IDENTIFICACION Y AISLAMIENTO DE

CUMARINAS EN LA RUDA (RUTA GRAVEOLENS)

Alfaro Molina Willy Javier1, Choque Alegre Devora Lizeth1,
Paredes Aari Melanie Shirley1, Uztegui Ibez Mara del
Rosario1.
1

Programa Profesional: Farmacia y Bioqumica, Facultad de Ciencias

Farmacuticas, Bioqumicas y Biotecnolgicas, Campus U.C.S.M.,
Arequipa Per.
1. RESUMEN
En esta prctica se puede observar y consultar algunas de las
propiedades de las cumarinas presente en la ruda as mismo el
inters biolgico as como su uso. Tambin vimos cmo es la
extraccin de cumarinas con el disolvente orgnico adecuado que es
el cloroformo, el producto de vamos a obtener un extracto, un poco
se coloc en un le aadimos unos reactivo para la presencia de
cumarinas
el resto de extracto que lo utilizaremos la para
cromatografa de capa fina.
La identificacin de cumarinas presentes en las muestras extradas de
las hojas y flores de la ruda, por medio del mtodo de cromatografa
de capa fina; como fase estacionaria utilizaremos silica gel y la fase
mvil compuesta de tolueno y ter etlico saturada en acido actico
dicho procedimiento se realizara en la pera de decantacin de ah se
espera a la separacin de fases y se elimina el agua que es la que
termina en la fase de abajo una ves obtenido la que ser la fase mvil
se coloca en la cmara de cromatografa y se espera hasta que sature
el ambiente dentro de la misma, mientras esperamos se procede a
sembrar las muestras en la placa de cromatografa, este proceso de
sembrado se repite hasta 10 veces por cada una de las dos muestras,
una ves terminado este proceso de sembrado y estando seca las
muestras en la placa se colocan en la cmara de cromatografa. Al
retirar la placa de la cmara de cromatografa se marca el avanc de
la fase mvil con un lpiz y se espera al secado, luego utilizamos un
gabinete de visualizacin de cromat gramas de capa fina. Incluye
lmpara UV 254 nm o 360 nm.

Observamos las manchas a diferentes grados y las marcamos para

tener registro de ellas, a continuacin roseamos la placa de
cromatografa con hidrxido de potasio para llevarlo de nuevo hacia la
lmpara y observar el resultado. Finalmente marcamos todas las
manchas observadas y determinamos el Rf de cada una de las
manchas.

Palabras clave: Cumarina, mtodo de anlisis Ruda

graveolens).

(Ruta

2. ABSTRACT
In this practice you can observe and see some of the properties of
coumarins present in the same rough and biological interest and use.
We also saw as coumarins extraction with suitable organic solvent is
chloroform, the product we obtain an extract, a bit is placed in a few
reactive we add to the presence of the remaining extract coumarins
that use the thin layer chromatography.
The identification of coumarins present in samples taken from the
leaves and flowers of rue, by the method of thin layer
chromatography; use as stationary phase silica gel and the mobile
phase comprised toluene and ethyl ether saturated acetic acid this
procedure is held in the bulb there decanting expected to phase
separation and the water is removed that is ending in the bottom
phase obtained once a mobile phase will be placed in the chamber
chromatography and waits until saturate the atmosphere inside it,
while waiting to proceed in plant samples chromatography plate, this
process is repeated until seed 10 times for each of the two samples,
this process is completed once a seeding and being dry samples are
placed on the plate in the chromatography chamber. When removing
the plate from the chromatographic chamber marks the advancement
of mobile phase with a pencil and is expected to dry, then use a
display cabinet programs thin layer chromatograph. Includes UV lamp
254 nm or 360 nm.
Spots observed at different grades and registration mark to have
them, then roseamos chromatography plate with potassium hydroxide
to bring him back to the lamp and observe the result. Finally mark all
the spots observed and determined the Rf of each of the spots.

Key words: Coumarin, analysis method, Rue (Ruta graveolens).

