Transporte de proteínas

Transporte de
proteínas
 Transporte de proteínas
Cuatro preguntas fundamentales

1. ¿Cuál es la naturaleza de la secuencia de orientación (péptido señal)?

2. ¿Cuál es el receptor para cada péptido señal?
3. ¿Cuál es la estructura del canal de translocación que permite la
transferencia de proteínas a través de la membrana? En
en particular, es el canal tan estrecho que las proteínas pueden
pasar a través de el solo en un estado desplegado, o podrán pasar
dominios de la proteína plegada?
4. ¿Cuál es la fuente de energía que impulsa la transferencia a
través de la membrana?
Transporte de
Proteínas al Retículo
Endoplásmico Rugoso
 Retículo Endoplásmico Rugoso (RER)
• Complejo de membranas
• Continuidad con envoltura nuclear
• Contiene dominios diferenciales (Rugoso y
Liso)
• Parte integral del sistema de endomembranas
y la vía secretora:
Rugoso  Aparato de Golgi  Vesículas
Retículo Endoplásmico Rugoso
(RER)
• Síntesis de proteínas
– Solubles
– De organelos
– Ruta Vesicular (Secreción)
– Lisosomales
– Transmembranales

Funciones del Retículo

Endoplásmico Rugoso
(RER)
Algunas proteínas entran al lumen del
RER
Péptido Señal
El péptido señal esta compuesta por a.a. hidrofóbicos
Translocación Co-translacional

hidrofóbico
Proteínas de membrana
Proteínas de membrana Tipo I
Proteínas de membrana
Proteínas de membrana Tipo II y III

las secuencias de señal de anclaje determinan la orientación de la

proteína debido a una alta densidad de aminoácidos cargados
positivamente que permanecen en el lado citosólico de la
membrana, en lugar de atravesar la membrana hacia el ER
lumen
Proteínas de membrana
Proteínas de membrana
Proteínas de
membrana
Tipo IV Glucose transporters (GLUT)
Ion channel proteins

G-coupled Receptors

Si una proteína tipo IV tiene un número par de hélices α

transmembranales, su extremo N-terminal
y C-terminal se orientará hacia el mismo lado de la
Membrana.
Si una proteína tipo IV tiene un número impar de hélices α,
sus dos extremos tendrán orientaciones opuestas
Tipo I

Tipo II
Tipo IV
Proteínas de membrana
GPI: Glicosilfosfatidilinositol
Proteínas de membrana y proteínas
solubles sintetizadas en el RER

Cuatro modificaciones principales antes de llegar a su destino final:

(1) adición covalente y procesamiento de carbohidratos (glicosilación) en la

RER y Complejo de Golgi
(2) formación de enlaces di-sulfuro en la RER
(3) plegamiento apropiado de cadenas polipeptídicas (estructura primaria,
secundaria y terciaria) y ensamblaje de subunidades proteicas (estructura
cuaternaria)
(4) Clivaje proteolítico
 Glicosilación
De acuerdo con el tipo de glicosilación:
• RE: N-glicosilación (N- Acetil glucosamina sobre el
grupo amino de Asparagina)
• Golgi: O-Glicosilación (N-Acetil galactosamina sobre el
grupo OH de Serina o Treonina)

Función:
• Reconocimiento entre células
• Ayuda al plegamiento
• Guía de la proteína al organelo de destino
• Empaquetamiento de proteínas en vesículas
• Resistencia a la acción de proteasas
 N-glicosilación

Glc3Man9(GlcNAc)2
• Tres glucosas (Glc)
• Nueve manosas (Man)
• Dos N-acetilglucosaminas (GlcNAc)
El precursor completo de 14 residuos se transfiere del Dolicol
a un residuo de asparagina en un polipéptido a medida que
emerge dentro del RER
• Aparentemente los tres residuos de glucosa sirven para señalar que el
oligosacárido está completo y listo para ser transferido a una proteína.

• Inmediatamente después de Glc3Man9 (GlcNAc)2 se transfiere a un

polipéptido naciente, enzimas glicosidasas, eliminan los tres residuos de
glucosa y un residuo de manosa.
 Funciones de los oligosacáridos unidos a las
glicoproteínas
Ayuda a la proteína a plegarse correctamente
Una mutación de una asparagina particular en la
secuencia de hemaglutinina a un residuo de
glutamina impide la adición de un N-
oligosacárido y hace que la proteína se acumule
en el ER en un estado desplegado.

La fibronectina glicosilada, un componente

normal de la matriz extracelular, se degrada
más lentamente que la fibronectina no
glicosilada.
Funciones de los oligosacáridos unidos a las
glicoproteínas
Adhesión célula - célula

Moléculas de adhesión celular (CAM) ubicadas en la membrana plasmática

de glóbulos blancos (leucocitos) están extensamente glicosiladas.
Los oligosacáridos en estas moléculas interactúan con otras CAM que se
encuentran en células endoteliales de los vasos sanguíneos.

Esta interacción ata los leucocitos al endotelio ayuda en su movimiento en los

tejidos durante una respuesta inflamatoria a la infección

Otras glicoproteínas de la superficie celular pueden inducir una respuesta

inmune. Un ejemplo común son los antígenos del grupo sanguíneo ABO.
 Enlaces di-sulfuro

• Estos solo se forman en el lumen del RER

• Por lo tanto, los enlaces disulfuro se encuentran

solo en proteínas secretoras solubles y en los
dominios exoplasmáticos de proteínas de
membrana.

