Universidad de Concepción

UNIDAD IV: ESTERILIZACIÓN DEL

PREPARADO FARMACÉUTICO
Proceso de Esterilización y Área Biolimpia

TECNOLOGÍA FARMACÉUTICA I
VALENTINA VALDÉS SILVA
vvaldes2018@udec.cl
 Tecnología Farmacéutica I
S1-2022

ESTERILIZACIÓN DE PREPARADOS FARMACÉUTICOS

Una muestra se considera estéril solo cuando presenta ausencia total de microorganismos viables
(bacterias, levaduras y hongos filamentosos). Sin embargo, la esterilidad se define por términos
probabilísticos que establecen un nivel aceptable de riesgo. La esterilidad se logra mediante el uso
de un proceso de esterilización validado, en conformidad con las buenas prácticas de fabricación.
La esterilidad es un término absoluto, es poco probable que se declare un lote 100% estéril.
Fuentes de contaminación de un preparado farmacéutico:

Materias Ambiente
Vehículo Equipos Envases Personal
primas de trabajo

Los objetivos que se persiguen al eliminar un microorganismo desde una forma farmacéutica son:
(1) evitar la transmisión de enfermedades/deterioro del paciente y (2) aumentar la estabilidad de la
forma farmacéutica. Así, se logra un producto estéril, que es aquel que ha sido sometido a
esterilización y en el cual hay una ausencia “total” de microorganismos viables.
La forma farmacéutica debe protegerse para evitar entonces el desarrollo de microorganismos, lo
cual se logra destruyendo o eliminando los microorganismos. El método de esterilización que se
elige no debe causar cambios en el producto y debe servir para esterilizar en etapas intermedias del
proceso y/o en el producto final.
Métodos de esterilización:

Métodos Métodos
físicos químicos

Calor Filtración Radiación Gases Líquidos

Seco Ionizante

No
Húmedo
ionizante
Condicionados por la naturaleza del fármaco y la forma farmacéutica.

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CINÉTICA DE MUERTE BACTERIANA

La cinética de crecimiento microbiano, al
igual que al cinética de muerte microbiana,
es de tipo exponencial, es decir, nunca se
llega a 0. Si es una velocidad de primer
orden, esta dependerá de la concentración
de microorganismos presentes: mientras
más microorganismos hay, más tiempo se
necesita para decir que un lote es estéril, es
decir, se necesita más tiempo para
esterilziar o alcanzar la desinfección casi
total. Si graficamos el logC en función del
tiempo, se linealiza y de la pendiente se
obtiene la constante de velocidad de muerte microbiana. Hay un lenguaje asociado a la muerte
microbiana y tiempos en los cuales reducir una determinada carga. Un ejemplo es D, el tiempo
decimal, el cual es posible calcularlo cuando se conoce la constante de velocidad de muerte
microbiana. Corresponde al tiempo en el que se reduce un 90% de la carga microbiana inicial.
Ejemplo: Se tienen 100.000 unidades de bacteria/mL y un ritmo de destrucción de 90%min, en 5
minutos de esterilización se tendrá la siguiente sobrevida:

Carga microbiana Tiempo (minutos)

100.000 0
10.000 1
1.000 2
100 3
10 4
1 5
0,1 6
0,01 7
Sobrevida bacteriana
INDICADORES BIOLÓGICOS, FÍSICOS Y QUÍMICOS DE ESTERILIDAD
Indicadores biológicos: son un mecanismo para realizar el control de calidad de los productos
farmacéuticos. Estos indicadores son esporas bacterianas altamente resistentes, se encuentran
presentes en mayor cantidad y son más resistentes que la contaminación habitual del producto a
esterilizar. Existen en el mercado variedades útiles para evaluar un determinado método de
esterilización.
Método de esterilización Especie bacteriana
Calor húmedo B. stearothermophilus
Calor seco B. subtilis
Óxido de etileno B. subtilis (B. atrophaeus USP40)*
Radiación B. pumilus, B. stearothermophilus, B. subtilis
*No se sabe si son ambas o la que está en parénstesis.