3. INTRODUCCION

La cromatografa es un mtodo fsico o de separacin para la

caracterizacin de mezclas complejas, la cual tiene aplicacin en
todas las ramas de la ciencia y la fsica. Es un conjunto de tcnicas
basadas en el principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es
separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo
identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.
Las tcnicas cromatogrficas1 son muy variadas, pero en todas ellas
hay una fase mvil que consiste en un fluido (gas, lquido o fluido
supercrtico) que arrastra a la muestra a travs de una fase
estacionaria que se trata de un slido o un lquido fijado en un slido.
Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la
fase estacionaria. De este modo, los componentes atraviesan la fase
estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Despus de
que los componentes hayan pasado por la fase estacionaria,
separndose, pasan por undetector que genera una seal que puede
depender de la concentracin y del tipo de compuesto.
Diferencias sutiles en el coeficiente de particin de los compuestos da
como resultado una retencin diferencial sobre la fase estacionaria y
por tanto una separacin efectiva en funcin de los tiempos de
retencin de cada componente de la mezcla.
La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no se
excluyen mutuamente:

Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos ms

puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de
muchas sntesis).
Medir la proporcin de los componentes de la mezcla (finalidad
analtica). En este caso, las cantidades de material empleadas
son pequeas.

Clasificacin de la cromatografa
Tipos
Cromatografa en
papel
Cromatografa en
capa fina
Cromatografa de
gases
Cromatografa
lquida
en fase inversa
Cromatografa

Fase
mvil
Lquido

Fase estacionaria

Lquido

Lquido (molculas de agua

contenidas en la celulosa del papel)
Slido

Gas

Slido o lquido

Lquido
(polar)

Slido o lquido
(menos polar)

Lquido

Slido o lquido

lquida
en fase normal
Cromatografa
lquida
de intercambio
inico
Cromatografa
lquida
de exclusin
Cromatografa
lquida
de absorcin
Cromatografa de
fluidos
supercrticos

(menos
polar)
Lquido
(polar)

(polar)

Lquido

Slido

Lquido

Slido

Lquido

Slido

Slido

Cromatografa en capa fina

La cromatografa en capa fina (CCF), TLC (Thin layer chromatography)
es una tcnica cromatogrfica. La fase estacionaria es una capa
uniforme de un absorbente mantenido sobre una placa, la cual puede
ser de vidrio, aluminio u otro soporte.
En cromatografa en capa fina se utiliza una placa cromatogrfica
inmersa verticalmente en un eluyente apolar; La placa cromatogrfica
consiste en una fase estacionaria polar (comnmente se utiliza slica
gel) adherida a una superficie slida con algn agente cementante. El
eluyente debe ser un compuesto lquido apolar, generalmente
orgnico. Para realizar la CCF, se debe apoyar la placa cromatografica
sobre algn recipiente o cmara que contenga la fase lquida a
aproximadamente 1 cm (la distancia entre el principio de la placa y la
muestra que se desea analizar). la cromatografa en capa fina es la
combinacin de todos los colores en un papel.
Aplicacin de las muestras
Los productos a examinar se disolvern, cuando sea posible, en un
disolvente orgnico que tenga un punto de ebullicin lo
suficientemente bajo para que se evapore despus de la aplicacin, lo
ms comn es usar acetona. Frecuentemente se emplean
disoluciones al 1%, de manera que al aplicar 2 l resulta en la carga
20 g de producto slido. Muchos reactivos de revelado llegan a
detectar 0.1 g de material; por esto con esta carga puede llegarse a
observar un 5% de impurezas.

