Ciclo de Krebs

Ciclo de los ácidos tricarboxílicos

Gloria León. Dr. Sc

 Procedencias del piruvato

Fuente exógena
•  VIA GLICOLITICA (Glucosa, fructosa,
galactosa, manosa)

Fuente endogéna
(glucógeno ó almidón)

Por transaminación
(alanina)
•  AMINOACIDOS
Durante la degradación
(serina, triptofano)
 Destino del piruvato en aerobiosis

•  Ingresa a la mitocondria.

•  Mecanismo simporter interno que

cotransporta un protón.

•  Dentro de la mitocondria se decarboxila

oxidativamente y esterifica a Acetil-CoA.

•  Interviene un complejo multienzimático

 Respiración celular
Una vez en el interior de la mitocondria, el
Piruvato es decarboxilado oxidativamente

glycolysis

Gloria León. Dr. Sc

 Oxidación del Piruvato
La oxidación del piruvato a Ac-CoA es catalizada por el
complejo multienzimático de la piruvato deshidrogenasa
(PDH):

Gloria León. Dr. Sc

Formación de acetil Coenzima A a partir de piruvato

En qué parte de la
célula tiene lugar esta
reacción?

En la matriz mitocondrial

Gloria León. Dr. Sc

Coenzimas del Complejo Piruvato Deshidrogenasa: NAD y FAD

Gloria León. Dr. Sc

 Regulación del complejo Piruvato Deshidrogenasa

PDC: complejo piruvato deshidrogenasa

PDK: piruvato deshidrogenasa kinasa
PDP: piruvato deshidrogenasa fosfatasa

- PDK es inhibida por piruvato: Lo que impide la acumulación de piruvato puesto que inhibe la
fosforilación de PDC y por tanto su inactivación.
- PDK es regulada por la relación acetil-CoA / CoA: Cuando hay un alto nivel de Acetil-CoA,
por ejemplo procedente de la ß-oxidación, la enzima no es necesaria, de manera que el acetil-
CoA promueve la fosforilación e inactivación de PDC.
- PDK es regulada por la relación NADH / NAD+: El ciclo de Krebs no tiene por qué ser
alimentado cuando la concentración de su principal producto, NADH, es alta. Así que el
NADH promueve la fosforilación e inactivación de PDC.
- PDP es inhibida por NADH: Una alta concentración de NADH promueve que PDC se
mantenga fosforilada (inactiva) y que no entre más acetil-CoA en el ciclo.
Gloria León. Dr. Sc
 Regulación del complejo PDH.
•  La reacción del complejo PDH es crucial en el metabolismo
energético puesto que es esencialmente irreversible y supone la
única entrada al metabolismo aerobio. El complejo PDH es regulado
por producto y por modificación covalente.
↓ [ATP] in
PDH phosphatase mitochondria
P
Pi
H2O

PDH PDH
(inactive) (active)

ADP ATP
AMP ATP
CoASH PDH kinase acetyl-CoA
NAD+ NADH
Piruvato deshidrogenasa fosforilada: INACTIVA.
Piruvato deshidrogenasa NO fosforilada: ACTIVA.
Gloria León. Dr. Sc
 Estructura de la Coenzima A

β-Mercaptoetilamina

PRECURSORES Acido pantoténico

3´fosfoadenosinadifosfato

PARTICIPA EN LA TRANSFERENCIA DE GRUPOS ACILO

 Acetil CoA
•  El enlace tíoester formado por la unión del grupo acetilo
a la coenzima A es más inestable que un enlace éster;
por lo tanto, la hidrólisis de un enlace tíoéster es más
exergónico.
NH2

N
N
thioester bond
H H H H H H H CH3 H O- O-
N
N
S C C N C C C N C C C C O P O P O

O
O C H H O H H O OH CH3 H O O
H H
CH3 H H
OH H

Gloria León. Dr. Sc

 1 de octubre 2015

Martes 6 octubre: prueba de Gluconeogénesis

Gloria León. Dr. Sc

 CICLO DE KREBS
•  Serie de 8 reacciones que oxidan una
molécula de Acetil CoA.
•  Generando ATP, NADH y FADH.
•  Aerobiosis.
•  Mitocondria.
•  Vía final común para la oxidación de
HdeC, lípidos y proteínas.