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Se tendrán esporas de especies bacterianas determinadas para realizar un control, el cual permite
ver si se alcanzaron las condiciones de esterilización al hacer una siembra luego del proceso. Las
normas exigen el control de los procesos.
Indicadores físicos: son todos los sistemas de registro de las condiciones de proceso, suelen ir
aparatos adosados a los equipos de esterilización, tales como termómetros, manómetros, etc. Como
desventajas, tenemos que requieren programa de calibración y miden condiciones generales (en un
solo punto).
Indicadores químicos: son materiales inertes que se agregan a cada paquete a esterilizar, tales como
cintas testigo, etiquetas, estampillas, etc. Se pueden utilizar compuestos con un punto de fusión
determinado que funden cuando se alcanza una cierta temperatura dentro del equipo.
ESTERILIZACIÓN FÍSICA POR CALOR
Este método es el más utilizado porque no deja residuos, comparado a utilizar agentes químicos
porque se debe evaluar que no queden residuos o contaminación en el producto final. Además, es
fácil de controlar y bajo costo (comparado con otros métodos). Todo esto lo hace ser efectivo.
La efectividad de este método depende de las condiciones en las cuales es realizado:
ü Temperatura
ü Tiempo de exposición
ü Humedad presente
Definiciones importantes:

Punto de muerte Tiempo de muerte Coeficiente de

térmica térmica temperatura Q10

•Temperatura más baja a •Es el periodo de tiempo •Es el aumento de la

la cual se mata una más corto para matar una velocidad de muerte
población de bacterias en población de bacterias y microbiana por cada 10°
10 minutos esporas a temperatura de aumento de la
constante. temperatura. Medida del
cambio de la constante de
inactivación con la
temperatura. Puede
expresarse como el
cociente entre dos
constantes a temperatura
que difieren en 10°C.
Calor húmedo: cuando hay presencia de humedad, el intercambio de calor es mucho mayor que en
la ausenica de humedad porque el vapor de agua tiene mayor capacidad térmica, la condensación
va acompañada de la liberación de calor latente.
Esto quiere decir que cuando el vapor de agua entra en contacto con un cuerpo que se va a
esterilizar, se condensa en ese punto, lo que libera un calor latente equivalente a 540cal/°C.
Además, esta condensación generará un pequeño vacío, lo que llamará a más vapor para que se una

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en ese punto. Es la liberación de este calor latente lo que hace, por ejemplo, que las quemaduras
con vapor de agua sean peores que por contacto con un objeto caliente. Esto permite que el proceso
sea más eficiente porque con una temperatura más baja (comparado a la ausencia de humedad),
puedo esterilizar un preparado.
El calor húmedo es el autoclave, donde se tiene una presión al interior de 1atm, lo que hace que la
temperatura de ebullición sea de 121°C, por ende, de acuerdo a todas las farmacopeas, las
condiciones de esterilización por calor húmedo son:

15-20min de
121°C 1atm
exposición
Además, los libros recomiendan prolongar el tiempo de exposición con un ±50% de los 15min
porque es un tiempo breve y se debe considerar el tiempo necesario para alcanzar las condiciones,
ya que una vez se alcanzan, comienza a correr el tiempo de esterilización. El mecanismo de acción
es la coagulación de proteínas celulares, el mecanismo de destrucción de los microorganismos.
Manejar un autoclave es riesgoso, porque son equipos que desde la toma de corriente deben estar
muy bien regulados. Desde el año 2014 se debe acreditar a la persona como manipulador de
autoclave o calderas (Decreto N°10/2012: “Reglamento de Calderas, Autoclaves y equipos que usan
vapor”).

Se debe disponer del material en una rejilla perforada, existiendo dos autoclaves: (1) doble camisa,
es por donde ingresa el vapor que desplaza el aire para alcanzar la presión requerida y (2) simples,
se debe poner agua para generar el vapor. Todo el aire debe ser reemplazado por vapor para que
entre en contacto con el producto y libere el calor latente. Es importante que el material entre en
contacto con el vapor de agua, es un método útil para esterilizar materiales porosos, algodón en
papel kraft, vestimenta quirúrgica, soluciones acuosas termoestables (vidrio es un buen conductor).

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Existen distintas fases en el autoclavado:

•Aumento de temperatura.
Fase de •Aumento de presión.
calentamiento (lag) •Renovación del aire al interior del autoclave.

•Exposición a temperatura y presión determinadas.

Fase de •Tiempo de esterilización (Bacillus stearothermophilus).
esterilización •Generalmente se adiciona un "tiempo de seguridad".

•Vuelta a la temperatura ambiente y presión

Fase de atmosférica.

enfriamiento •Crítica para mantener la funcionalidad e integridad del

envase usado.

