides, alcaloides, lípidos, nucleótidos, glucósidos,
carbohidratos y ácidos grasos.
La fase estacionaria es una fina capa de material adsorbente, normalmente gel de
sílice u óxido de aluminio, que recubre una superficie de placa inerte, normalmente
vidrio, plástico o aluminio. Se deposita una pequeña cantidad de la muestra en un
extremo de la placa de TLC, que se coloca verticalmente en una cámara cerrada
con un disolvente orgánico (fase móvil). La fase móvil se desplaza hacia arriba por
la placa por capilaridad y los componentes de la muestra migran distancias
variables en función de sus afinidades diferenciales por las fases estacionaria y
móvil. Cuando el disolvente llega a la parte superior de la placa, ésta se retira de
la cámara de desarrollo y se seca.
Procedimiento
Para comenzar con la practica, Tomamos una tableta de cada analgésico
(paracetamol, diclofenaco) y trituramos por separado en mortero (excepto la
cafeína que es polvo). Después en 4 tubos de ensayo con tapón de rosca en cada
uno colocamos 20 mg de un polvo. Posteriormente adicione 3 mL de acetato de
etilo a cada tubo y agite vigorosamente hasta disolución parcial de las muestras.
Ahora procedemos a calentar las cromatoplacas o cromatofolios durante 30 min a
110 °C para eliminar así el agua, colocamos en la flama los capilares con la
intención de conseguir diámetros menores que permitan la aplicación de muestras
pequeñas, con el capilar tomamos una pequeña muestra y la colocamos en la
cromatoplaca en un diámetro de 0.5 cm aproximadamente del borde para que
seque después de cada aplicación.
Únicamente vamos a realizar el experimento numero 1, vamos a dividir 1
cromatofolio en dos partes, en cada parte se harán tres aplicaciones de la
disolución del patrón, aplicando primero una gota, en la segunda aplicación dos
gotas y por último tres gotas. Los patrones a utilizar serán Ácido acetilsalicílico y
Cafeína, ahora vamos a colocar el cromatofolio en una caja Koplin a la que
previamente se le adicionaron 2 mL de acetato de etilo y tápela Cuando el frente
del eluyente esté casi en el borde de la parte superior del cromatofolio destape la
cámara, retírelo con cuidado y marcamos en frente con un lápiz.
Dejamos secar al aire libre Para poder visualizar las manchas, ahora vamos a
ocupar la lámpara de luz UV de onda corta y larga, marcando el contorno de las
manchas con el mismo lápiz y luego lo vamos a colocar el cromatofolio en una
cámara con cristales de yodo (en cámara de koplin adicionar un poco de yodo y
tapar) por 5 min aproximadamente en campana de extracción
En la siguiente imagen se muestra el proceso del montaje de la prueba

Cálculos

=1.2/
3.1 = 0.3
Se pesaron 20g de aspirina
Resultados
Cromatografia en capa fina como criterio parcial de identificación (2
cromatoplacas)
En ambas cromatoplacas se hizo 2 aplicaciones de 3 gotas de solución de aspirina
(cada una a los extremos) y una aplicación de 3 gotas de cafeína en el centro de
la cromatoplaca. La cromatoplaca eluida con metanol arrojo un Rf de 0.5 y 0.3
para el caso de la 1° aplicación de aspirina, un Rf de 0.4 para el caso de la
aspirina y un Rf de 0.5 y 0.3 para la segunda aplicación de aspirina, Por los
resultados el metanol es un buen eluyente para estas cromatografias.
La segunda cromatografia se eluyo con AcoEt. Los Rf estuvieron entre 0.6 y 0.1
para las aplicaciones de muestra de aspirina y un Rf de 0.1 para el caso de la
cafeína, por lo tanto, el eluyente no fue el más óptimo.
Análisis de resultados
Después de realizar la prueba se pudo determinar la presencia de metabolitos
secundarios en la aspirina y cafeina, aunque se tiene una leve variación en el Rf
de la Rutina, cerca de 0.02, puede deberse a las características químicas de la
fase móvil, que por ser volátiles se pueden haber perdido pequeñas cantidades
durante el proceso de inmersión y esto influyo en los resultados, pero también
cabe anotar que la rutina no estaba completamente sola o pura se encontraba en
compañía de otras sustancias químicas.
Los demás Rf si coincidieron con los valores registrados en el manual, por lo que
se puede descartar una alteración en la fase móvil e inclinarse más por la
combinación de sustancias químicas en el extracto que se estaba estudiando.
Conclusión

El proceso es similar a la cromatografía de papel con la ventaja de que se

desarrolla más rápidamente, proporciona mejores separaciones y se puede elegir
entre diferentes adsorbentes. La CCF es una técnica estándar en el laboratorio de
química orgánica. Debido a su simplicidad y velocidad, la CCF se utiliza a menudo
para monitorizar las reacciones químicas y también para el análisis cualitativo de
los productos de una reacción, puesto que permite conocer de manera rápida y
sencilla cuántos componentes hay en una mezcla.

Cuestionario
¿Dónde se aplica la cromatografía en capa fina?
Las aplicaciones habituales de la TLC son: Análisis de residuos farmacológicos y
de antibióticos en muestras alimentarias y medioambientales. Identificación y
cuantificación de colores, ingredientes, conservantes y edulcorantes en alimentos
y cosméticos.
¿Qué factores influyen en la cromatografía de capa fina?
FACTORES QUE INFLUYEN EN UNA C.C.F
 Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la
fase estacionaria.
 La cromatografía debe llevarse a cabo en un área sin corrientes de aire.
 Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o
agentes plastificantes o adhesivos.
¿Qué tipos de absorbentes se utilizan en cromatografía de capa fina?
En la cromatografía en capa fina (CCF) la fase estacionaria consiste en una capa
delgada de un adsorbente (como por ejemplo gel de sílice, alúmina o celulosa)
depositada sobre un soporte plano como una placa de vidrio, o una lámina de
aluminio o de plástico.