CROMATOGRAFÍA DE GASES I

VALORES a) Nombre del Laboratorio: Fundamentos de Análisis Instrumental

b) Nombre del alumno: Jose Luis Del Castillo Ambris

c) Fecha (día y hora): Miércoles 8:00-10:00 am

d) Nombre del tema: PARÁMETROS CROMATOGRÁFICOS

e) Objetivos:

▪ Integra los elementos estructurales de un cromatógrafo de gases

▪ Calcula los parámetros cromatográficos a partir de la información experimental

proporcionada.

▪ Interpreta los resultados obtenidos y selecciona las condiciones

experimentales para el análisis de una muestra.

Introducción

La cromatografía de gases es una técnica utilizada para separar los diferentes

compuestos volátiles de una muestra. La muestra se volatiliza y se inyecta en
la cabeza de una columna cromatográfica (fase estacionaria). La elución se
produce por el flujo de una fase móvil de un gas inerte, el cual no interacciona
con las moléculas de la muestra; su única función es la de transportar el analito
a través de la columna. En cromatografía de gases se usan dos tipos de
columnas, las empaquetadas, o de relleno y las tubulares abiertas, o capilares.
Entre los detectores más usados se encuentra el detector FID (ionización de
llama) y el detector TCD (conductividad térmica).

Procedimiento

Disponible en el laboratorio.

12 f) Resumen de la Investigación Teórica:

1. Fundamento de la cromatografía y su clasificación con respecto a la fase móvil

y a la estacionaria.
Su fundamento es la separación de los diferentes componentes de una mezcla
que se encuentran en un líquido o gas es el resultado de las diferentes
interacciones de los solutos a medida que se desplazan alrededor o sobre una
sustancia líquida o sólida (la fase estacionaria). Las diversas técnicas para la
separación de mezclas complejas se fundamentan en la diversidad de afinidades
de las substancias por un medio móvil gas o líquido y un medio absorbente
estacionario a través del cual circulan.
 Se clasifican en:
• Cromatografía sólido-líquido
• Cromatografía líquido-sólido
• Cromatografía sobre geles
• Cromatografía intercambia iónico
• Cromatografía de gases
• Cromatografía de alta resolución
• Cromatografía adsorción en papel
• Cromatografía de reparto en papel
• Cromatografía cambio iónica en papel

2. a) Clasifica las columnas cromatográficas.

• Columnas de relleno o empaquetados

• Columnas tubulares o capilares
• Columnas capilares de pared recubierta (WCOT).
• Columnas capilares con soporte recubierto (SCOT).
b) Menciona por lo menos cinco características para las columnas
cromatográficas.

➢ Se fabrican con tubos de vidrio o de algún metal, como cobre, acero

inoxidable o aluminio.
➢ Tienen un diámetro de 2 a 5 mm y una longitud que varía entre 0’5 y 5
m, aproximadamente, y van enrolladas en forma helicoidal.
➢ El material empleado como soporte sólido debe ser homogéneo y estar
formado por partículas pequeñas, que sean resistentes y proporcionen
una elevada área superficial.
➢ Las columnas capilares ofrecen una mayor resolución, rapidez y
sensibilidad en comparación con las columnas de relleno.
➢ Las columnas WCOT tienen una mayor efectividad.

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3. Para los métodos de cromatografía de gases:
a) ¿Cómo se selecciona una columna?
Se deben considerar ciertos factores como:
• Selección de la fase estacionaria en función a la selectividad y
polaridad del analito.
• El diámetro de la columna se tiene que tomar en cuenta para factores
como la eficiencia, la retención de los solutos, la presión, la velocidad
del flujo de la fase móvil y la capacidad.
• La longitud de la columna en factores como la eficiencia, la retención
de los solutos y la presión del gas portador.
• El espesor de película de la columna influye en cinco parámetros
básicos: retención, resolución, sangrado, inercia y capacidad.

b) Describe el proceso de medición de los diferentes tipos de

muestras:sólidas, líquidas y gaseosas
Para muestras sólidas: es importante llevar a cabo una disolución de una
muestra homogénea y representativa de la sustancia problema, la muestra
deberá ser disuelta apropiadamente para evitar alteraciones en las
respuestas transcritas en los picos del cromatograma y de esta manera
poder obtener un cromatograma apropiado que permita la identificación y
cuantificación de los componentes de manera óptima.
Para muestras líquidas: es importante que la muestra sea homogénea y
representativa, las muestras las cuales no puedan ser homogenizadas
deberán homogenizarse mediante operaciones de mezclado para la toma de
la muestra analítica.
Para muestras gaseosas: la muestra gaseosa deberá ser tomada del gas de
proceso como una cantidad parcial, siendo esta representativa de la muestre
total analítica, y acondicionando la misma mediante un proceso de secado
del gas.

c)¿Cómo se selecciona un detector?

Se realiza en función de:
• Sensibilidad
• Respuesta lineal en un intervalo amplio de concentración de analito.
• Tiempo de respuesta corto.
• Intervalo amplio de temperatura de trabajo.
• Estabilidad y reproducibilidad.
• Respuesta semejante para todos los analitos.