Gloria León. Dr. Sc

Gloria León. Dr. Sc
 Ciclo de Krebs

Acetil CoA + 3 H2O + 3 NAD+ + FAD + ADP + Pi

2 CO2 + 3 NADH + 3 H+ + FADH2 + CoASH + ATP + H2O

El ciclo de Krebs es una ruta anfibólica: participa en procesos

catabólicos y anabólicos.

Gloria León. Dr. Sc

Ciclo de Krebs
Etapas:

1.-Producción de Acetil
Coenzima-A.

2.-Oxidación de la Acetil
Coenzima-A.

3 . - Tr a n s f e r e n c i a d e
electrones y síntesis de
AT P ( f o s f o r i l a c i ó n
Oxidativa).
Gloria León. Dr. Sc
Reacción resumen de la descarboxilación oxidativa del piruvato.

Gloria León. Dr. Sc

Gloria León. Dr. Sc
Ciclo de Krebs:

Por cada molécula

de piruvato que se
oxida en el ciclo se
liberan 3
moléculas de CO2:

Una durante la
formación de
acetil-CoA

Una por la
descarboxilación
del isocitrato

Una por la
descarboxilación
del α-ceto-
glutarato.

Gloria León. Dr. Sc

Gloria León. Dr. Sc
 Ciclo Krebs : Etapa 1
-O
O-
C O
O C CoASH
O
C O
Citrate H2C O
synthase + H+
H3C C S CoA + HO C C
H 2C
H2C O-
C O
Acetyl CoA H2O
-O C O

Oxaloacetate -O

(OAA) Citrate

•  La Citrato Sintasa cataliza la condensación aldólica entre

acetil CoA y oxaloacetato para formar citrato.

Gloria León. Dr. Sc

 Ciclo Krebs : Etapa 2
-O
-O Aconitase -O

C O
C O C O
H2O
H2O H2C O
H2C O
H2C O
CH C
HO C C C C
HO CH O-
H2C O- HC O-
C O
C O C O
H2O -O H2O -O
-O
H2O

Citrate cis-Aconitate Isocitrate

•  La Aconitasa convierte el 3˚ grupo alcohol del citrato en

un alcohol 2º en el isocitrato para facilitar así la oxidación
del grupo hidroxilo en la próxima etapa.

Gloria León. Dr. Sc

 Etapa 2: Citrato a isocitrato (via cis-Aconitasa)

Un OH terciario (alcohol) no puede ser decarboxilado oxidativamente tan fácil como lo

es un alcohol secundario

• Por lo tanto, el citrato debe isomerizarse a

isocitrato.
•  Esto se acompaña por una etapa de
deshidratación seguida de una de hidratación
que da como resultado un intercambio de un H
y un OH.

•  La Aconitasa cataliza ambas etapas.

Gloria León. Dr. Sc

 El Fluoroacetato es un sustrato suicida
Fluoroacetato es un pesticida.
Por sí mismo no es tóxico y se asemeja suficientemente a un
metabolito que es parcialmente metabolizado por la célula
Fluoroacetato es convertido en fluoroacetil CoA

Fluoroacetil CoA es convertido a fluorocitrato por la citrato sintasa

Fluorocitrato no es sustrato deGloria

la aconitasa
León. Dr. Sc y la inhibe.
 Ciclo Krebs : Etapa 3
-O -O -O

C O NADH + H+ C O C O

H2C O H2C O H2C

NAD+ H+
CH C CH C CH2

HO CH O- O C O- O C
C O C O C O
CO2
-O -O -O

Isocitrate Oxalosuccinate α-ketoglutarate (α-kg)

•  La decarboxilación oxidativa del isocitrato es catalizada

por la isocitrato deshidrogenasa. Aquí se genera la
primera molécula de CO2 y NADH del ciclo.

•  α-ketoglutarato puede ser utilizado para síntesis de

aminoácidos (transaminación).

Gloria León. Dr. Sc

 Ciclo Krebs : Etapa 4
-O -O

NADH + H+
C O C O

H2C NAD+ H2C

CH2 CH2

O C C S CoA

C O CoASH CO2 O
-O

α-ketoglutarate (α-kg) Succinyl-CoA

α-ketoglutarato deshidrogenasa cataliza la

decarboxilación oxidativa del α-ketoglutarato.

•  Succinil-CoA tiene un enlace tioéster rico en energía.

