Laboratorio de Biología Celular
Pra
Práctica número 1 y 2: uso y manejo del microscopio - diversidad celular
Protocolos de bioseguridad
En el marco del proceso de reintegro a las actividades prácticas de la
asignatura de Biología Celular; es necesario mencionar que los estudiantes
deben cumplir con requerimientos tanto individuales como colectivos con el
fin de poder desarrollar de forma exitosa todas las actividades. Entre estos
requerimientos se encuentra:
• Cumplir con el horario de ingreso y salida establecido por cada
una de las sedes para evitar aglomeraciones.
• El estudiante deberá cumplir con el distanciamiento social tanto
afuera del laboratorio como dentro de él. La norma sugiere por
lo menos 2 metros de distancia.
• Uso obligatorio de elementos de protección personal
(tapabocas, guantes, bata de laboratorio, zapatos cerrados,
pantalón largo). En el caso del tapabocas, usted no deberá
tocar constantemente el tapabocas mientras lo usa y si lo hace,
debe lavarse las manos con agua y jabón y de forma opcional
el uso de un agente desinfectante a base de alcohol (70 %).
• Persona con síntomas de gripa, ojos enrojecidos o síntomas
relacionados con la enfermedad del covid-19 no podrán
ingresar al laboratorio.
• No consumir alimentos ni bebidas dentro del laboratorio.
• No usar escritorios, equipos, herramientas, teléfonos y
utensilios de otras personas, siempre que sea posible.
• En el caso que se requiera el manejo común de elementos de
trabajo, estos deberán ser desinfectados antes y después de su
uso por el siguiendo las instrucciones del docente.
• Recuerde lo aprendido durante la primera práctica virtual. No
utilizar maquillaje. No utilizar accesorios. Mantener el cabello
recogido. En el caso de usar anteojos permanentes, limpiar con
regularidad empleando las soluciones de limpieza adecuada.
Enlace del simulador virtual
(https://www.ncbionetwork.org/iet/labsafety/)
Introducción
El microscopio es un instrumento óptico que ha sido utilizado para ampliar la
imagen de objetos o seres, o de detalles de estos, tan pequeños que no se
pueden ver a simple vista. Desde su creación ha sido una herramienta
valiosa para el desarrollo de la ciencia. Sin embargo, pese a que los lentes
de aumento se conocen hace mucho tiempo solo hasta la creación del
microscopio compuesto, fue que se pudo emplear en las Ciencias
Biológicas, gracias a su creador el inglés Robert Hooke en el año 1665
(Sánchez Lera y Ninfa Rosa Oliva García, 2015).
Existen varios tipos de microscopios, tales como el microscopio
estereoscópico, el compuesto, de campo oscuro, fluorescencia, contraste de
fases, de luz ultravioleta; el microscopio electrónico de transmisión y el
microscopio electrónico de barrido entre otros. Para saber cuál elegir
debemos preguntarnos ¿qué es lo que queremos observar?¡.
En la mayoría de los casos estos instrumentos son empleados para la
observación de células; quienes poseen una diversidad con respecto a
aspectos como forma, función, tamaño y número. Generalmente, la forma
de representar a las células es la forma redondeada o circular, sin embargo,
probablemente sea la menos común de observar tanto en los tejidos
animales como vegetales, en los que se pueden encontrar formas
redondeadas, estrelladas, multilobulada, filiformes, cuboides o prismáticas
entre otras (figura 2) (Martínez- Pérez, 2017). A nivel funcional es muy
importante señalar que los organismos unicelulares pueden presentar una
morfología variada dependiendo del medio que habiten, y una sola célula es
la encargada de realizar las funciones necesarias para su supervivencia y
reproducción; mientras en los organismos pluricelulares estas funciones son
realizadas por varios tipos células especializadas a través de procesos
coordinados. Estas funciones son extremadamente complejas y variadas,
desde las relacionadas con la alimentación, la detoxificación, el movimiento,
la reproducción, el soporte, o la defensa frente a patógenos, hasta las
relacionadas con el pensamiento, las emociones o la consciencia.
Figura 2. Diversidad de células (https://histology.medicine.umich.edu/virtual-em-
micrograph-list ).
En cuanto al tamaño las células pueden medirse en micrómetros (µm), en el
que existen células que pueden llegar a medir entre 0.5 -2 µm, estas
generalmente pertenecen a células procariotas en el que se incluyen las
bacterias y las algas cianofíceas o cianobacterias, las cuales se distinguen
porque carecen de organelos membranosos interno (figura 2).