Ventajas:
ü Efectivo y económico.
ü De elección para fluidos acuosos termoestables (ampolla de suero fisiológico, por ejemplo).
ü Destrucción de bacterias y esporas en corto tiempo.
Inconvenientes:
ü No puede ser usado en fluidos no acuosos (ampolla con aceite).
ü No asegura la eliminación de pirógenos (restos celulares en su mayoría que inducen la fiebre
en pacientes cuando se inyecta el preparado).
ü Corrosivo en instrumentos metálicos.
ü Cuidar la temperatura durante la transferencia entre el autoclave y zonas a temperatura
ambiente (explosiones).
Usos:
ü Productos líquidos acuosos.
ü Materiales porosos: algodones.
ü Materiales de plástico: polipropileno, polietileno (altamente resistentes).
ü Material de vidrio.
Controles:
ü Sensores de T°: sondas calibradas a ± 0,1°C.
ü Sensores de presión: error inferior al 5%.
ü Bioindicadores (Bacillus stearothermophilus): reducción < 10-6 carga microbiana.
ü Indicadores químicos (tiras reactivas), sustancia (punto de fusión 121°C).

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Calor seco: es de elección para materiales termoresistentes (superior a los 121°C, 150-300°C)
sensibles a la humedad (polvo, material oleoso), es un método ampliamente utilizado para la
esterilización de vidrio (ampollas, viales, etc.). Puede ser utilizado en formas farmacéuticas que
contengan aceites, parafinas, glicerol y polvos. El mecanismo de acción es por un proceso de
oxidación y deshidratación. El de oxidación requiere de temperatura más alta y tiempos de
exposición más prolongados.

Ventajas Desventajas
• Uso fácil, rápido, económico, no deja • Menos eficiente que el calor húmedo.
residuos. • Requiere de ciclos de esterilización
• Poca probabilidad de daño del largos.
instrumental resistente al calor.
• Permite despirogenizar los productos.
• Equipos e instalaciones sencillas.
Dentro del equipamiento, tenemos la estufa u horno de calor seco, la transferencia de calor es por
convección, es decir, es aire calienter el que circula a través de la estufa y va calentando el material.
El indicador biológico es Bacillus subtilis. Los ciclos se diseñan excediendo el tiempo y la
temperatura mínimos, para asegurar la esterilidad y despirogenización.
Condiciones:
ü Temperatura variable: 150-300°C (puede llegar incluso a 500°C dependiendo de la
sustancia).
ü Tiempo del ciclo variable: 120-30min.
ü Condición clásica: 180°C por 2h, pero no se eliminan pirógenos.
Fases:

Fase de secado

Entrada de aire a través de filtros HEPA, luego el aire sale al exterior.

Fase de calentamiento (lag)

El aire al interior se calienta mediante resistencias y recircula.

Fase de esterilización

Exposición a la temperatura requerida.

Fase de enfriamiento

Minimiza el shock térmico a la salida del sistema y aumenta la seguridad durante la manipulación.

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Finalmente hay túneles de esterilización que permiten operan continuamente y son mantenidos a
temperaturas elevadas (250-300°C). Pueden procesar mayores cantidades de material que las
estufas de aire, mantienen una línea continua de esterilización y con ciclos más cortos.
Existen tres tipos de túneles:
1. Túnel de convección forzada
2. Túnel infrarrojo
3. Túnel de flameado
Controles:
ü Sistemas de filtración: integridad.
ü Sensores de temperatura.
ü Velocidad del aire (túneles de esterilización).
ü Control de partículas.
ü Bioindicador: Bacillus subtilis var. Niger (reducción microbiana de al menos 6 unidades
logarítmicas).
ESTERILIZACIÓN FÍSICA POR RADIACIÓN
Es importante recordar que tenemos radiaciones particuladas y electromagnéticas, dentro de las
particuladas, los rayos b o electrones acelerados son considerados como una radiación esterilizante,
y dentro de las electromagnéticas, los rayos g y UV son considerados como radiación esterilizante.
Los rayos b y g son radiaciones ionizantes, en cambio la UV carece de esta propiedad.
Radiación ultravioleta: es importante considerar que cuando la radiación UV incide sobre el
microorganismo, actuará a nivel de los ácidos nucleicos (ADN o ARN), generando nuevos enlaces
nucleotídicos que pueden impedir la replicación y la capacidad de infectar. Cuando hablamos de
radiación UV estamos hablando de una l = 253,7nm, una longitud de onda emitida por lámparas de
mercurio.
Se aplica para la reducción de carga microbiana en:
ü Aire
ü Agua (solo superficie)
ü Superficie de procesamiento de productos farmacéuticos
Desventajas:
ü Bajo poder de penetración.
ü Efecto letal solo sobre microorganismos expuestos en forma directa.
ü Alteración de principios activos (absorción de la radiación).
ü Riesgo de proliferación del microorganismos (reparación del ADN).
Dentro de los equipos tenemos las lámparas de vapor de mercurio, las cuales emiten radiación a
253,7nm, la longitud de onda cercana al pico de absorción del ADN. Se encuentran en las cabinas
de flujo laminar, que permite manipular productos de todo tipo para reducir al máximo la carga
microbiana y hacer una fabricación aséptica.

