REPORTE PRÁCTICA 7: ENZIMAS

Nombre de estudiantes: Amanda Ortiz Quesada - Katherine Vargas

Nota obtenida:

Valor total 40 puntos

A. Detección de peroxidasa: complete el siguiente cuadro (4 puntos).

Cuadro 1. Descripción de la reacción de la actividad enzimática de la papa en

presencia de dos tratamientos.
Tratamiento Solución Resultados

1 Sin hervir H2O2 Cambio a coloración anaranjada

intensa-marrón

2 Sin hervir H2O Ligera tinción anaranjada, casi

transparente

3 Hervido H2O2 No hay cambio notorio (mismo

color)

4 Hervido H2O No hay cambio notorio (mismo

color)

Responda:
¿Cuál(es) tratamiento(s) cambió(aron) de color? ¿Por qué? Justifique (2
puntos).
El tratamiento que cambia de color es el no hervido que contiene agua oxigenada.
Lo anterior, porque el guayacol tiñe la sustancia ante la presencia de O2 (caso del
H2O2, agua oxigenada); mientras que el agua tiene muy poca concentración del
mismo como para causar un positivo.

¿Cuál(es) tratamiento(s) no cambió(aron) de color? ¿Por qué? Justifique (2

puntos).
En ninguno de los casos hervidos cambian de color. Tanto agua como agua
oxigenada, no sufren alteraciones pues el calor al que fue expuesta la muestra
previamente desnaturaliza la enzima peroxidasa.

B. Especificidad de las enzimas: complete el siguiente cuadro (6 puntos).

Cuadro 2. Descripción de la reacción de los diferentes tipos de sustratos (positiva,

negativa) y enzimas en los diferentes reactivos (Biuret y Lugol).

Sustrato Albúmina Almidón 5%

 Enzima BIURET LUGOL

Bromelina 1 Positiva 4 Negativo

Amilasa 2 Negativa 5 Positiva

Agua 3 Negativa 6 Negativa

Responda:
¿En cuáles tratamientos hubo reacción, cambiaron de color? ¿Por qué?
Justifique. (2 puntos).
En el tratamiento de albúmina junto con bromelina hubo un cambio de color.
Además, se presentó reacción en el tratamiento de almidón al 5% junto con amilasa.
Esto ya que tanto la bromelina como la amilasa, son enzimas hidrolasas que
catalizan las reacciones. En el caso de la bromelina es específica de las proteínas,
que se encuentran en la albúmina (clara de huevo), por eso se genera una reacción
que degrada la proteína de polímeros a monómeros. La amilasa funciona de forma
similar, pero es específica del almidón. Ambos tratamientos interactúan con su
respectivo reactivo, y muestran una tinción ya que las reacciones fueron positivas.

¿En cuáles tratamientos no hubo reacción? ¿Por qué? Justifique. (2 puntos).

No se presentó reacción en los tratamientos de albúmina-amilasa y
almidón-bromelina. Esto porque cada enzima es específica, y dichas interacciones
no cumplían con las disposiciones mencionadas anteriormente para que pudieran
reaccionar y degradar a la sustancia. Además, no se presentó reacción en ningún
tratamiento que incluyera agua, porque este únicamente funcionaba como control.

C. Efecto de la concentración del sustrato en la actividad enzimática:

complete el siguiente cuadro (8 puntos).

Cuadro 3. Descripción de la velocidad reacción del almidón, en diferentes

concentraciones en el tiempo.
Tratamiento Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

(0% almidón) (1% almidón) (3% almidón) (7% almidón)

Tiempo para Lento Lento Medio Rápido

cambio de
color
 Observaciones Muy translúcido Poco translúcido Opaco Muy opaco

Responda:
¿En cuáles tratamientos la reacción fue más rápida, y en cuáles demoró más
tiempo? ¿Por qué? Justifique (2 puntos).
Entre mayor fue la concentración, más rápida fue la reacción y se pudo apreciar con
mayor facilidad. Esto se debe al efecto de la concentración de la sustancia, ya que
al aumentar la concentración del sustrato el sistema se satura y todas las enzimas
disponibles van a estar funcionando. Lo anterior genera un aumento en la cinética
de reacción, porque el intercambio de producto y sustrato se ve acelerado.
Concentraciones más bajas presentarán una mayor dificultad en el proceso, lo que
se traduce en un mayor tiempo de reacción.

D. Efecto de la temperatura en la actividad enzimática: complete el siguiente

cuadro (8 puntos).

Cuadro 4. Descripción de reacción del almidón en presencia de hidrolasa a

diferentes temperaturas.
Tratamiento* Observaciones

Tubo 1 (hervir) Se pierde el color del lugol y no hay mayor cambio en cuanto a

translucidez.

Tubo 2 (Baño María) Se pierde el color del lugol y aparenta más transparencia que

antes del tratamiento.

Tubo 3 (refrigeración) Se pierde el color del lugol y sus cualidades en cuanto a

transparencia prevalecen.

Tubo 4 (temperatura Se pierde el color del lugol y aparenta más transparencia que

ambiente –control) antes del tratamiento.

*Los cuatro tubos contienen 4 cc de solución de almidón al 5%, dos gotas del
reactivo de Lugol y 0,25 cc de amilasa al 10%.
Responda:
¿En cuáles tubos la reacción fue más rápida? ¿Por qué? Justifique (2 puntos).
En los tubos con temperatura óptima (Baño María) y temperatura ambiente, sobre
todo en el primero de los casos. Lo anterior, considerando que 37ºC es la
temperatura de reacción óptima del lugol. Así, las condiciones de reacción son las
más “convencionales” y la enzima puede reaccionar como suele hacerlo.

¿En cuáles tratamientos la reacción fue más lenta o no hubo reacción? ¿Por
qué? Justifique (2 puntos).
Primeramente, en el tratamiento hervido. Al superar los 42ºC para pasar por dicho
procedimiento, la enzima se desnaturaliza y ya no habrá reacción alguna. Asimismo,
en el tratamiento expuesto a refrigeración. Lo mismo se debe a que se acerca la
temperatura a la unidad mínima para que la enzima reaccione, es decir, 15ºC. Si el
tubo con la solución está demasiado frío no habrá reacción aparente o no
inmediatamente al añadir el lugol.