Figura 3. Partes de un microscopio óptico.

Figura 2. Diversidad de tamaños (Alda, 2010).
Parte A
Objetivos 1. Realice el montaje con una de las letras recortadas en un portaobjeto y
adiciónele una gota de agua y cúbrala con un cubre objeto
• Aprender a utilizar el microscopio óptico. 2. Encienda el equipo óptico con el interruptor, este puede estar ubicado en
• Identificar algunos componentes estructurales que hacen parte la parte de atrás o al lado del pie de base de apoyo.
de las células eucariotas y procariotas. 3. Tome el portaobjeto y ubíquelo en la platina
• Comparar las características morfológicas y estructurales de las 4. Empleando los tornillos ubicados en el carro trate de ubicar el
células animales, vegetales y protistas. portaobjeto con la letra donde se encuentra atravesando la luz.
• Diferenciar la diversidad celular en cuanto a forma y tamaño. 5. Ubique el revolver y coloque el objetivo en 4x
• Adquirir destreza en el uso y manejo del microscopio. 6. Utilizando el macrométrico baje la platina y luego coloque sus ojos en
los oculares y poco a poco vaya subiendo con esta misma estructura.
• Materiales y reactivos 7. Con el tornillo micrométrico mejore la imagen si es necesario. Sea
• Kumis * cuidadoso recuerde que es un tornillo muy sensible, recuerde lo observado
• Cebolla* en el simulador https://www.ncbionetwork.org/iet/microscope/.
• Letras recortadas (e, g) 8. Regule la intensidad de la luz con el botón, en ocasiones puede parecer
• Hilos de diferente grosor una rueda o en otras ocasiones un tornillo esto depende del diseño del
• Agua del lago de la unimag equipo.
• Azul de metileno 1% 9. Cambie de objetivo a 10 x,40 x, 100x (emple aceite de inmersión)
• Aceite de inmersión enfoque según la necesidad, recuerde que debe hacerlo empleando los
• Agua destilada botones el micrométrico y el macrométrico.
• Beaker 250 ml 10. Observe y anote lo observado en cada objetivo describa
• Portaobjetos y cubre objetos
• Mechero Objetivo Observación
• Asas
• goteros
• Palillos 4x
Nota: los materiales resaltados deben ser traídos por los estudiantes .
10x
Materiales y métodos
Procedimiento 40 x
Sección I
100 x
Uso del microscopio
Observe la figura 3 para relacionarse con las partes y funciones del
microscopio. Para afianzar su relación con este equipo también puede
emplear el simulador https://www.ncbionetwork.org/iet/microscope/ 1. Realice el montaje con una de los tres hilos de diferente grosor coloque
en un portaobjeto
2. Encienda el equipo óptico con el interruptor, este puede estar ubicado en llama del mechero para fijar definitivamente la muestra.
la parte de atrás o al lado del pie de base de apoyo. 5. Cubrir la preparación con 2 o 3 gotas de solución de azul de
3. Tome el portaobjeto y ubíquelo en la platina metileno 1 %.
4. Empleando los tornillos ubicados en el carro trate de ubicar el 6. Lavar con agua sobre la cubeta.
portaobjeto con la letra donde se encuentra atravesando la luz. 7. Añadir una gota de alcohol para eliminar la grasa
5. Ubique el revolver y coloque el objetivo en 4x 8. Secar al aire libre o levemente encima del mechero
6. Utilizando el macrométrico baje la platina y luego coloque sus ojos en 9. . Observar al microscopio con lente de inmersión y determinar
los oculares y poco a poco vaya subiendo con esta misma estructura. forma, disposición y relación de tamaños de las distintas
7. Con el tornillo micrométrico mejore la imagen si es necesario. Sea bacterias. Represente y describa su observación.
cuidadoso recuerde que es un tornillo muy sensible, recuerde lo observado
en el simulador https://www.ncbionetwork.org/iet/microscope/.
8. Regule la intensidad de la luz con el botón, en ocasiones puede parecer
una rueda o en otras ocasiones un tornillo esto depende del diseño del
equipo.
9. Cambie de objetivo a 10 x,40 x enfoque según la necesidad, recuerde
que debe hacerlo empleando los botones el micrométrico y el
macrométrico.
10. Observe y anote lo observado en cada objetivo describa

