Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Departamento de Bioquímica Laboratorio de Bioquímica

Práctica No.9: “Determinación de colesterol en la yema de huevo” Grupo: 4QV3 Sección: II

Integrantes: Ruiz Garduño Jesús & Zamora Calzada Verónica Fabiana

Profesores: Calvo Hernández Luz Aurora & Pacheco Rivera Ruth Abigail

Introducción Tubo µg de colesterol Absorbancia

1 20 0.114
El colesterol es una sustancia cerosa
2 40 0.166
(pertenecientes a los lípidos simples) que
3 60 0.168
se encuentra en la sangre. El cuerpo
4 80 0.193
necesita colesterol para formar células
5 100 0.285
sanas, pero tener altos niveles de
colesterol puede aumentar el riesgo de Los µg de colesterol fueron obtenidos de
sufrir una enfermedad cardíaca. la siguiente manera:
Uno de los alimentos que mayormente • 80 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 1 𝑚𝐿 TUBO 1
consumimos y que contiene colesterol es 𝑥 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 0.25 𝑚𝐿 𝑥= 20 µg
el huevo (posee alrededor de 186 mg de
este), y se encuentra en la yema. Sin • 80 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 1 𝑚𝐿 TUBO 2
embargo, demasiado colesterol malo 𝑥 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 0.50 𝑚𝐿 𝑥= 40 µg
puede aumentar la probabilidad de
padecer una enfermedad cardíaca, • 80 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 1 𝑚𝐿 TUBO 3
accidente cerebrovascular y otros 𝑥 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 0.75 𝑚𝐿 𝑥= 60 µg
problemas. El término médico para el
nivel alto de colesterol en la sangre es • 80 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 1 𝑚𝐿 TUBO 4
𝑥 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 1.00 𝑚𝐿 𝑥= 80 µg
trastorno lipídico, hiperlipidemia o
hipercolesterolemia.
• 80 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 1 𝑚𝐿 TUBO 2
Objetivos 𝑥 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 1.25 𝑚𝐿 𝑥= 100 µg

• Conocer la reacción química que

se lleva a cabo en el método de
Liberman-Burchard.
• Determinar la concentración de
colesterol en la yema del huevo
por el mismo método.
• Construir una curva tipo
expresando la concentración total
de colesterol analizado.
Figura 1. Curva tipo de absorbancia a
640nm con respecto a los µg de colesterol
Resultados
Posteriormente desarrollamos el método Cálculos para la obtención e µg de
de Liebermann-Burchard, se midió la colesterol en una muestra con un
absorbancia a 640 nm y obtuvimos los volumen de 5 µL:
resultados que se observan en la
Absorbancia (Y) del tubo problema: 0.170 nm
siguiente tabla.
Y= 0.0018x + 0.0745
Tabla 1. Resultados de absorbancia a diversas
concentraciones de colesterol. X= 0.170 – 0.0745 / 0.0018 = 53.05 µg de colesterol
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Práctica No.9: “Determinación de colesterol en la yema de huevo” Grupo: 4QV3 Sección: II

Integrantes: Ruiz Garduño Jesús & Zamora Calzada Verónica Fabiana

Profesores: Calvo Hernández Luz Aurora & Pacheco Rivera Ruth Abigail

Volumen total del extracto: 12 mL 100 g de yema de huevo. A partir de esto

Volumen de la muestra: 5 µL se puedo deducir que una yema de huevo
pesa alrededor de 20g la cual contendrá
53.05 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 0.005 𝑚𝐿 aproximadamente 217 mg de colesterol.
𝑥 µg 𝑐𝑜𝑙𝑒𝑠𝑡𝑒𝑟𝑜𝑙 → 12.00 𝑚𝐿
Al realizar nuestros cálculos
𝑥 = 127,320 µg = 127.320 (2) = 254.46 mg de correspondientes, obtuvimos que en la
colesterol en una yema completa yema de huevo había 254.46 mg de
colesterol. Como es evidente al hacer una
comparación los resultados obtenidos no
Discusión son igual a los teóricos, lo cual se debe a
diversas razones; una de ellas podría ser
En primera instancia podemos observar
que el tamaño del huevo o de la yema no
que todos nuestros tubos, a excepción del
era similar al promedio, y es por este que
tubo testigo tomaron una coloración
nuestro resultado es mayor.
verde. La cual es dada cuando el
colesterol reacciona con anhídrido acético Conclusión
y ácido sulfúrico concentrado produciendo
una pérdida de agua y una protonación • La reacción debe realizarse en
del colesterol. Se constituyen en medio condiciones anhidras en donde el
anhidro polímeros de hidrocarburos no solvente será el cloroformo.
saturados de intenso dando este color • El color que resulta en la reacción
verde azulado (Cecilia M., 2010). es azul verdoso.
• La reacción es inestable por lo que
Esta tonalidad verde – azulada sus lecturas en el
determinará la presencia de colesterol en espectrofotómetro deben
las muestras, y mientras mayor sea la realizarse de forma rápida y
cantidad de colesterol en los tubos, mayor correcta.
será la cantidad de moléculas que • El valor de la absorbancia va a
reaccionen mediante el mecanismo de permitir conocer la concentración
Liebermann-Burchard y, por lo tanto, de colesterol en la muestra.
mayor será la intensidad en la coloración, • El colesterol es un compuesto
como logramos observar en las muestras. importante para la síntesis de
Entre la absorbancia y la concentración hormonas corticosuprarrenales y
del colesterol existe una relación final sexuales, de los ácidos biliares y
como se observa en la gráfica. El de la vitamina D.
comportamiento de los puntos se ajusta a Bibliografía
la forma de una recta, por lo que se
establece ésta como modelo matemático • ESTRUCTURA | Instituto de
y a la cual denominamos como “curva Estudios del Huevo.
tipo”. (s. f.). https://www.institutohuevo.
com/estructura_huevo/
De acuerdo con la bibliografía consultada
• Colesterol alto - Síntomas y
(Herrera y Nuria, 2003; Gil, 2010), se
causas - Mayo Clinic. (2021, 29
indica que hay 1085 mg de colesterol en
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Práctica No.9: “Determinación de colesterol en la yema de huevo” Grupo: 4QV3 Sección: II

Integrantes: Ruiz Garduño Jesús & Zamora Calzada Verónica Fabiana

Profesores: Calvo Hernández Luz Aurora & Pacheco Rivera Ruth Abigail

julio). https://www.mayoclinic.org/
es-es/diseases-conditions/high-
blood-cholesterol/symptoms-
causes/syc-20350800
• (S/f). Edu.ar. Recuperado el 10 de
diciembre de 2022, de
http://www.fcn.unp.edu.ar/sitio/qui
micabiologica1/wp-
content/uploads/2010/08/TP-
LIPIDOS.pdf
• Gil A. (2010). Tratado de
nutrición. Tomo II: Composición y
Calidad Nutritiva de los
Alimentos. Editorial Médica
Panamericana, Madrid, España,
786 p.
• Herrera C, Nuria B. (2003).
Química de los alimentos: Manual
de laboratorio. 1a ed. Editorial de
la Universidad de Costa Rica.