Existen una gran variedad de micro pipetas y micro jeringuillas para

realizar el proceso de siembra de la muestra a analizar. Tambin
pueden usarse tubos capilares. El proceso de siembra se realiza
tocando con la punta del capilar (micro pipeta, etc.) sobre la placa
preparada. Dejando una distancia al borde inferior de un centmetro
aproximadamente. El punto de aplicacin de la muestra se denomina
toque.
Una vez colocado el toque se deja secar para evaporar el disolvente,
de forma que en la placa solo quedar la muestra a analizar.
Desarrollo de la cromatografia
El desarrollo de los cromatogramas en capa fina se realiza
normalmente por el mtodo ascendente, esto es, al permitir que un
eluyente ascienda por una placa casi en vertical, por la accin de
la capilaridad. La cromatografa se realiza en una cubeta. Para
conseguir la mxima saturacin posible de la atmsfera de la cmara,
las paredes se impregnan del eluyente.
Generalmente el eluyente se introduce en la cmara una hora antes
del desarrollo, para permitir la saturacin de la atmsfera. El tiempo
de desarrollo, por lo general, no llega a los 30 minutos. El tiempo de
una cromatografa cualitativa suele ser de un par de minutos,
mientras que el tiempo de una cromatografa preparativa puede
llegar a un par de horas.
Las placas pueden desarrollarse durante un tiempo prefijado, o hasta
que se alcance una lnea dibujada a una distancia fija desde el origen.
Esto se hace para estandarizar los valores de RF. Frecuentemente
esta distancia es de 10 cm.; parece ser la ms conveniente para
medir valores de RF. Despus del desarrollo, las placas pueden
secarse rpidamente con una corriente de aire caliente.
La mejor posicin de desarrollo para un componente es el punto
medio entre el origen y el frente del eluyente, ya que permite separar
las impurezas que se desplazan con mayor y menor velocidad. El
frente del eluyente nunca debe llegar a tocar el borde de la placa.
Localizacin de las sustancias
Si los compuestos separados no son coloreados es necesario revelar
la posicin de dichos compuestos, para ello existen dos tipos de
mtodos:
Mtodos qumicos. Mtodos fsicos.

Mtodos fsicos. El ms comn consiste en aadir al adsorbente un

indicador fluorescente. De tal forma que al colocar la placa bajo una
lmpara ultravioleta, y dependiendo del indicador y de la longitud de
onda, aparecen manchas fluorescentes en las zonas en las que hay
componentes, o en otros casos aparece toda la placa fluorescente
excepto donde hay componentes.
Algunos compuestos poseen cierta fluorescencia (aunque no es
normal) con lo que pueden ser detectados directamente en una
lmpara de ultravioleta.
Constantes de Rf y R x
La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de
expresar la posicin de un compuesto sobre una placa como una
fraccin decimal, mide la retencin de un componente. Se define
como: RF= Distancia de la muestra desde el origen/Distancia del
eluyente desde el origen
La distancia recorrida por el compuesto se mide generalmente desde
el centro de la mancha, los clculos se simplifican si el denominador
es 10. Para que los RF sean reproducibles deben ser fijadas una serie
de condiciones (Espesor de la placa, fase mvil, fase estacionaria,
cantidad de muestra). El mximo valor de RF que se puede alcanzar
es de 1, lo ideal es un RF entre 0.55 y 0.7.
Para averiguar si dos compuestos son iguales, se colocan ambos
sobre la misma placa y se desarrolla con varios eluyentes. Una vez
desarrollados se calculan los RF y si son distintos, puede deducirse
con toda seguridad que no se trataba del mismo compuesto. Por el
contrario si los RF son iguales los compuestos pueden ser iguales o no
serlo.
Si se sospecha que dos compuestos son muy parecidos se eluyen
sobre la misma placa con el mismo eluyente u otros de menor
polaridad, hasta apreciar una separacin mnima. En este caso no se
pueden usar reveladores qumicos, ya que alteraran los compuestos,
sino indIcador ultravioleta.
Tambin se puede operar de la manera siguiente: Se selecciona un
compuesto (X), que tenga una posicin de desarrollo conveniente;

todos los dems compuestos sobre la placa se relacionan con ste.

De esta manera se tiene el, RX , ya que: Rx= Distancia recorrida por
el compuesto de referencia(X)/Distancia recorrida por el eluyente.