Objetivo Observación

Objetivo ___ x
4x

10x

40 x

Objetivo ___ x

Sección II

Diversidad celular
Células procariotas

1. Tome el asa y esterilice frente al mechero hasta obtener el rojo

vivo.
2. Empleando un soporte de tinción coloque un portaobjeto limpio
y en este deposite una gota de agua destilada. Objetivo ___ x
3. Luego con el asa tome una gota de kumis y diluya con la gota
de agua.
4. Deje secar aire libre del laboratorio y pasaselo tres veces por la
Células Eucariotas

Animal

1. Usando un palillo de dientes, raspe cuidadosamente el interior de la

mejilla.
3. Dispersar el raspado sobre el portaobjetos en forma de zig-zag evitando
pasar más de un vez por el mismo sitio.
4. Secar al aire libre del laboratorio.
3. Teñir con azul de metileno durante 2 o 3 minutos.
4. Verter el colorante sobrante y lavar la preparación hasta que no suelte
color.
5. Colocar un cubre objeto de forma adecuada, evitando la formación de
burbujas.
6. Represente y describa lo observado. Resalte algunas estructuras Objetivo ___ x
celulares como membrana, núcleo, citoplasma, gránulos citoplasmáticos y
otros).
Protista

1. Con el agua del lago, tome una gota y colóquela en un porta

objeto con cuidado y cúbrala con un portaobjeto elimine con
mucho cuidado el exceso de agua.
2. Observar en el microscopio en aumentos de 4x, 10x, 40x

Referencias

Castro Retamal and Nelso, P. 2015. Manual de Biología Celular.

Universidad Santo Tómas. Bogotá D.C.

Martínez Pérez, F. 2017. Manual de práctica de laboratorio

Objetivo ___ x
Vegetal
1. Separe una capa interna de la cebolla, desprendiendo con la
pinza la membranita adherida por la cara inferior cóncava de
una de sus capas, llevándolo a una caja portaobjeto para
humedecerla con un poco de agua destilada y evitando que se
enrosque.
biología celular. Universidad Industrial de Santander,
Bucaramanga.
Paniagua, R. 2017. Biología Celular y Molecular. 4ª Edición.
Universidad de Córdoba Córdoba.
Sánchez Lera Rita María, Oliva García Ninfa Rosa. Historia del
microscopio y su repercusión en la Microbiología. Rev Hum
Med [15( 2 ): 355-372.

2. Añadir un poco de azul de metileno en el porta objeto por dos

minutos, con la muestra de cebolla previamente escurrida del Simuladores:
agua destilada
https://www.ncbionetwork.org/iet/microscopebasics/
3. Enjuagar con un poco de agua destilada, para retirar el exceso
de tinción. https://histology.medicine.umich.edu/virtual-em-micrograph-
list
4. Represente y describa lo observado. Resalte algunas
estructuras celulares como membrana, núcleo, citoplasma,
gránulos citoplasmáticos y otros).