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La intensidad recomendada de la radiación UV es de 20µW/cm2 y con respecto al tiempo de

exposición, en general es de 20min, ya que es el tiempo necesario para reducir las esporas de B.
subtilis y de 5min para Staphilococcus hemolyticus (es más sensible a esta radiación).
Precauciones:
ü Lámpara debe mantenerse siempre en buen estado para obtener máximo efecto germicida.
ü Reemplazar cuando emisión disminuye a un 30-50 %.
ü Personal debe protegerse de la radiación directa o reflejada.
Radiación ionizante: comprenden las partículas b (o electrones acelerados) y los rayos g. Como son
radiaciones ionizantes, el mecanismo de acción es mucho más potente, hay una interacción directa
con electrones del ADN, produciendo ionización, acción germicida e inhibiendo la replicación
celular. Aplicaciones:
ü De elección para principios activos termolábiles: ciertos polvos, antibióticos, hormonas,
esteroides, algunos ungüentos oftálmicos, algunas gotas oftálmicas, algunos preparados
inyectables, etc.
ü Equipamiento médico que no soporta esterilización térmica: jeringas, agujas, catéteres,
prótesis, suturas, etc.
Ventajas:
ü Sólo produce un ligero aumento de temperatura (no más de 3°C).
ü Proceso fácil de controlar (dosis).
ü Acoplable a sistemas de producción continua.
Inconvenientes:
ü Puede afectar vidrio y algunos plásticos (cambios de color y fragilidad).
ü Alto costo de producción e instalaciones complejas.
ü No destruye pirógenos.

Actualmente es más usada la radiación g, ya que la fuente de radiación es más resistente, tiene
un alto poder de penetración y los materiales no resultan radioactivos.
Los equipos comprenden 3 elementos fundamentales:

ü Fuente de radiación de rayos g o electrones acelerados

Ø Rayos g: Co60 o Cs137.
Ø Partículas β: Acelerador de electrones.
ü Sistema de seguridad por actividad elevada.
ü Sistema de movimiento de materiales.
La dosis recibida por el producto dependerá de:
1. La fuente de radiación.
2. El tiempo de exposición.
3. El poder de penetración.
4. La carga microbiana.

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Se considera que una dosis de kGy (2,5MRad) es adecuada para asegurar la esterilidad.
Indicadores de estabilidad:
ü Indicadores fisicoquímicos: dosímetros (cambian de color al recibir la radiación).
ü Indicadores biológicos: Bacilus pumilus.
ESTERILZACIÓN FÍSICA POR FILTRACIÓN
Es una operación farmacéutica en la cual se separan las partículas sólidas del fluido dónde están
contenidas al hacerlas pasar a través de un material poroso llamado filtro. Los microorganismos no
son inactivados, sino apartados del fluido (esterilización).
El filtro de esterilización se
define como un filtro que
USP 40: cuando se valida
apropiadamente, eliminará
capítulo 1211 todos los microorganismos de
una corriente de fluido,
produciendo una corriente de
efluente estéril.
Aplicaciones:
ü Esterilización de formas farmacéuticas líquidas que contienen principios activos
termolábiles que no se pueden esterilizar por radiación.
ü Filtración de aire para zonas de procesos asépticos.
No es un proceso de esterilización para productos terminados, porque se filtra y se recibe en otro
envase el filtrado. Si el envase que lo recibe no está estéril, se contamina nuevamente el producto
y es riesgoso aplicar un proceso de esterilización intermedio, pero cuando no hay otra opción, debe
hacerse con la precaución de que todas las etapas posteriores a la filtración sean en condiciones
asépticas o mínima intervención humana.
Los equipos comprenden una matriz porosa sobre
una estructura rígida, como se ve en la imagen. Los
filtros de profundidad son un entramado de fibras
y la partícula debe ser capaz de atravesar todo el
entramado para pasar junto con el filtrado, en
cambio los filtros de membrana tienen poros de
diámetro conocido, por ende, el filtro retiene todas
las partículas sea superior al poro (menor riesgo de
contaminación del filtrado, debe ser de elección).
Los factores que afectan la filtración comprenden:
ü Cantidad total de gérmenes.
ü Área suficiente de filtración.
ü Colocación de filtro.
ü Diámetro de poro.
ü Tiempo y presión de filtración.