• Proteínas citosólicas y proteínas de orgánelos

sintetizadas en ribosomas libres (es decir,
aquellos destinados a mitocondrias, cloroplastos,
peroxisomas, etc.) por lo general carecen de
enlaces disulfuro.
Enlaces di-sulfuro
• En proteínas que contienen
más de un enlace di-sulfuro el
emparejamiento adecuado
de residuos de cisteína es
esencial para la estructura.
• Los enlaces di-sulfuro son
formados entre cisteínas que
ocurren secuencialmente en
la proteína naciente.
• Tal formación secuencial, sin
embargo, a veces produce
enlaces disulfuro errados
 Chaperonas facilitan el plegamiento y
ensamblaje de proteínas en RER

• BiP puede unirse transitoriamente a cadenas polipeptídicas nacientes

• BiP impide que la cadena naciente se pliegue incorrectamente o forme agregados.
• PDI también contribuye al plegado adecuado estabilizando la proteína mediante los
enlaces disulfuro
 Chaperonas facilitan el plegamiento y
ensamblaje de proteínas en RER

• calnexina y calreticulina, se unen selectivamente a ciertos N-oligosacáridos en cadenas polipeptídicas en

crecimiento.
• Estas enzimas actúan solo en cadenas polipeptídicas que están mal plegadas
• Proteínas no plegadas correctamente a menudo exponen segmentos hidrofóbicos que en un estado
correctamente plegado está oculto en el núcleo hidrofóbico de la proteína
• Por lo tanto, calnexina, calreticulina y BiP, ayudan a evitar el plegado prematuro e incorrecto de
segmentos de una proteína recién sintetizada
Proteínas de membrana y proteínas solubles
que estén mal plegadas son descompuestas y
degradadas
 Transporte
transmembranal
 Péptido señal
Matriz mitocondrial

Secuencias ubicadas en el extremo N-terminal, son generalmente

20-50 aminoácidos en longitud.
Ricas en aminoácidos hidrofóbicos, aminoácidos básicos cargados
positivamente (arginina y lisina) y aminoácidos hidroxilados
(serina y treonina)
 Las secuencia péptido señal es
reconocidas por Tom20 y Tom22.
Tom = translocon of external membrane

Si la proteína tiene como destino final la

matriz mitocondrial, la transferencia a
través de la membrana externa se
produce simultáneamente con la
transferencia a través de un canal de
membrana interna compuesto por las
proteínas Tim23 y Tim17.
Tim Tom = translocon of internal
membrane

Tránsito de proteína de Matriz

mitocondrial
Tránsito de proteína de Matriz
mitocondrial
Solo proteínas en cadena sencilla
pueden transportarse
Proteína citosolica

Hsp70 gasta energía en

mantener a las proteínas
precursoras unidas en un
estado desplegado para
que puedan ser
trasladadas a la matriz.
Hsp70 en la matriz
• anclada a la membrana por la proteína
Tim44,
• Actúa como un motor que deja salir la
proteína a la matriz
• Las funciones de Hsp70 y Tim44 son
análogas BiP y Sec63 en la translocación
postraduccional en el lumen del RER
Tránsito de proteína de Membrana
mitocondrial interna
A. Parecido a transporte de proteínas
integrales tipo I al RER
Tránsito de proteína de matriz mitocondrial y
membrana mitocondrial interna
Tránsito de proteína de espacio
intermembranal
Tránsito de proteína de Membrana
mitocondrial externa
Tránsito de proteína de Membrana
mitocondrial externa
Transporte
vesicular
 Peroxisomas
• Presentan solo una membrana y no contienen ADN ni ribosomas
• Tienen enzimas que usan oxigeno molecular para oxidar diversos
sustratos y formar peróxido de hidrogeno H2O2
• RH2 + 02 R+ H2O2 (Peroxidación)
• La catalasa convierte el H2O2 en H2O
• R´H2+ H2O2  R + 2H2O
• 2H2O2  2H2O + 02
• En los peroxisomas se rompen las moléculas de ácidos grasos por
β-oxidación para formar Acetyl-CoA
• Los peroxisomas exportan Acetyl CoA al citoplasma para
biosíntesis
• Catalizan la formación de plasmilógenos y fosfolípidos de mielina
PTS1: targeting sequence 1

Ser-Lys-Leu (SKL)

A diferencia de la mayoría de los sistemas, el

transporte de proteínas a peroxisomas,
puede translocar proteínas plegadas a través
de la membrana.
El síndrome de Zellweger o síndrome cerebro-hepato-renal:
• enfermedad metabólica hereditaria
• deficiencia en la biogénesis de los peroxisomas
• trastorno en el funcionamiento neurológico
• hipotonía profunda,
• convulsiones neonatales
• dificultad para alimentarse
• retraso en el desarrollo psicomotor
• Suele presentarse con malformaciones en cara y cráneo
• hepatomegalia y fibrosis hepática, quistes en los riñones
• anormalidades en la sustancia blanca del cerebro
 Transporte
Regulado
dependiente de
poro nuclear
 nuclear pore complex (NPC)

Un NPC esta compuesto de mas de 30 proteínas

diferentes denominadas nucleoporinas.
 FG-nucleoporinas:

• recubren el canal nuclear

• contienen múltiples repeticiones de
secuencias hidrofóbicas cortas ricas
en residuos de fenilalanina (F) y glicina (G)
(repeticiones FG).
• El resto de la cadenas es hidrófilica

Las FG-nucleoporinas forman una

matriz flexible tipo gel que permiten
difusión de moléculas pequeñas
NLS: nuclear localization signal
En la region C-terminal: Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val.

Las proteínas entran al núcleo en un

estado plegado
La proteína nuclear/receptor se une
transitoriamente a las FG-repeticiones,
atravesando el canal central.

Proteínas de tamaño similar que no están

unidas a su receptor, no pueden atravesar el
canal central.
nuclear-export signal (NES)
Diferencias en los mecanismos de
Transporte