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CUESTIONARIO DE RECONOCIMIENTO
PREPARADO POR:
GRUPO: 203022 _ 9
3. ¿Cuáles son los pasos experimentales que se llevan a cabo en la tecnología de ADN
recombinante?
5. ¿Qué son las enzimas de restricción, cuál es el origen evolutivo de las enzimas de
restricción y cómo se define su nomenclatura?
R/ta:
Las endonucleasas de restricción de origen natural se clasifican en cuatro grupos (Tipos I,
II III y IV) en función de su composición y los requisitos de cofactor escinciente, la
naturaleza de su secuencia objetivo y la posición de su sitio de escisión de ADN en relación
con la secuencia de destino. Los análisis de secuencia de ADN de las enzimas de
restricción, sin embargo, muestran grandes variaciones, lo que indica que hay más de cuatro
tipos. [34] Todos los tipos de enzimas reconocen secuencias de ADN cortas específicas y
llevan a cabo la escisión endonucleólítica del ADN para dar fragmentos específicos con
fosfatos terminales de 5’. Se diferencian en su secuencia de reconocimiento, composición
de subunidades, posición de escisión y requisitos de cofactor, como se resume a
continuación:
Las enzimas de tipo III (CE 3.1.21.5) se cortan en los sitios a poca distancia de un
sitio de reconocimiento; requieren ATP (pero no lo hidrólilos); S-adenosyl-L-
metionina estimula la reacción, pero no es necesario; como parte de un complejo
con una modificación de la metilasa (CE 2.1.1.72).
Las enzimas tipo IV se dirigen al ADN modificado, por ejemplo, adn metilado,
hidroximetilado y glucosial hidroximetilado
R/ta:
Las enzimas de restricción cumplen la función opuesta de las polimerasas, ya que estas
hidrolizan o rompen el enlace éster dentro del enlace fosfodiéster entre nucleótidos
adyacentes en una cadena nucleotídica.
En la biología molecular y la ingeniería genética son herramientas muy utilizadas para la
construcción de vectores de expresión y clonamiento, así como para la identificación de
secuencias específicas. También son útiles para la construcción de genomas recombinantes
y tienen gran potencial biotecnológico.
Los avances recientes en terapia génica hacen uso corriente de las enzimas de restricción
para la introducción de genes determinados en vectores que son vehículos para el transporte
de tales genes hacia las células vivas, y que probablemente tienen la habilidad de insertarse
en el genoma celular para realizar cambios permanentes.
12. ¿Qué es la ADN Ligasa, cuál es su función biológica natural y cuál es su función en
aplicaciones de tecnología de ADN recombinante?
14. Mencione una técnica que se utilice para separar fragmentos de ADN y explique el
principio de funcionamiento de la misma
BIBLIOGRAFIA