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Filtros en profundidad: están compuestos de materiales como vidrio fritado, porcelana o materiales
fibrosos. El mecanismo es la adsorción por fuerzas electrostáticas o captación en la matriz del filtro.
La eficacia no depende del tamaño de poro, sino de la tortuosidad de los canales. Como desventaja
tiene bajo nivel de flujo, dificultad para limpiar y desprendimiento de fibras.
Dada la composición de estos filtros, son reutilizables, por ende se tiene que idear un proceso
posterior para sacar el material particulado o microorganismos que hayan quedado atrapados en la
red y debe someterse a procesos de lavado con soluciones fuertemente ácidas, lo que podría
generar el desprendimiento de fibras. Es debido a esto que no es de elección para esterilizar y se
usa para prefiltración (retener material particulado) o eliminación de partículas groseras para luego
pasar al filtro de membrana y no deformar el poro.
Filtros de membrana: son estructura poliméricas, rígidas y delgadas con tamaño de poro
perfectamente definido. Es el método de elección para esterilización por filtración. Pueden actuar
por tamizado o atracción electrostática. Se tienen a la forma de discos o cilindros plegados
(cartuchos, mayor superficie de filtración). El tamaño de poro apropiado de este filtro, para ser
considerado esterilizante, es inferior a 0,45µm (con 0,22µm se retiene a la Pseudomona diminuta y
con 0,10µm se retiene a micoplasma, aunque es difícil de filtrar).
Si bien son membranas delgadas, son altamente resistentes y pueden ser
esterilizados en autoclave o con óxido de etileno. En general están
compuestos por diversos derivados y dependerá de la naturaleza de lo
que se quiere filtrar, pueden ser:
ü Ésteres de celulosa (acetato, nitrato).
ü Polifluoruro de vinilideno (PVDF).
ü Teflón (PTFE).
ü Nylon o poliamida.
ü Policloruro de vinilo (PVC).
Es importante considerar que se pueden elegir filtros según:
ü Tipo de fluido:
Ø Gases
Ø Soluciones acuosas
Ø Soluciones oleosas
ü Tipo de contaminante esperado:
Ø Tamaño del poro
ü Volumen a filtrar
ESTERILIZACIÓN QUÍMICA
Óxido de etileno: es el único descrito como esterilizante en la USP, es un gas a temperatura
ambiente y líquido bajo los 12°C. Penetra rápidamente materiales porosos o productos en polvos
(era el método de elección). Deja residuos (mutagénico) en el producto, por lo tanto, e elimina por
exposición al aire filtrado.

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Actúa por alquilación de moléculas nucleofílicas: ADN, ARN (adenina, guanina), enzimas, cofactores
enzimáticos (ácido fólico, piridoxal, PABA) que contienen grupos -OH, NH2 y -COOH. Tiene marcada
actividad antiviral y antibacteriana, pero los hongos y levaduras son relativamente resistentes.
Aplicaciones:
ü Materiales plásticos y acero inoxidable.
ü Artículos de goma.
ü Instrumental médico.
ü Productos farmacéuticos compatibles con el gas (no soluciones).

Ventajas Desventajas
Alterna(va a la esterilización Ciclos de esterilización
por calor (ú(l para materiales complejos.
en polvo termolábiles).
Elevada toxicidad del óxido de
etileno (mutagénico).
Instalaciones más sencillas y
de menor costo que
esterilización por radiación. Inflamable y explosivo.

