Universidad Nacional de Asunción

Facultad de Ciencias Exactas y Naturales

Departamento de Educación a Distancia

* TINCIÓN ARGÉNTICA NUCLEOLAR

** Jose Manuel Peralta Román.

San Lorenzo – Ciudad Universitaria – Paraguay

Año 2022

* Informe Nº 2 presentado a la asignatura Biología Celular

** Estudiante de la carrera Lic. en Ciencias – Mención Biología

Profesora: Lic. Gloria Yaluff, MSc.

Encargada del Lab. de Genética: Lic. Sara Aguilar, MSc.

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INTRODUCCIÓN

Examinando el citoplasma de una célula eucariota bajo un microscopio electrónico,

este revela la presencia de gran variedad de organelos membranosos, así como elementos
del citoesqueleto de la célula. Por otro lado, al examinar al núcleo, se revela que poseen
poco más que grupos de cromatina, y uno o más nucléolos irregulares. Los investigadores
llegaron a la conclusión, de que el núcleo es en mayor parte, como un saco de componentes
colocados al azar (Karp et al., 2019).

En 1781, el científico Felice Fontana, describió una formación en el núcleo, que

correspondía al nucléolo. En años posteriores, Schleiden y Schwann observaron esta misma
formación en distintos tipos de células, principalmente en las vegetales. Interpretando sus
observaciones, y basándose en la teoría celular, concluyeron que esta estructura daba origen
al núcleo, así como el núcleo da origen a la célula, y esta última a los tejidos (Paniagua et al.,
2007).

Cajal, utilizando técnicas de tinción con plata, observó al nucléolo como un conjunto
de esferas. Con el perfeccionamiento de la microscopia electrónica, se pudo interpretar que
la estructura del nucléolo es similar a la de una esponja con tabiques irregulares
interconectados, entre los cuales quedan espacios vacíos. Se lograron de igual manera
determinar los siguientes componentes: La parte amorfa, el cual corresponde a los espacios
donde existe poca densidad. Y la parte densa o nucleolonema, el cual comprende las partes
granular y fibrilar (idem).

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OBJETIVO

- Identificar los distintos estadios nucleolares y su morfología en células de Allium cepa.

MATERIALES Y MÉTODOS

El día previo a la práctica:

- Se cortaron los ápices de las raíces de Allium cepa.
- Se fijaron los ápices por 2 horas a temperatura ambiente en la solución (1:1) de formol 10%
hidroquinona 1%.
- Se lavaron los ápices en agua destilada 3 veces durante 10 minutos cada vez.
- Se depositaron los ápices en una solución de nitrato de plata al 2% contenida dentro de un
tubo de vidrio envuelto en papel aluminio.
- Se colocó el tubo en una gradilla de metal y se dejó en la estufa a 70º C durante 15 horas
en total oscuridad.
El día de la práctica:
- Transcurridas las 15 horas de incubación, se lavaron los ápices en agua destilada 3 veces
durante 10 minutos cada vez.
- Se fijaron los ápices por 2 horas a temperatura ambiente en una nueva solución (1:1)
de formol 10% -hidroquinona 1%.
- Se pusieron los ápices en una lámina y se agregó una gota de ácido acético al 50%, se
realizó el squash.
- Se cubrió el preparado con la laminilla y se llevó a observación con 400X de aumento.
- Se identificaron células con uno, dos tres y cuatro nucléolos, además el nucléolo con forma
estrellada o amorfa.

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RESULTADOS (Insertar fotografía de la hoja de resultados)

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DESCRIPCIÓN Y ANÁLISIS DE RESULTADOS

Figs. 1, 2, 3, 4, y 5. Células de Allium cepa con uno, dos, tres, cuatro nucléolos y con un
nucléolo estrellado

Se observaron distintas partes de las células en la muestra, cada una de estas

presentaban pared celular, citoplasma, núcleo y nucléolos. Estas partes estaban todas
teñidas en una escala de anaranjado cobrizo, a diferencia de los nucléolos, que presentaban
un color negro oscuro y sólido. Siendo los citoplasmas de un color tenue y los núcleos un
color bastante intenso. Los nucléolos estaban presentes en distintas cantidades en cada
núcleo, presentando cantidades de 1, 2, 3 y 4 nucléolos, en una de estas células se pudo
observar un nucléolo amorfo, el cual tenía la apariencia de un frijol (Phaesolus vulgaris).

Ultraestructuralmente, el nucléolo consta de centros fibrilares, componente fibrilar

denso y componente granular. Durante la mitosis, el nucléolo se disgrega y se reorganiza en
la telofase alrededor de las regiones organizadoras del nucléolo (NOR). La tinción del
nucléolo es debido a una proteína llamada nucleolina, el cual reacciona con la plata (Ag).
Durante la división celular, el nucléolo presenta una serie de cambios. Una de ellas fue la
desorganización profásica, en donde el nucléolo disminuye de forma y toma una apariencia
estrellada, la cual fue observada en la Figura 5. Durante la reorganización telofásica, en un
estado avanzado de la telofase, los cuerpos prenucleolares se fusionan entre si en torno al
NOR, Dando como resultado uno o varios nucléolos dependiendo del número de NORs, los
cuales fueron observados en las Figuras 1, 2, 3 y 4 (Jiménez y Merchant., 2003; Paniagua et
al., 2007).

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CONCLUSIONES

Se logró identificar con éxito los estadios nucleolares y la morfología de estas. Siendo
estos los núcleos que poseían desde 1 a 4 nucléolos en su interior, resultado de la cantidad
de NORs que poseían, los cuales estaban en una fase de telofase tardía, y el núcleo con
nucléolo estrellado, el cual estaba presente en la desorganización profásica. Siendo todos
estos estadios observados en la práctica experimental, usando células de raíz de un Allium
cepa.

BIBLIOGRAFIA

- Jiménez, L. F. y Merchant, H. (2003). Biología Celular y Molecular. Pearson Education.

https://books.google.com.py/books/about/Biologia_Celular_Y_Molecular.html?
id=sDQYRWEhVroC&redir_esc=y

- KARP, G.; MARSHALL, W.; IWASA, J. (2019). Biología celular y molecular. McGraw-Hill.
https://books.google.com.py/books?id=soD-
ygEACAAJ&dq=Biologia+celular+karp&hl=es-419&sa=X&redir_esc=y

- Paniagua, R., Nistal, M., Sesma, P., Alvarez-Uria, M., Fraile, B., Anadon, R., Saez, J. H. (2007).
Biología Celular. McGraw-Hill. https://books.google.com.py/books/about/Biolog
%C3%ADa_celular_3a_edici%C3%B3n.html?hl=es&id=uqZtGQAACAAJ&redir_esc=y

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Puntualidad ---------------------------
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