CLASE 12

Lectinas: Obtención, Estructura

Química, Propiedades y
Aplicaciones Diagnósticas y
Farmacológicas
2018

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 Temas a analizar
 Introducción-clasificación-estructura
 Métodos de identificación
 Lectinas en el proceso IHQco
 Aplicaciones diagnóstico

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¿Que son las lectinas?
Introducción
EL termino lectina define en la actualidad una amplia gama de proteínas
de origen vegetal y animal capaces de unirse de manera más o menos
específica a moléculas de azúcares, formando uniones muy similares a las de
las enzimas con sus sustratos y los anticuerpos con sus respectivos antígenos.
Algunos autores agrupan estos diversos grupos de moléculas bajo el
termino genérico “Afinitinas”, coherente con una rama de estudio que se podría
definir como lectinología que no debe ser entendida como una pseudo-
inmunología sino que, junto con la inmunología y la enzimología constituirían
ramas de la afinitología.
Se cree que desde un gen precursor ancestral común derivan esta
clase de moléculas tales como inmunoglobulinas, proteína C reactiva, complejo
mayor de histocompatibilidad, receptores linfocitarios y lectinas.

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 Introducción
Propiedades
El primer informe de lectinas data de 1888, donde Stillmark
publica sobre una toxina y aglutinina de semilla de ricino capaz de
aglutinar eritrocitos animales. Propiedades:

• Se descubre lectinas con la propiedad de aglutinar eritrocitos

selectivamente del tipo A, O y B.
• Se comprueba que las lectinas reaccionan con carbohidratos
presentes en las membranas celulares.
• Descubren que las lectinas pueden diferenciar células
cancerosas de normales.
• Su estructura química difiere de las inmunoglobulinas e incluso
muestran una considerable diversidad.
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 Origen de las lectinas

Clasificación:
 Origen Animal
 Origen Vegetal
 En bacterias, virus y hongos

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 Origen de las lectinas
Origen vegetal Ampliamente distribuidas en las plantas. La capacidad
de aglutinar glóbulos rojos (GR) incentivó la búsqueda de lectinas
capaces de diferenciar distintos tipo de eritrocitos humanos lo
que en efecto se logró:
• Phaseolus lunatus: se obtiene lectina aglutinadora específica
de GR tipo A
• Lotus tetragonolobus: se obtiene lectina aglutinadora
específica de GR tipo O.
• Bandeirma simplicifolia: se obtiene lectina aglutinadora
específica de GR tipo B.
• Ulex europaus: se obtiene lectina utilizada para tipificar
eritrocitos tipo O y sub grupos A y AB.

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 Origen de las lectinas
Origen vegetal
• Usando lectinas vegetales se demuestra que la N-
Acetilgalactosamina es el azúcar responsable de la
especificidad para el grupo sanguíneo A.
• Se demostró también que el azúcar fucosa es la responsable
de la especificidad para el Grupo O.
• La concanavalina A es una de las más notables de las lectinas
de origen vegetal. Ha sido usada como herramienta de
identificación de carbohidratos en solución y en la superficie
celular, también como mitógeno para algunos linfocitos e
incluso es capaz de diferenciar células malignas de células
normales, de donde deriva su uso como agente
anticancerígeno
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 Origen de las lectinas
Origen animal La existencia de las lectinas en animales ha sido
conocida desde el descubrimiento de una aglutinina en la
hemolinfa del merostomado Limulus sp. en 1903. Desde
entonces se ha estudiado la presencia de lectinas en distintos
organismos del reino animal.
Estas lectinas pueden ser subdivididas de acuerdo a
sí se encuentras adheridas a la membrana o no, estas reciben
el nombre se endolectinas o exolectinas. Las lectinas
integradas a la membrana atraparían glicoconjugados
adhiriéndolos como paso previo a la internalización y las
lectinas solubles interaccionarían con lo glicoconjugados
solubles y los adheridos a las membranas.

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 Origen de las lectinas
Origen animal
Se consideran hoy lectinas a ciertas proteínas presentes en
humanos como la proteína C reactiva y la fibronectina.

Proteína C reactiva: es una beta globulina que se encuentra

en suero de pacientes con diversas enfermedades
inflamatorias. Se fijan a diversas bacterias y promueven su
fagocitosis por los polimorfonucleares. Esta lectina parece
identificar al polisacarido C presente en las membranas de
varias bacterias (streptococcus pneumoniae, Staphylococcus
aureus y E. coli.)