Cumarinas

La cumarina Nmero CAS 91-64-5 es un compuesto qumico que

posee el esqueleto de un anillo bencnico unido a un solo oxgeno.
Deriva de un fenilpropanoide al que se le delecionaron dos carbonos
de la cadena propnica. Es biosintetizada por las plantas por la va del
cido shikmico, a partir de fenilalanina.
Serie qumica

Las cumarinas se consideran todo un grupo demetabolitos

secundarios de las plantas fenlicos, que comparten la misma va
biosinttica y esqueleto qumico.
En plantas, se encuentran en los tegumentos de las semillas, frutos,
flores, races, hojas, y tallos, aunque la mayor concentracin se
encuentra en general en frutos y flores. Originalmente la cumarina se
aisl de la Haba de Tonka. Su rol en las plantas parece ser de defensa,
dndole propiedades de rechazo a la alimentacin (en
ingls antifeedant), antimicrobiana, captadora de radiacin UV e
inhibidora de la germinacin.
La mejor propiedad conocida de las cumarinas indirectamente
demuestra su rol en la defensa de las plantas. La ingesta de
cumarinas de plantas como el trbol puede causar hemorragias
internas en mamferos. Este descubrimiento llev al desarrollo del

raticida Warfarin (R) y el uso de compuestos relacionados para tratar

y prevenir la apopleja.

warfarina (RS)-4-hidroxi-3- (1-fenil-3-oxo-butil)-cumarina.

El compuesto
ribonucleico.

8-metoxipsoraleno,

contiene

cido

desoxido

Una forma comparable de dermatitis inducida por cumarina puede

ocurrir durante la manipulacin del apio.
El Psoralen es ahora usado exitosamente en varios desrdenes de la
piel (eccemas, psoriasis) a travs de una combinacin de ingesta oral
con exposicin a radiacin UV-A.
En la familia de las cumarinas encontramos furanocumarinas lineales
como el psolareno, furanocumarinas angulares como la angelicina,
piranocumarinas como el seselin en ingls, y cumarinas pironasustituidas.
La cumarina como sustancia de consumo:
La cumarina es moderadamente txica para el hgado y los riones,
con una dosis letal 50 (LD50) de 275 mg/kg. La Occupational Safety
and Health Administration considera a la cumarina como un
compuesto carcinognico especfico del pulmn.1
La cumarina es una sustancia que incrementa la adiccin del
consumidor a los cigarrillos. El compuesto fue prohibido para su uso
como aditivo en cigarrillos en 1997, y est listado por la FDA (EE. UU.)
Entre las sustancias cuya adicin directa para uso en productos con
destino al consumo por humanos est prohibida.

Ruda (Ruta graveolens)

Descripcin

Es un arbusto muy ramificado que puede vivir varios aos, debido a

esta longevidad el tallo puede volverse
leoso. Alcanza alturas de entre 70 a
100 cm. Las hojas semi-perennes, de
color verde glauco, son alternas
compuestas por varios segmentos de
los cuales los laterales son alargados y
el terminal ovalado o blanquecino, de
consistencia algo carnosa. Las flores,
forman ramilletes y tienen entre cuatro
y cinco ptalos, siendo de un color
amarillo vivo. El fruto es una especie de cpsula con cinco lbulos. La
planta entera tiene un aroma caracterstico difcil de confundir con
otros. El sabor de las hojas es ligeramente picante pero ste queda
enmascarado por el intenso aroma que despide.
Composicin Qumica y Propiedades Medicinales
La ruda posee distintos tipos de principios activos. De ellos, destacan
dos: un aceite esencial y un glucsido flavnico. Tambin posee
vitamina C. De los dos primeros, derivan sus cualidades teraputicas
ms reputadas.
El aceite esencial est compuesto principalmente por dos cetonas que
constituyen cerca del 90% de l: metilheptilcetona y metilhonilcetona
(Schauemberg, 1972; Thompson, 1981; Font Quer, 1982; Valnet,
1984).
El glucsido flavnico es la rutina, que por hidrlisis puede
degradarse en quercitina, como la genina o aglucona y las gluconas,
glucosa y ramnosa (Font Quer, 1982).
A la esencia, se le puede atribuir propiedades antiespasmdicas,
emenagogas, antiparasitarias y rubefacientes.
A la flavona, es posible asignarle la propiedad hemosttica que posee
esta planta, por aumento de la resistencia capilar, funcin que se ve
apoyada por la presencia de la vitamina C.
La ruda es conocida por su uso para calmar las molestias digestivas
que se originan en los intestinos irritables y en los gases. Tambin
tiene reputacin para ayudar a regular y provocar la menstruacin.