El óxido de etileno no se utiliza solo, sino que en mezclas esterilizantes de óxido de etileno y gases
inertes tales como CO2, N2 o freón. La actividad depende de:
ü Concentración del gas.
ü Temperatura.
ü Contenido de agua del microrganismo.
ü Estado del microorganismo (vegetativo o esporulado).
ü Tiempo de exposición.
ü Naturaleza del material a esterilizar.
Aquí si es importante el porcentaje de humedad en la cámara y debe ser elevado para que sea más
activo. Hay muchas condiciones de mezclas esterilizantes que se pueden encontrar en bibliografía,
un ejemplo de ella es 450mg/L, 30% humedad, 15°C y 6 horas.
Indicadores de esterilidad:
ü Fisicoquímicos: tiras o discos que indican contacto.
ü Biológicos: Bacillus subtilis var. Niger.

b-propiolactona: es un líquido no inflamablea temperatura ambiente. Agente alquilante de acción

bactericida. Se usa para la esterilización de superficies grandes donde se podrían efectuar procesos
en determinadas áreas biolimpias.

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Condiciones efectivas:
ü Concentraciones de vapor entre 2-4 mg/L.
ü Temperatura no menor a 24°C.
ü Humedad relativa ≥70%.
ü Tiempo >2 horas.
Peróxido de hidrógeno: podría vaporizarse y tener un efecto esterilizante. Es útil en el transporte
de material previamente esterilizado a cámaras aisladas y en líneas de llenado (áreas limpias). Una
alta humedad inhibe su acción esterilizante.
ÁREA BIOLIMPIA
También conocida como área de contaminación controlada, zona limpia, área aséptica, sala limpia
o sala blanca, es un área libre de pelusas, polvo y microorganismos, los que pueden interferir con la
esterilidad de un producto. Según las GMP es el “área con control ambiental definido de partículas
y contaminación microbiana, construida y usada tal que se reduzca la introducción, generación y
retención de contaminantes dentro del área”.
Estas salas comenzaron a usarse en el área hospitalaria y microelectrónica, donde la presencia de
partículas o microorganismos puede ser fundamental en el proceso o desarrollo del rubro. Sean
cuales sean las condiciones exteriores y el proceso de producción que se realice en su interior, se
mantienen dentro de estrechos límites de tolerancia los siguientes parámetros:
ü Número y dimensiones de partículas en el aire.
ü Temperatura y distribución de la misma.
ü Flujo de aire: velocidad y dirección, así como su distribución en la sala.
ü Presión interior del aire y su distribución.
ü Geometría y acabados interiores.
ü Iluminación.
ü Protección contra incendios.
ü Protección electrostática.
Para obtener un área biolimpia, primero se debe sanitizar el área, reduciendo la contaminación
microbiana a los límites permitidos (niveles muy bajos). Para ello, primero hay que remover la
suciedad y luego destruir y eliminar microorganismos con agentes sanitizantes. Estos
microorganismos pueden venir el aire exterior, de las personas que circulan en el área, materiales,
instrumentos, etc. Los factores que se deben considerar son:
1. Conocer los microorganismos del área.
2. Verificar la efectividad del agente.
3. Sanitizar.

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Factores a considerar para una buena sanitización:

Agente sanitizante
Presencia de pH óptimo del
(alternar para
materia orgánica sanitizante
evitar resistencia)

Tipo de
Concentración del Vehículo del
microorganismo
agente sanitizante agente sanitizante
en el área

Forma de
Tiempo de
aplicación del
contacto
agente saniHzante
Agentes sanitizantes:
ü Hipoclorito de sodio (ataca metales).
ü Glutaraldehído 2%.
ü Alcohol 70% (etanol y/o IPA).
ü Amonios cuaternarios (cloruro de benzalconio 400 ppm).
ü Ácido peracético al 5%.
ü Peróxido de hidrogeno 0,5%.
ü Yodo y yodóforos.
Más desinfectante y combinaciones en el Registro Sanitario ISP.
La sanitización se realiza de acuerdo a un programa escrito, debe monitorizarse para detectar
contaminación o algún microorganismo resistente al procedimiento, usarse más de un tipo de
sanitizante (alternados) e incluirse un agente esporicida. Las salas A y B (áreas biolimpias como tal)
deben esterilizarse antes de su uso.
¿Cómo mantener el área biolimpia?
ü Perfectamente aislado del medio circundante.
ü Cierres herméticos de puertas y ventanas.
ü Buena iluminación.
ü Acceso regulado por pre-áreas (limpieza de personal y materiales).
ü Se deben satisfacer los siguientes requisitos de diseño:
Ø Fácil de sanitizar.
Ø Capacidad para mantener el ambiente estéril.

