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Precipitación y Punto Isoeléctrico de Proteínas

Este documento describe un experimento para modificar los factores que afectan la solubilidad de las proteínas y determinar el punto isoeléctrico de la insulina. Los resultados mostraron que la precipitación de proteínas se produjo con la adición de sales pero no con cambios de pH o solventes. El punto isoeléctrico de la insulina se determinó en el tubo con pH=3, donde la proteína precipitó debido a su menor solubilidad en ese pH. El documento concluye que la solubilidad de las proteínas depende del pH

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Mariana Ramirez Zarate
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Precipitación y Punto Isoeléctrico de Proteínas

Este documento describe un experimento para modificar los factores que afectan la solubilidad de las proteínas y determinar el punto isoeléctrico de la insulina. Los resultados mostraron que la precipitación de proteínas se produjo con la adición de sales pero no con cambios de pH o solventes. El punto isoeléctrico de la insulina se determinó en el tubo con pH=3, donde la proteína precipitó debido a su menor solubilidad en ese pH. El documento concluye que la solubilidad de las proteínas depende del pH

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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS


BIOQUÍMICA GENERAL
“PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO ISOELÉCTRICO DE PROTEÍNAS”.
Arriaga Ramírez Aline Michael
Domínguez Flores José Raúl
3IM2 SECCIÓN 3
OBJETIVOS
Tubo Punto isoeléctrico
General: Modificar los factores extrínsecos y analizar 1 No se observa
su efecto sobre la solubilidad de las proteínas. 2 No se observa
3 Hubo precipitación
Específicos 4 No se observa
5 No se observa
 Separar proteínas por precipitación con sales Tabla 4. Determinación del punto isoeléctrico de la
para obtener los grupos -R y posteriormente insulina.
observar los factores extrínsecos.
 Mostrar cómo afecta el pH presente en la DISCUSION
De acuerdo con los resultados del primer
mayoría de las proteínas al punto isoeléctrico.
experimento notamos que en los cuatro casos
 Determinar el pH de la insulina, basándose en (precipitados 1 y 2, sobrenadante 1 y 2), se
sus propiedades a diferentes valores de pH. obtuvo una proteína, ya que al agregar
RESULTADOS (NH₄)₂SO₄ existe una competencia entre la
proteína y los iones de la sal por el agua, por
Se obtuvieron los siguientes resultados. esta razón al adicionar el reactivo de Biuret se
observa una coloración violeta/morada que es la
Muestra Biuret Interpretación
proteína precipitada.
Precipitado1 + Coloración morada/violeta
fuerte, (presencia de proteína). En la determinación del punto isoeléctrico de la
Sobrenadante1 + Coloración morada/violeta insulina, notamos una reacción en el tubo 3, esto
opaca, (presencia de proteína). debido a que la proteína presenta una menor
Precipitado 2 + Coloración solubilidad y por lo tanto la proteína se precipita,
morada/violeta fuerte, observando el fenómeno de Salting out. Salting
(presencia de proteína). out. (2022).
Sobrenadante + Coloración morada/violeta claro,
2 (presencia de proteína).
CONCLUSIONES
Tabla 1. Resultados del Salting-out   En conclusión, con esta práctica podemos
Clara de huevo filtrada y Adición de Etanol 96° decir que la solubilidad de las proteínas se
diluida 1:3 ve afectada por ciertos factores que
provocan cambios físicos y químicos, que
Tubo Precipitación Tubo Precipitación son sensibles a las fuerzas iónicas y al pH
del medio, como así mismo a la presencia
HCl 0.1 N + HCl 0.1 N +
de solventes y sales disueltas.
NaOH 0.1N - NaOH 0.1N - REFERENCIAS
 Aula Virtual de Biología. (s/f). Www.um.es.
Regulador + Regulador + Recuperado el 17 de octubre de 2022, de
de acetatos de acetatos https://www.um.es/molecula/prot06.htm
0.1 M, pH 0.1 M, pH
4.7 4.7  Salting out. (2022). Quimicafacil.net.
https://quimicafacil.net/tecnicas-de-
Agua - Agua + laboratorio/salting-out/

Tabla 2. Precipitación por efecto del pH y solventes

Tubo Precipitación
Cloruro de mercurio 5% Positiva 
Nitrato de plata 2% Positiva 
Acetato de plomo 5% Positiva 
Cloruro de sodio 5% Negativa (salting in)
Agua (testigo) Negativa 
Tabla 3. Precipitación por metales pesados 
ANEXOS

(Operaciones)

En este caso para calcular el pH en cada tubo y así determinar el ́ punto isoeléctrico de la insulina,
recurriremos a la ecuación de Henderson-Hasselbalch. 

pH= pKa + log [A ]/[HA]


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