Gloria León. Dr. Sc
 Ciclo Krebs : Etapa 5
-O -O

C O C O

H2C H2C

CH2 CH2

-O C
C S CoA
+ GDP GTP
O Pi O

Succinyl-CoA Succinate
ADP ATP

•  Succinil-CoA sintetasa (succinil tiokinasa) cataliza la formación de

succinato a partir de succinil-CoA.

•  En los animales, la energía de la hidrólisis del enlace tioester es usada

para formar GTP.

•  GTP transfiere Pi al ADP para formar ATP (fosforilación a nivel de

sustrato). Gloria León. Dr. Sc
 Ciclo Krebs : Etapa 6
-O -O

C O C O

H 2C HC

CH2 CH
-O C -O C
FAD FADH2
O O

Succinate Fumarate

•  Succinato deshidrogenasa cataliza la formación de

fumarato a partir de succinato.
•  Formación of C=C rinde menos energía que C=O;
por tanto, no es suficiente energía para reducir el.
NAD+. Gloria León. Dr. Sc
 Succinato Deshidrogenasa

•  La Succinato
deshidrogenasa se
encuentra en la membrana
interna de la mitocondria.
• 
•  El resto de las enzimas del
ciclo de Krebs se
encuentran en la matriz *

*Succinate dehydrogenase
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 Ciclo Krebs : Etapa 7
-O -O

C O C O

HC HO CH
Fumarate hydratase
CH CH2
-O C -O C

O
H2O
O

Fumarate Malate

•  La hidratación del fumarato para formar

malato es catalizada por la fumarato
hidratasa.
Gloria León. Dr. Sc
 Ciclo Krebs : Etapa 8

-O -O
NADH + H+
C O C O
NAD+
HO CH O C

CH2 CH2

-O C Malate dehydrogenase -O C

O O

Malate Oxaloacetate (OAA)

•  La oxidación de malato para formar OAA es

catalizada por la malato deshidrogenasa.

•  OAA se utiliza para iniciar una nueva ronda del

ciclo. Gloria León. Dr. Sc
 n

Gloria León. Dr. Sc

 Dos piruvatos atraviesan la espacio
membrana interna mitocondria intermembranoso

2 NADH matriz mitocondrial

6 NADH
Ciclo
Krebs Ocho NADH, dos FADH2, y 2
2 FADH2 ATP son la ganancia de la
descomposición de 2
2 ATP moléculas de piruvato.

Los seis átomos de carbono del piruvato (2) se

6 CO2
difunden fuera de la mitocondria y la célula en forma
de seis moléculas de CO2
Gloria León. Dr. Sc
Resumen:
Compuesto Enzima Producto final
Piruvato Piruvato Acetil-Co-A
deshidrogenasa
Acetil-CoA Citrato cintetasa Citrato
Citrato Aconitasa Isocitrato
Isocitrato Isocitrato α-Cetoglutarato
deshidrogenasa
α-Cetoglutarato α-Cetoglutarato Succinil-CoA
deshidrogenasa
Succinil-CoA Succinil-CoA sintetasa Succinato
Succinato Succinato Fumarato
deshidrogenasa
Fumarato Fumarasa (hidratasa) Malato
Malato Malato Oxalacetato
deshidrogenasa

Gloria León. Dr. Sc

Gloria León. Dr. Sc
 Ciclo de Krebs es anfibólico

•  Contiene reacciones
catabólicas y anabólicas.
•  Catabólicas
–  Energía de la oxidación
de acetil CoA es
almacenada en
coenzimas reducidas.

•  Anabólicas
–  Varios intermediarios son
precursores en vías de
síntesis. Gloria León. Dr. Sc
El ciclo de Krebs es anfibólico

Gloria León. Dr. Sc

 El Ciclo Krebs es anfibólico

•  Catabólico
–  Lípidos son fuente de
energía.
–  106 ATP del palmitoil-
CoA (16 C) por la β-
oxidación

Krebs cycle
Gloria León. Dr. Sc
 Ciclo de Krebs es anfibólico

•  Anabólico
–  Biosíntesis de ácidos grasos y colesterol.

–  Citrato + ATP + CoA →Acetyl CoA + OAA + ADP + Pi

Fatty acid
biosynthesis

Gloria León. Dr. Sc

Recapitulando: qué tenemos hasta ahora?
•  Por molécula de glucosa :

–  6 CO2

–  4 ATP

–  10 NADH + H+

–  2 FADH2

Gloria León. Dr. Sc