INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL
Práctica “Separación de fosfolípidos por cromatografía
en capa fina”
Franco Peña Magnolia y Flores Duarte Joshua

INTRODUCCIÓN
Los lípidos biológicos constituyen un grupo
químicamente diverso de compuestos cuya
característica común y definitoria en su
insolubilidad en agua las funciones lógicas de
los lípidos son tan diversos como su química.
En muchos organismos, las grasas y los aceites
son las formas principales de almacenamiento
energético mientras que los fosfolípidos y los
esteroides constituyen los principales
Tabla 1. Resultados de molibdato
elementos estructurales de las membranas
biológicas.
La técnica de cromatografía trata de un método
físico de separación de 2 o más solutos
presentes en una mezcla basada en la
velocidad de desplazamiento de los mismos. En
ella participan 2 fases: una móvil (líquida o
gaseosa) y otra estacionaria (sólida o líquida).
La cromatografía en capa fina (TCL) se utiliza
Tabla 2. Resultados de bismuto
para separar mezclas de iones inorgánicos,
moléculas orgánicas y compuestos biorgánicos
tales como pigmentos, lípidos, aminoácidos,
nucleótidos y azúcares.
OBJETIVOS
1. Aplicar la técnica de cromatografía en
capa fina para la separación de los
fosfolípidos de la yema de huevo

2. Discutir las ventajas de la técnica de

separación respecto a las cromatografía
en papel
RESULTADOS
Imagen 1. Cromatogramas obtenidos
Tabla 3. Resultados de ninhidrina
Tabla 4. Resultados de yodo
Tabla 5. Fosfolípidos reportados en huevo
DISCUSIÓN
Con esta técnica, a medida que el disolvente
asciende gracias a la aplicación con el capilar
sobre la placa, arrastra consigo a los lípidos. Y
con la comparación de los Rf de los fosfolípidos
reportados en huevo y los Rf obtenidos por las
distintas placas, identificamos los diferentes
lípidos presentes.
En la placa con Molibdato identifica fosfolípidos
en general y revela las manchas con color azul.
Comparando los Rf de las mancha reveladas: la
mancha 4 y 5 son cercana al fosfaditil colina o
serina por lo que hay presencia de ese
fosfolípido.
En la placa con Bismuto identifica fosfolípidos
con grupo colina con manchas color amarillo-
naranja. Las manchas 2 y 3 tienen rf cercano al
de lisofosfatidil colina, la macha 4 esta cercca al
esfingomielina, la mancha 5 esta cercana al
fosfaditil colina o serina que son fosfolípidos
que contienen colina en su estructura.
La placa con Ninhdrina revela fosfolípidos que
contienen grupo amino con manchas de color
violeta. La mancha 1 identifica presencia de
lisofosfatidil colina y la mancha 4, Fosfatidil de
colina o serina.
Y finalmente la placa con cristales de Yodo
revela lípidos que tengan dobles enlaces en su
molécula con manchas de color café. Los
lípidos encontrados fueron la mancha 3 donde
se identifico lisofosfatidil colina, con la mancha
4 esfingomielina y la mancha 5 esta cercana
tanto a esfingomielina como a fosfatidil colina o
serina.
CONCLUSIÓN
Se aplicó la técnica de cromatografía en capa
fina para la separación de fosfolípidos en
general (Molibdato), fosfolípidos con grupo
colina (Bismuto), fosfolípidos con grupos amino
(ninhidrina) y fosfolípidos con dobles enlaces
(yodo) en la yema de huevo.
La técnica de cromatografía en capa fina nos
ayuda a separar los diferentes fosfolípidos mas
rápido teniendo un contraste mas alto por lo que
identifica más fácil los colores a comparación
con una cromatografía en papel que tarda
mucho más tiempo y los resultados son menos
tenues a simple vista. Sin embargo también
tiene desventajas: los resultados no se
mantienen tanto tiempo y se despintan y hay
que tener mayor cuidado con la silica, no hay
que maltratarla ni moverla ni destaparla una vez
se estén revelando los resultados.
BIBLIOGRAFÍA
Nelson D.L., Cox M.M., “Lehninger Principios de
Bioquímica” Editorial OMEGA, 3ª edición, pp.
377-378, (2001)
Cromatografía en capa fina de lípidos, Isaac T.
f, María del Carmen M. Departamento de
Bioquímica y Biología Molecular, Facultad de
Medicina, Universidad de Córdoba, Avda.
Recuperado de
https://www.uco.es/dptos/bioquimica-
biolmol/pdfs/12%20CROMATOGRAFIA%20DE
%20CAPA%20FINA%20DE%20LIPIDOS.pd
ESTRUCTURA DE LÍPIDOS