INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL
“Curva de calibración de azúcares reductores.”
Pacheco Mendoza Stephany, Ruiz Osnaya José Dynarko, 4QV1, Sección: A.

fructosa-glucosa, con ayuda de

Introducción. reacciones coloridas, a partir de
La energía de activación química es la mediciones espectrofotométricas.
energía necesaria para que se lleve a
cabo una reacción, se puede llegar a Resultados.
esta al modificar parámetros
fisicoquímicos como aumentar la
temperatura, presión del sistema, o el
uso de catalizadores; compuestos
químicos que reducen la energía de
activación, como lo puede ser el
aumento [H+] por un ácido.

Una de las formas biológicas para

poder modificar la energía de
activación, es mediante enzimas, una
enzima es una proteína con un poder Tabla 1. relación concentración de
sacarosa-absorbancia
catalítico, esto, en pocas palabras nos
dice, que una enzima es un
catalizador biológico, las enzimas son
específicas para un sustrato.

La cantidad de sustrato que una

enzima convierte a producto, se
puede determinar mediante una gran
variedad de método y técnicas, como
titulaciones, mediciones
espectrofotométricas (colorimétricas),
entre muchas más maneras, todo esto
dependiendo de las características
químicas del producto, en el caso de
las mediciones colorimétricas, estas Figura 1. Gráfico de regresión lineal de
absorbancia y concentración de azúcar reductor
se pueden calcular mediante curvas (glucosa).
de calibración. Una curva de
calibración, es una gráfica en la cual
se presentan valores conocidos de la
concentración de un producto dado,
de acuerdo a la absorbancia que esté
presente en una medición
colorimétrica a una longitud de onda
específica.

Objetivos.
Figura 2. Cálculo de concentración mM de
sacarosa.
-Construir una curva de calibración
tipo de la concentración de
Discusión medio de la lectura de absorbancias
con concentraciones conocidas de
sacarosa.

Bibliografía

-Nelson, D. L., Cuchillo Foix, C. M.,

Lehninger, A. L., & Cox, M. M. (2005).
Lehninger: Principios de Bioquímica
(4a. ed.). Barcelona: Omega. Pp (190,
200).

-Matthews K. F; Holde V. K; Ahern G.

Figura 3. Sitio activo, reacción entre la invertasa y
sacarosa. K (2002) Bioquímica. 3ª edición.
Madrid: Pearson Educación. Pp. (411)

-UNAM (S/F) Cinética de reacciones

catalizadas por enzimas. Depto. De
Farmacia. Recuperado de:
fquim.unam.mxsamyd. (Septiembre,
Figura 4. Reacción del 3,5-DNS para azúcares
reductores.
2021).

Preguntas extra

1.- Importancia de las curvas tipo

R= La determinación de la velocidad
de reacción, así como su respuesta a
los cambios de diversos parámetros
Figura 5. Equilibrio ceto-enol de la fructosa. experimentales, es un método
importante para conocer mecanismos
La forma abierta de la glucosa y la de acción enzimáticos. Evaluar el
fructosa (figura 4,equilibrio ceto-enol efecto de este tipo de cambios, es
a pH alcalino que da como resultado decir, la cinética enzimática, es posible
glucosa), reacciona con el 3,5-DNS, por medio de las curvas tipo.
donde, el aldehído de la sacarosa
provoca una reducción del grupo nitro
a amino en el 3,5-DNS, dando ácido
2-amino-5-salicílico, como se muestra
en la figura 3, obteniendo, así, un
cambio en la coloración , el cual, será
favorecido posteriormente por la
incubación. Esta reacción se detiene
al colocar los tubos en agua fría.

Conclusiones.

Las reacciones colorimétricas dadas

por la reducción del 3,5-DNS con
sacarosa, permitió la construcción de
una curva de calibración tipo por