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 Origen de las lectinas
Origen animal

Fibronectina: Proteína de elevado peso molecular, es capaz de

cubrir los receptores para bacterias en la célula epitelial de la
orofaringe, impidiendo la adhesión de los agentes patógenos.
Sirve de cable conector uniendo células entre sí o con otros
componentes del material extra celular. En tejidos normales
junto a otras proteínas de adhesión mantiene a la célula en su
lugar regulando la migración. Esto se pierde en la metástasis en
el cáncer. Se encuentra también soluble en la sangre y en otros
fluidos corporales como en el líquido amniótico, líquido sinovial,
líquido cerebro espinal y en forma insoluble en la superficie
celular formando el mayor componente no colágeno del
estroma de los órganos.
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 Origen de las lectinas
Origen bacteriano

Algunas lectinas tienen un papel importante en la patogenicidad

bacteriana e incluyen exotoxinas y proteínas de superficie
implicadas en la adhesión específica de la célula bacteriana a la
célula eucariótica.
La mayoría de estas lectinas (adhesinas) parece reconocer
oligosacaridos complejos de la superficie celular eucariótica.
Estas lectinas estarían presentes en la superficie celular,
flagelos y fimbrias.
Por otra parte, una lectina acomplejada con la toxina botulínica
puede ser la responsable de una unión más estrecha entre la
toxina y su receptor. Algo similar se ha descrito para virus y
toxinas del cólera y tetánica.
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 Estructura
Cuando se comenzó a estudiar las lectinas se las consideró como anticuerpos
vegetales. Hoy se sabe que esta hipótesis no es cierta por varias razones:

1. Los anticuerpos son el producto del sistema inmune de animales superiores

que responden a estímulos de una sustancia extraña para cada individuo
produciendo dichos anticuerpos. Las lectinas se encuentran presentes como
proteínas constituyentes del organismo y muchos casos en organismos que
como las plantas, bacterias e invertebrados, son incapaces de generar una
respuesta inmune.
2. La especificidad de los anticuerpos es mas amplia que la de las lectinas.
Estas solo se unen a carbohidratos, en tanto los anticuerpos se unen
además a otros compuestos.

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 Estructura
3. En cuanto a la estructura química, mientras que los anticuerpos tiene una
estructura similar, la de las lectinas no guarda ninguna relación con lo que hoy
podríamos llamas la superfamilia de la inmunoglobulinas e, incluso, difieren
mucho entre si. El estudio de la composición de aminoácidos, del peso
molecular y de otras propiedades moleculares pone de manifiesto que poseen
pocas características comunes, excepto la de que todas ellas son proteínas.
Estudios de extractos purificados de lectinas de leguminosas revelaron la
existencia de dos grupos de proteínas:
a) Las compuestas por un solo tipo de cadena polipeptídica.
b) Las compuestos de dos tipos de cadena, una liviana (A) y una pesada
(B).

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 Estructura
Ejemplos
• Concavalanina-A (Con-A): en el caso de esta lectina se
encontró que estaba compuestas por subunidades
dispuestas simétricamente, de peso molecular 25.500,
unidas como dímeros, tetrámeros y formas de alto peso
molecular de dependientes del pH: a pH inferior a 5,6 Con-
A existe como dímero en solución (PM= 55.000), a pH 5,6
forma un tetrámero (PM= 112.000), ya pH 7 está como
agregados de alto peso molecular. Cada subunidad tiene
un sitio de unión y además un átomo de Mn2+ y uno de
Ca2+. Cada cadena posee una secuencia de 238
aminoácidos, y la molécula de Con-A adquiere una
estructura globular.
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 Estructura
Ejemplos
La toxina de Ricinus communis: tiene un peso molecular de
60.000 y consiste en dos cadenas distintas unidas por puentes
disulfuro. La subunidad A tiene peso molecular 28.000 y la B
32.000. La composición aminoacídica de ambas unidades ha
sido determinada y muestra una gran similitud. Esta toxina se
una a un carbohidrato de membrana por medio de la sununidad
B mientras la subunidad A inhibe la síntesis de proteínas, de
esto surge su toxicidad.

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Lectinas en el proceso
Inmunohistoquímico

Métodos de identificación

Cuando la enzima o molécula está

Método detección DIRECTA
directamente unida a la lectina

Para poder observar el lugar de unión

específico entre la lectina y el glúcido
Cuando presenta una molécula
Método detección INDIRECTA interpuesta para la detección
(biotina, anticuerpos esp., IgG)
Lectina + marcador, para MO o
MET (peroxidasa de rábano o
fosfatasa alcalina)

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Métodos de identificación
Método directo

Método Indirecto
 APLICACIONES DIAGNÓSTICAS
Y FARMACOLÓGICAS DE LA LECTINA

Aplicaciones:

-Genética
-Biomedicina
-Inmunología

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 Aplicaciones diagnósticas
Cada aplicación diagnóstica va a depender
de alguna propiedad de la lectina.

 Caracterización de grupos sanguíneos

 Unión específica a sacáridos
 Aglutinación preferencial
 Conjugados con lectinas
 Propiedad mitogénica

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Caracterización de
grupos sanguíneos

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 Unión específica a sacáridos

Por su capacidad de reconocer estructuras glucocídicas, se

podrían utilizar para la caracterización de glicoconjugados
solubles, celulares y tisulares, en individuos sanos y en los que
presentan diversas patologías, por ejemplo las causadas por
depósitos de glicógeno.
Ha provisto a los
científicos de útiles
marcadores
para emplearlos en
técnicas histoquímicas

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 Se enlazan a sacáridos de la
superficie celular
Dentro de los estudios de membrana se ha
reportado en la literatura el uso de lectinas para
estudiar cambios estructurales en los
glicoconjugados presentes en las superficies
celulares y en ocasiones de esta forma detectar
cambios morfológicos ocurridos, para analizar la
distribución subcelular de epitopes y terminales
glicoproteicos, además para detectar alteraciones Utilidad en la microscopia
en la expresión de moléculas presentes en la electrónica
superficie celular. para estudiar la estructura
y función de la membrana
plasmática.