El uso de la ruda para combatir la sarna ha cobrado mucha

importancia debido a la frecuencia del mal y a la efectividad de esta
planta para tratarla. Por ltimo, se usa para ayudar a calmar las
hemorragias
internas
y
de
las
heridas.
Uso de la Ruda
Infusin: (Para las molestias digestivas y de menstruacin). Se pone
agua hervida caliente sobre tres a cinco hojas. Se deja reposar y se
bebe caliente. Puede endulzarse con miel.
Cocimiento: (Para la sarna). Se pone a hervir un puado grande de
ruda en un litro de agua durante 15 minutos. Se aplica en todo el
cuerpo desde el mentn hasta los pies y despus se coloca la pomada
Fitotoxicidad
Aunque sirve para repeler insectos, cuando se
aplica la ruda en la piel se puede producir un
efecto fotoirritante en algunos casos. Contiene
varios aceites esenciales y alcaloides que
pueden causar extrema sensibilidad a los rayos
ultravioletas, con la aparicin de ampollas y
lesiones en la piel.

OBJETIVOS
Reconocer las cumarinas en la Ruta graveolens Ruda.
Aprender el proceso de extraccin de cumarinas.
Mejorar nuestra tcnica de cromatografa.
Ampliar nuestros conocimientos sobre la cromatografa en
capa fina.
Elaborar una fase mvil con tolueno y ter etlico.
Determinar por medio de la cromatografa la presencia de
cumarina en nuestras muestras.
Determinar el Rf (Ratio of Front) de varias sustancias.

4. MATERIALES Y REACTIVOS
-

Micropipeta de 10 ml
Erlenmeyers de 250 ml
Papel filtro
Pipetas volumtricas de
5, 10, 25 ml
Vaso beaker
Pera de decantacin

Frasco mbar
Pipetas
Papel filtro
Balanza analtica
Tubos de ensayo
5 gr de vegetal de la ruda
(hojas, flores y semillas)

Alcohol etanol
Acetato de plomo al 5 %
Agua destilada
cido actico al 10%
Cloroformo
Hidrxido de amino
Sulfato de sodio
Soportes
Balones volumtricos
Vasos de precipitado
Cpsulas de porcelana
Campana de desecacin
Mortero y piln,
Placa de cromatografa

Capilares
Cmara de cromatografa
Lmpara UV
Muestras de extracto de
hojas y flores de ruda

EQUIPOS:
Agitador magntico
Balanza analtica
Bao termosttico
Desecador o Campa
Rotaevaporador
Estufa

5. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
-

Pesar 5 gramos de las hojas verdes frescas del vegetal en este

caso es la ruda, luego de pesar las hojas colocarlo en un
matraz aadirle 100 ml de etanol, el alcohol hierve a una
temperatura de 80C luego someter todo esto a reflujo por lo
menos 20 minutos.

Cuando colocamos a reflujo observamos que la mezcla tiene

una coloracin verde claro tener el sistema de reflujo, tener
cuidado y estar a fuego leve no tan elevado, desde cuando
empieza a hervir se toma el tiempo hasta que pase el tiempo
determinado, cada vez la muestra se vuelve un color ms
intenso .

Figura N1: Pesar 5 gr de ruda y someterla al

sistema en reflujo

Teniendo sacar la muestra:

Tener doblado el papel filtro en la forma adecuada en forma de

paraguas para poder filtrar. Filtrar el extracto obtener un primer
filtrado e eso aadir acetato de plomo al 5 % en solucin
alcohlica la parte solvente (arriba) de 1 a 3 ml con esto para
eliminar taninos, aplicamos un exceso de 1ml adicional para
luego agitar vigorosamente luego dejamos que se forme un
precipitado.

Filtrar nuevamente obtendremos un segundo filtrado y lo que

nos queda en el papel filtro son los
taninos, el liquido
transparente obtenido eliminar a sequedad dentro de la
campana.