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¿Cómo se logra la sanitización fácil?

ü Paredes y cielos lisos y continuos (que no hayan espacios entre cerámicos, por ejemplo),
recubiertos material resistente corrosión (epoxi, plástico, poliéster, chapa metálica
inoxidable, lacados al horno).
ü Suelos lisos, continuos y sin junturas, de materiales plásticos, epoxi o poliéster. Con barrera
de humedad y vapor.
ü Mesas de acero inoxidable empotradas a la pared.
ü Puertas dobles, lisas y estancas (deberían cerrarse por sí solas).
ü Junturas de paredes, paredes-piso y paredes-cielo deben ser redondeadas.
ü Paredes sin ventanas o con cierre hermético.
ü Iluminación empotrada y enrasadas en el cielo, y totalmente estancas.
¿Cómo se logra la mantención del ambiente estéril? Considerando que tenemos los siguientes
contaminantes principales:
a. Aire exterior
b. Personas
c. Materiales y equipos
Aire:
1. Aire filtrado estéril a presión positiva: consiste en que la sala está con una sobre-presión
de 0,0029atm, la cual no es muy notoria. Cuando se abre una puerta, se expulsa el aire
desde dentro hacia afuera, no habiendo oportunidad de que el aire del exterior ingrese al
área biolimpia. Este aire se saca del aire exterior, pero es pasado
por una serie de equipos que lo filtran y humidifican para que se
pueda obtener el aire limpio para la sala. Hay una serie de pre-
áreas que sirven para descontaminar el aire a medida que se va
acercando al área biolimpia.
Tanto la temperatura como la humedad están controladas, la
presión es positiva, debe haber una sanitización periódica de los
ductos de aire (se deben limpiar porque vienen con el aire
exterior), se usa luz UV y esclusas.
Las esclusas (imagen derecha) son espacios
cerrados con dos o más puertas, que se interpone
entre dos o más ambientes, por ejemplo, de
diferente clasificación de limpieza, con el propósito
de controlar el flujo de aire entre estos ambientes cuando se necesita ingresar a ellas.
Están diseñadas tanto para el uso de personas como de insumos y/o equipamiento. Hay
dos salas que se conectan por medio de una esclusa, cuando se abre una puerta, se deja
el material, se cierra la esclusa y por el otro lado, otra persona abre la puerta, recibe el
material y vuelve a cerrar la esclusa, porque las puertas no se pueden abrir al mismo
tiempo, ya que esto permitiría el flujo libre de aire.

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Por otro lado, tenemos el filtro HEPA (High Efficiency

Particulate Air), que tiene una eficiencia del 99,99% para
partículas de 0,3µm. Este es por uno de los filtros que pasa el
aire exterior para ser limpiado. También se tienen los filtros
ULPA (Ultra Low Particulate Air), los cuales tienen una mayor
eficiencia para partículas mucho más pequeñas (99,9995%
para partículas de 0,12µm).
2. Flujo laminar: corriente de aire previamente filtrado
por filtros HEPA, cuya masa total se desplaza en masas paralelas a velocidad constante
(velocidad homogénea del aire de 0,36-0,54m/s) y sin turbulencias, obteniéndose un flujo
paralelo que generalmente se siente como una brisa pequeña de aire (casi imperceptible).
Esto hace un barrido mecánico por el aire, descontaminándolo.
a. Pieza con flujo laminar: el flujo laminar vertical sirve para maquinarias, operarios y
zona de envasado. El aire baja y es recolectado en el piso, volviendo a circular, se
filtra, baja nuevamente y sigue circulando. Esto permite evitar la contaminación
cruzada.
b. Gabinete o cámara de flujo laminar: implementar una pieza con flujo laminar es
complejo, ya que debe cumplir con de una serie de requisitos, y como opción se
tiene este equipo de dimensiones reducidas que son construidas para operaciones
críticas donde no se justifica la instalación de un flujo laminar. Se puede tener:
I. Flujo laminar horizontal: para evitar la contaminación del producto, ya que
el aire sale hacia el operario y evita que entre aire o la misma contaminación
del operario hacia el producto.
II. Flujo laminar vertical: el aire es empujado hacia abajo, de tal modo que, en
el caso de materiales tóxicos o infecciosos, el aire no salga hacia el operario,
tampoco se contamina el producto.
Se debe tener precaución con las turbulencias por el movimiento que se produce por flujo de aire
en contacto con objetos o manipulación (movimientos mecánicos y humanos), perdiéndose de
cierta forma la efectividad del flujo laminar.
3. Lámparas UV: se utilizan a 253,7nm y 265nm, como precauciones se debe considerar el
trayecto de radiación, la circulación de aire y evitar el contacto con el personal.
Personal: en primer lugar, el personal que estará en el área biolimpia debe cumplir con las normas
GMP, debe haber un mínimo de personal durante el funcionamiento, el cual debe ser prolijo,
ordenado, confiable y capacitado. El uniforme o la vestimenta debe ser:
ü Tejidos lisos.
ü Sin pliegues ni bolsillos ajustable.
ü Calzado liso y antideslizante.
ü Adecuada para cada proceso (dependiendo de la clasificación de cada área).

