UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO

LABORATORIO DE BIOLOGIA
MOLECULAR APLICADA
Dra. Elizabeth Reynaga Hernández

ALUMNA: ABIGAIL MARTINEZ

PRÁCTICA NO.9: ANÁLISIS DE RESTRICCIÓN DIGESTIÓN DE ADN

MEDIANTE ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

DÍAS: VIERNES

HORA: 4:00 – 6:00hrs.

FECHA DE ENTREGA: 27/noviembre/2022

SAN LUIS POTOSÍ, S. L. P. AGOSTO - DICIEMBRE 2022

 PRECUESTIONARIO
1. Describa otros usos en los que participan las enzimas de restricción y su
finalidad
• Mapas de restricción de plásmidos o genomas.
El mapa de restricción determina la posición relativa de los lugares de corte con otro en
la molécula de ADN. Esto se realiza determinando los tamaños de los fragmentos
generados por diferentes combinaciones de ER.
• Clonación con vectores.
Para poder ser insertado el fragmento de ADN es necesario cortar el vector con
enzimas de restricción y una vez introducido pasa a denominarse: vector
recombinante.
• La construcción de moléculas de ADN recombinante
Implica el obvio empleo de las enzimas de restricción para definir y delimitar las
secuencias que se insertarán en el constructo recombinante.
• Bibliotecas genómicas
De la misma manera, el corte de ADN genómico que suele ser, según el organismo,
del orden de millones de pb, es más manipulable cuando es digerido por estas enzimas
en fragmentos más pequeños. Esto permite un manejo adecuado sin el riesgo de
degradación y manipulación para la construcción de bibliotecas genómicas

2. ¿Cómo se le llaman adicionalmente las enzimas de restricción?

Las enzimas de restricción también son conocidas como endonucleasas.

3. ¿Qué fenómeno se pueden presentar cuando existe una concentración mayor de

glicerol en una incubación?
Un aumento en la concentración de glicerol en el medio de incubación produce un
aumento de las velocidades de síntesis de CO2 y glicerol de glicéridos a partir del
mismo substrato.

4. ¿Qué parámetros pueden influir en la acción de corte de una enzima de

restricción?

• La pureza biológica del ADN. Contaminación de la muestra con otros ADN impide el
buen funcionamiento de las enzimas.
• Los contaminantes como detergentes y estabilizadores (docedil sulfato de sodio –
SDS–, ácido etilendiaminotetraacético –EDTA–), ya que concentraciones elevadas de
sales y detergentes inhiben la actividad enzimática.
• Modificaciones en el pH y temperatura de incubación. Variaciones leves en estos
parámetros inhiben enormemente la actividad de las enzimas.
• El grado de metilación del ADN, ya que algunas enzimas son inhibidas por metilación
en ciertas secuencias.
 Bibliografía:
• Rivera, O. R. D. & Maldonado, I. J. M. (s. f.). Enzimas de Restricción. academic.uprm.
Recuperado 25 de noviembre de 2022, de
https://academic.uprm.edu/%7Ejvelezg/EnzimasDNA.htm
• E.Herrera, & Domínguez, M. (1977). repositorioinstitucional.ceu. Obtenido de Modulación
del metabolismo: https://repositorioinstitucional.ceu.es/bitstream/10637/689/4/Modulacion-
Herrera%26Dominguez_1977.pdf
• Rodríguez Pinal, C. J., & Reynaga Hernández, E. (2022). Manual de Biologia Molecular
Aplicada agosto-diciembre 2022. Obtenido de Universidad Autónoma de San Luis Potosí,
Facultad de Ciencias Quimicas:
Manual%20de%20Biología%20Molecular%20Aplicada%20rev%20Agsto%2014%20ERH%
202022.pdf
• González, J. G. C. & Bueno, M. R. B. T. (s. f.). Capítulo 13: Enzimas de restricción.
accessmedicina.mhmedical. Recuperado 27 de noviembre de 2022, de
https://accessmedicina.mhmedical.com/content.aspx?bookid=1473§ionid=102743841#11186
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