Figu
a N2: filtrado
despus del
reflujo.
-

Ya lo
obtenido en el
vaso
vamos a
adicionar 50 ml de agua destilada y luego aadir acidificar 5ml
de acido actico al 10%. Colocar el contenido en una pera de
decantacin.
-

Luego extraer tres veces con 10 ml de cloroformo:

1) La primera lavada nos da un verde pardo caf oscuro. Aadir
un poco de sulfato de sodio para eliminar el agua
2) La segunda lavada nos da un color verde oscuro.
3) La tercera lavada ya nos da muy poco de un color verde
intenso.
-

Figura
N3:
Separacin de
fases y
agregacin de
sulfato de
sodio.
-

Recibir todo en el vaso para luego colocar todo lo extrado en un

frasco de color mbar. Para los resultados necesitamos tres
tubos de ensayo.
1. Tubo la mitad de la solucin aadir 1 ml de cloruro frrico al
5 %.
2. Tubo 0.5 ml de la solucin aadir 1 ml de hidrxido de
amonio.

Guardar el resto para la cromatografa de capa fina.

Primero en una cromatografa de capa fina se procede a cortar

la placa de cromatografa, estamos utilizando una placa con
base de aluminio as q podremos cortarla y consecutivamente
medimos un centmetro desde la base de la placa haciendo una
lnea paralela, con cuidado de no desprender la fase
estacionaria.

Figura N4: Proceso de cortar placas de cromatografa

Una vez hecha las medidas y separados los espacios de las

cuatro muestras (primera muestra: extracto de hojas de ruda;
segunda muestra: extracto de las flores de ruda.) se procede
con el sembrado, cada una de las muestras sern colocada
cuidadosamente y en cantidades aproximadamente iguales con
ayuda de los capilares.

Figura N5: Sembrado de los extractos de hojas y semillas de

la ruda.
Se repite el sembrado de las muestras hasta diez veces por
cada una de las muestras procurando tener un sembrado
homogneo de todas las muestras de la placa de cromatografa,
una vez realizado el sembrado se espera unos minutos a que
seque, para posteriormente pasar a la cmara de
cromatografa.

La cmara de cromatografa contiene en su interior 5 ml. De

un eluyente. Solventes no polares y medianamente polares
respectivamente. Se coloca en forma vertical inclinada hacia las
paredes y con las muestras sumergidas en el solvente.

Figura N6: Separacin de fases y uso de cmara de

cromatografa

Se retira la placa despus de unos minutos o hasta que se

alcance una lnea dibujada a una distancia fija desde el
origen. Terminado esto se procede a la localizacin de las
muestras por medio del mtodo fsico. Para ello utilizamos un
gabinete de visualizacin de cromatgramas de capa fina.
Incluye lmpara UV 254 nm o 360 nm.

Figura N7: Presencia de cumarinas en distintos Rf y en

distintos nanmetros de la lmpara UV.

Se hecha a la placa de cromatografa por medio de un aspersor,

hidrxido de potasio y se le lleva de nuevo hacia la lmpara UV
254 nm o 360 nm y el resultado es el que se aprecia en las
imgenes. Por ultimo procedemos a marcar las con un lpiz
cada una de las manchas que se aprecian en la placa de
cromatografa.

Figura N8: El uso de un sellador para intensificar la presencia

de cumarinas.

6. RESULTADOS Y DISCUSION
-

Las cumarinas tienen diferentes aplicaciones farmacolgicas las

principales se destaca la de anticoagulante, en esta prctica
aprendimos de conocer ms de ellas tambin observamos
cmo es la extraccin de cumarinas esta prctica se realiz en
dos etapas:

Una primera etapa en esta consisti la extraccin de la ruda en

el sistema de reflujo. La cual optimiza nuestro trabajo ya que el
solvente en esta en contacto con nuestra muestra y hace
posible una mejor extraccin de los principios activos en este
caso de las cumarinas.
En una segunda etapa el extracto lo sometimos al rotavapor
se concentr para la identificacin de cumarinas y para su
prximo anlisis mediante la cromatografa de capa fina.
-

Para los resultados necesitamos tres tubos de ensayo.