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S1-2022

Clase de sala Monos de Prenda de Calzado Batas Manos

limpia una pieza cabeza
1 Sí Capucha Cubrebotas No Sin polvo ni
integral y largos pelusa
mascarilla
10 Sí Capucha Cubrebotas No Sin polvo ni
integral y largos pelusa
mascarilla
100 Sí Capucha Cubrebotas No Sin polvo ni
A integral y largos pelusa
mascarilla si
es necesario
1.000 Sí o bata Capucha o Cubrebotas Sí o mono de Sin polvo ni
redecilla largos una pieza pelusa
10.000 Sí o bata Sombrero o Cubrebotas o Sí o mono de Según se
B gorra cubrezapatos una pieza requiera
100.000 No es Sombrero o Cubrezapatos Sí Según se
C necesario gorra requiera
Uniforme o vestimenta
Según lo estipulado en la Norma General Técnica N°25 del ISP, una persona que pertenece al
personal no debe ingresar al área si presenta:
ü Lesiones en la piel.
ü Heridas expuestas.
ü Afecciones del tracto respiratorio.
ü Alergia.
ü Infecciones gastrointestinales.
ü Enfermedades transmisibles.
ü Enfermedades nerviosas.
Ya sea para proteger al operario o al producto.
Materias primas y envases: las materias primas con riesgo de contaminación generalmente son el
agua y materias primas de origen natural. Generalmente, se puede hacer pasar el agua por procesos
que la limpien y algunas materias primas se pueden esterilizando.
ÁREAS ASÉPTICAS
El área aséptica para la producción de productos farmacéuticos estériles o preparados
asépticamente es clasificada de acuerdo a las características requeridas del aire:
ü Según el ISP, en 4 grados: A, B, C y D.
ü Según ISO, en clases del 1-9.
ü Según USP, en clase 1, 10, 100 … 100.000.
Según el ISP, encontramos el Anexo 2 de las BPM para productos farmacéuticos estériles, donde
tenemos lo que se observa en la siguiente tabla:

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Zonas Sala de pesadas, fabricación y Grado A: área biolimpia (filtros HEPA,

flujo laminar).
envasado primario.
críticas Grado B: área de entorno a la de grado
A.

Zonas Pasillos, esclusas, vestuario de Grado C y D: área limpia (filtro

bacteriológico, flujo turbulento)
acceso a zonas críticas, sala de
semi- lavado y preparación de
críticas materiales
Clasificación ISO de partículas en el aire ambiental (USP 32):

Equivalencias:

ü ISO clase 5 » clase 100 » grado A y B.

ü ISO clase 7 » clase 10.000 » grado C.
ü ISO clase 8 » clase 100.000 » grado D.
¿Cómo se controla el área biolimpia? Hay tres métodos:
1. Impactación: se realiza un muestreo con aire forzado de distintos lugares. Se toma aire en
una placa que se divide por 4, donde se absorbe el aire en cada división y luego se incuban
los microorganismos que proliferan para realizar el recuento.
2. Filtración: es por un medio de cultivo que se deja por 25min en distintos lugares del área
biolimpia, luego se incuban los microorganismos que proliferan para realizar el recuento.
3. Sedimentación: en este caso son los filtros que se usan para limpiar los que se incuban en
medio de cultivo para luego hacer el recuento.

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