4. La temperatura de la columna, el flujo del gas de arrastre, el volumen de muestra

y la naturaleza de la fase estacionaria, son algunos de los factores en las
separaciones por cromatografía de gases; explica la influencia de cada uno de
ellos.
Temperatura de la columna: La temperatura de la columna afecta al equilibrio
de distribución de los analitos entre la fase móvil y estacionaria, por lo que, al
aumentar la temperatura se acelera la elución.
Flujo del gas de arrastre: El flujo del gas de arrastre afecta en la eficiencia del
análisis cromatográfico; ya que si la velocidad es pequeña los componentes
tendrán más tiempo para que se pueda realizar el equilibrio de reparto.
 Volumen de muestra: El volumen de muestra será determinado por el sistema de
columna a utilizar; y este deberá ser apropiado para evitar la discriminación
propia de los componentes en el análisis, además, el volumen de muestra deberá
ser apropiado para evitar mezclas incompletas o bandas de muestra anchas y
evitar la formación de turbulencias en el paso de la cámara de inyección a la
columna.
Naturaleza de la fase estacionaria: La naturaleza de la fase estacionaria define
el tipo de interacciones presentadas entre el soluto y la misma, planteando la
retención de los componentes de la muestra, además de presentar una diferencia
en la afinidad por la fase estacionaria con respecto a cada uno de los componentes.

5. ¿Qué es un cromatograma, cómo se elabora y qué información analítica

proporciona?
Es un diagrama donde se representan los resultados de la separación de
una mezcla mediante técnicas cromatográficas. En el eje de las ordenadas
se representa el valor medido de alguna propiedad física a partir de la cual
se ha detectado la presencia de una sustancia, o bien una unidad relativa
que la cuantifica, mientras que en el de las abscisas el tiempo. En la Figura
superior se representa un cromatograma con diferentes máximos, cada
uno de ellos asociado a la presencia de uno de los componentes de la
mezcla original. En la Figura inferior se indica la manera en la que se mide
lo que tarda en abandonar al sistema de separación una de estas
sustancias tomando como referencia su máximo, equivalente a la suma del
tiempo que tarda en salir del sistema la fase móvil o eluyente y el tiempo
efectivo que es retenido cada componente.

4 g) Define los siguientes parámetros cromatográficos, y expresa la ecuación para su

cálculo a partir de un cromatograma.

1. Tiempo de retención y tiempo muerto: define el tiempo entre

la inyección en una columna cromatográfica y la llegada a un pico de analito al
detector; y el tiempo muerto define el tiempo necesario para que una especie no
retenida pase a través de la columna.
2. Tiempo de retención corregido: Define el tiempo real que la fase estacionaria
ha retrasado el avance de la sustancia.
3. Factor de capacidad: Define una medida de la fortaleza con la cual la fase
estacionaria retiene el soluto, e indica que tan lejos del tiempo muerto elude este.
4. Número de platos teóricos: Define la característica de una columna
cromatográfica que se emplea para medir la eficiencia de esta. El número total de
platos teóricos de una columna representa el poder de separación de la columna
5. Altura equivalente de cada plato teórico: Segmento de columna que
representa un plato teórico. Es la medida inversa de la eficiencia del sistema,
entre menor sea H el sistema es más eficiente.
6. Selectividad o retención relativa: Define la medida de las diferencias relativas
entre la interacción de dos solutos con la fase estacionaria por lo que la
selectividad muestra la diferencia de afinidad por los solutos en la fase
estacionaria, y un valor mayor de α significa una columna más selectiva y mejor
separación entre solutos.
 7. Factor de asimetría (T o As): Define la relación entre distancia desde la línea
central del pico a la pendiente de bajada, entre la distancia desde la línea central
del pico a la pendiente de subida.

4 h) 1. Fundamento y diagrama descriptivo de un cromatógrafo de gases. El diagrama

por bloques realizarlo a mano.

En un cromatógrafo de gases; se inyecta una pequeña cantidad de la muestra a

separar en una corriente de gas inerte a elevada temperatura mediante la inserción
de esta en un puerto de inyección, esta corriente de gas atraviesa una columna
cromatográfica la cual separara los componentes de la mezcla por medio de un
mecanismo de retención definiendo la interacción del analito con la fase
estacionaria, para posteriormente emerger de la columna y pasar a través de un
sistema de detección adecuado el cual genera una respuesta que se envía traduce al
cromatograma.
2. Fundamento y diagrama descriptivo de un detector de conductividad térmica.
El diagrama por bloques realizarlo a mano.

El detector de conductividad térmica (TCD), se basa en los cambios en la

conductividad térmica de la corriente de gas ocasionados por la presencia de las
moléculas de analito. El sensor de un TCD consiste en un elemento calentado
eléctricamente cuya temperatura, a una potencia eléctrica constante, depende de la
conductividad térmica del gas circundante.
BIBLIOGRAFÍA:
• Anónimo (2023). Link:
https://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_foname
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• Sgariglia, Melina Araceli, José Roldolfo Soberón, Diego Alejandro

Sampietro, y Marta Amelia Vattuone. Revista Arakuku (2010) ‐ Año
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APLICACIONES”. Link:
https://ri.conicet.gov.ar/bitstream/handle/11336/75465/CONICET_Di
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• Cosmos (2017) Blog de internet. “Tipos de columnas cromatográficas

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https://www.cosmos.com.mx/blog/tipos-de-columnas-
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• Anónimo. (2007). Recuperado en febrero 2021. Consideraciones

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• Stashenko. Elena. (2011). Recuperado en febrero 2021. Preparación

de la muestra: “Un paso crucial para el análisis por GC-MS”.
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