1 Tubo la mitad de la solucin aadir 1 ml de cloruro frrico
al 5%. Observamos la coloracin y nos da un verde
pardo. ( fig.1)
2 Tubo 0.5 ml de la solucin aadir 1 ml de hidrxido de
amonio.
- Observamos una coloracin de verde claro (fig. 1)

Figura N9: resultado

presencia de cumarinas.

de la

Figura N10:

En el filtrado obtuvimos
taninos.

Al finalizar nuestra practica nos hemos dado cuenta de que son

abundantes las manchas que se pueden apreciar en nuestra
placa de cromatografa despus de que hemos marcado cada
una de estas manchas utilizamos la formula del Rf para la
identificacin de cada una de estas manchas y axial poder
saber de que compuesto se trata valindonos de una escala
que nos proporciono el doctor encargado de dirigir esta
practica.

Tenemos dos distintas muestras una de hojas de la ruda y otra

de las flores de la misma.

La constante RF (Ratio of Front) es simplemente una manera de

expresar la posicin de un compuesto sobre una placa como
una fraccin decimal, mide la retencin de un componente. Se
define como:

RF= Distancia de la muestra desde el origen/Distancia del

eluyente desde el origen.

Hojas de la ruda

RF1= 0.8/8.2= 0.1

RF2= 1.5/8.2= 0.18 - dafnetina

RF3= 2.2/8.2= 0.26 - -fagarine

RF4= 2.8/8.2= 0.34 - escopoletina

RF5= 3.2/8.2= 0.39 - umbeliferona

RF6= 3.7/8.2= 0.45 - umbeliferona

RF7=

RF8= 4.4/8.2= 0.53 - xantotoxina prueba

4/8.2= 0.48 - xantotoxina prueba

RF9= 4.8/8.2= 0.58

RF10= 5.2/8.2= 0.63

superponen

RF11= 5.6/8.2= 0.68

RF12= 5.7/8.2= 0.7

0.55-0.85

RF13= 6.9/8.2= 0.84

rutamarin, isoimperatorin)

RF14= 7.2/8.2= 0.87

en partes se
las zonas del
alcance de los RF
(psoraleno, bergapteno,

RF15= 7.7/8.2= 0.93 dimetil-alil herniarin

RF16= 8.2/8.2= 1

Flores y capsulas de la ruda

RF1= 2.5/8.2= 0.3 - escopoletina

RF2= 3.1/8.2= 0.37 - kokusaginin

RF3= 3.4/8.2= 0.41 - umbeliferona

RF4= 3.7/8.2= 0.45 - umbeliferona

RF5=
5/8.2= 0.6
superponen

en partes se

RF6= 5.3/8.2= 0.64

0.85

alcance de los RF 0.55-

RF7= 6.4/8.2= 0.78

isoimperatorin)

RF8= 6.9/8.2= 0.84

(psoraleno, bergapteno, rutamarin,

RF9= 7.3/8.2= 0.9 - dimetil-alil herniarin

RF10= 7.7/8.2= 0.93 - dimetil-alil herniarin

RF11= 7.8/8.2= 0.95

RF12= 8.1/8.2= 0.98

7. CONCLUSIONES
-

Se reconoci la presencia de cumarinas (principio activo) en la

ruda (ruta graveolens).
Se optimizo nuestro trabajo en cromatografa de capa fina para
poder realzar este proceso, desde la preparacin de la fase
mvil hasta la identificacin de los principios activos de la
muestra.
-

8. BIBLIOGRAFIA
-

a. http://www.google.com.pe/webhp?hl=es&tab=ii
-

b. http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa Pg. 1.
-

c. 1 Tcnicas analticas de separacin. Miguel Valcrcel Cases.

Editorial Reverte, 1994. ISBN: 8429179844. Cap. 12:
Introduccin a la cromatografa. Pg.333
-

d. http://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf
%C3%ADa_en_capa_fina Pg. 2 hasta la Pg. 4.
-

e. http://es.wikipedia.org/wiki/Cumarina
Pg. 5, 6.
f. http://es.wikipedia.org/wiki/Cumarina
-

g. http://www.elergonomista.com/fitoterapia/cumarinas.htm
-