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 Aglutinación preferencial con
células transformadas

• Detección de transformaciones malignas en células, a través

de la aglutinación preferencial que muestran las lectinas con
células transformadas.
• Disminuyen el crecimiento de las células tumorales.
• Se utilizan también para la inmunización contra virus
productores de inmunodeficiencia y algunos tumores y como
medicamentos para prevenir metástasis. (Aplicación
farmacológica).

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Conjugados con
lectina
Ha permitido el desarrollo de técnicas Desarrollo de técnicas
cromatográficas como la cromatografía de cromatografías
afinidad para la purificación de (cromatografía de afinidad)
glicoproteínas. Ejemplo de ellas es la
purificación de IgG utilizando anti-IgG
acoplada a la Con A-Sepharose y la
purificación de IgM usando Con A
Sepharose, para su posterior Lectina

Lectina
cuantificación y posible proceso
Enzimas
diagnostico de gamapatías monoclonales.
También la purificación de enzimas y de Anticuerpos
las propias lectinas.

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Propiedad Mitogénica
Sus propiedades mitogénicas permiten se utilicen en estudios que tienen
como base la proliferación de linfocitos en cultivos, como son:
- La evaluación de la producción de citoquinas (interferón e interleuquinas) y
la expresión de sus receptores en sobrenadantes de cultivos de linfocitos
provenientes de pacientes con enfermedades de alto impacto social como el
síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), y la tuberculosis.
- La caracterización de algunos aspectos relacionados con la respuesta
inmune y fenómenos asociados con ellas como la inmunosupresión.
- La interacción entre virus, como por ejemplo entre el virus de
inmunodeficiencia humana (VIH) y el virus de la hepatitis B, así como la
susceptibilidad y resistencia a éstos
- Evaluación de la efectividad de terapias antirretrovirales de acuerdo con la
respuesta de los linfocitos a la estimulación con las lectinas antes y después
de la terapia, como por ejemplo en terapias contra el VHI.
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 Aplicaciones farmacológicas
Las aplicaciones terapéuticas de las lectinas aún se
encuentran en desarrollo, existiendo diversos ámbitos en
los que tienen una utilidad potencial.

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 Esclerosis múltiple
Enfermedad neurodegenerativa causada por un proceso autoinmune en el
que existen anticuerpos y linfocitos que atacan a los componentes del
sistema nervioso central, causando todo tipo de síntomas.
Para conocer las causas de este trastorno, se ha logrado inducir en
animales, una enfermedad semejante conocida como encefalitis alérgica
experimental (EAE), gracias a la cual se ha determinado que una de las
causas es la presencia de linfocitos T sensibilizados contra la mielina.
Se pretende que lectinas específicas sean capaces de inhibir la respuesta
inmune de éstas células mediante la inactivación de sus receptores.

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 Obesidad y Diabetes

• Se ha observado que la fitohemoaglutinina (PHA) de Phaseolus

vulgaris reduce la absorción intestinal de glucosa en un 50% en
animales jóvenes, lo cual puede ser de ayuda en casos de obesidad.
• Se ha reportado que una dieta rica en leguminosas (que contienen
altos niveles de lectinas), puede eliminar la necesidad de insulina en
casos moderados de diabetes insulino-dependiente.

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 Rinitis alérgica
• La rinitis alérgica es una reacción producida en las membranas de la
mucosa de la nariz luego de exponerse al polvo, al polen y otros
elementos.
• Es mediada por mastocitos, los que al recibir anticuerpos IgE en su
superficie liberan gránulos de histamina, sustancia que causa inflamación
y vasodilatación.
• Las lectinas de Ulex europaeus y Sophora japonica inhiben, interfiriendo
en la unión del anticuerpo con el mastocito.

Se conocen diferentes lectinas capaces de intervenir en procesos alérgicos,

enzimáticos e inflamatorios, que pueden constituir una importante ayuda
contra diversas enfermedades, como el asma, fibrosis quística y alergias.

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 CONCLUSIONES
 Las lectinas son proteínas que reconocen específicamente carbohidrato en al
superficie de las célula eucariota y procariota.
 Las lectinas están involucradas en importante procesos biológicos como en la
adhesión celular, reconocimiento de moléculas y patogenia de bacterias
 Se usan además para la detección de transformaciones malignas en células,
como agentes anticancerígenos y como medicamentos para prevenir
metástasis.
 También son una herramienta muy útil para potenciar o inhibir algunos efectos
fisiológicos.
 Las lectinas son un arma muy poderosa para el estudio de los determinantes
antigénicos en cualquier proceso biológico.

FIN
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