UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE SAN LUIS POTOSÍ

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO

LABORATORIO DE BIOLOGIA
MOLECULAR APLICADA
Dra. Elizabeth Reynaga Hernández

ALUMNO: ABIGAIL MARTINEZ

PRÁCTICA NO.5: TRANSCRIPCIÓN REVERSA (RT-PCR)

DÍA: VIERNES

HORA: 4:00-6:00 HRS.

FECHA DE ENTREGA: 21/octubre/2022

SAN LUIS POTOSÍ, S. L. P. AGOSTO - DICIEMBRE 2022

 PRECUESTIONARIO

1. ¿Qué es la transcripción reversa?

R=Es la síntesis de un ADN monocatenario (ADN complementario o ADNc) mediante un ARN
monocatenario como plantilla, mediado por transcriptasas reversas (RT). El ADNc puede
utilizarse como plantilla para la amplificación por PCR o para generar una biblioteca de ADNc.

2. ¿Qué son los oligonucleótidos de timina y para qué se utilizan?

R=Son secuencias monocatenarias de desoxitimina (dT), utilizadas para cebar reacciones
catalizadas por transcriptasa inversa. Estos hibridan específicamente con el tallo del poliA del
ARNm.

3. ¿Qué es el reactivo DTT y para qué se emplea?

R=El DTT (Ditiotreitol; reactivo de Cleland) es un reactivo que se utiliza para estabilizar enzimas y
otras proteínas con grupos de sulfhidrilos libres. Restaura la actividad perdida por la oxidación de
estos grupos in vitro.

4. Señale las características de la enzima transcriptasa reversa y ¿de dónde se

obtiene?
• Enzima de tipo ADN polimerasa.
• Catalizar la retro transcripción o transcripción inversa.
• Se encuentra presente en los retrovirus.
• Codifica el ARN a partir de la secuencia inicial de ADN, y no al revés.

Se obtiene mediante virus RNA (+) con envoltura que codifican esta enzima (transcriptasa
inversa), convirtiendo el genoma RNA retroviral en DNA de doble cadena.

5. Señale tres ejemplos de transcriptasas reversas que se utilizan.

• Transcriptasa inversa del virus de la inmunodeficiencia humana VIH-1.
• Transcriptasa inversa M-MLV del virus de la leucemia murina Moloney.
• Transcriptasa inversa AMV del virus de la mieloblastosis aviar.
 Bibliografía:

1. Reverse Transcriptase Reaction in 10 minutes — Enzyme Processivity. (s. f.). Recuperado 21 de octubre de
2022, de https://www.thermofisher.com/nl/en/home/life-science/pcr/reverse-transcription.html

2. Oligo (dT). (s. f.). Ecogen. Recuperado 21 de octubre de 2022, de https://www.ecogen.com/es/p1/oligo-dt18

3. Thermo ScientificTM DTT (ditiotreitol) - Reactivos y columnas Síntesis de ácidos nucleicos. (s. f.). Recuperado 21 de
octubre de 2022, de https://www.fishersci.es/shop/products/fermentas-dtt/p-4530694

4. Thermo ScientificTM DTT (ditiotreitol) - Reactivos y columnas Síntesis de ácidos nucleicos. (s. f.). Recuperado 21 de
octubre de 2022, de https://www.fishersci.es/shop/products/fermentas-dtt/p-4530694

5. Colaboradores de Wikipedia. (2021b, agosto 13). Transcriptasa inversa. Wikipedia, la enciclopedia libre. Recuperado 21
de octubre de 2022, de https://es.wikipedia.org/wiki/Transcriptasa_inversa