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Colegio Nacional de Buenos Aires

Departamento de Biología

TRABAJO PRÁCTICO N°1:

“Microscopía y observación de células”

Este primer práctico permite acercarles una nueva herramienta, indispensable a lo largo
de este año que cursan Biología 1, y no menos importante para los años que le siguen en
las cursadas de Biología 2 y 3. Por ende, es recomendable que, más allá de comprender
la teoría y dibujar correctamente, logren manipular el microscopio lo suficiente como
para enfocar con autonomía los preparados que se les presenten en el futuro.

¿Cuáles son los objetivos y qué pretendemos lograr en este trabajo práctico?

✔ Que observen la estructura del microscopio, analicen sus características y


reconozcan su funcionamiento.
✔ Que conozcan las normas básicas para el cuidado, manejo y uso del instrumental
óptico. (Armar un preparado y enfocar correctamente)
✔ Que reconozcan los diferentes tipos de células: procariota y eucariota.
✔ Que analicen la estructura y fisiología de los diferentes tipos celulares.
✔ Que realicen un esquema aproximado de lo que están observando.
✔ Que se introduzcan en el estudio de los dominios y reinos de la naturaleza.
✔ Que logren trabajar en grupo de manera colaborativa.

¿Qué materiales necesitan traer?

Lápiz HB (preferentemente), 2 o 3 hojas blancas tamaño A4, regla, compás o


transportador de 360 grados), goma y Guías Teórica y Práctica (OBLIGATORIAS).

Estos materiales son indispensables en todo trabajo práctico, el resto serán provistos
por el laboratorio.

Recomendaciones IMPORTANTES antes de comenzar

 EN LAS MESADAS DE TRABAJO SOLO PUEDEN ESTAR LOS MATERIALESSOLICITADOS


PARA ESTE TP. (LAS GUÍAS DEBEN ESTAR SIEMPRE)
 OBSERVAR E IDENTIFICAR LAS PARTES DEL MICROSCOPIO.
 COMENZAR LA OBSERVACIÓN SIEMPRE CON EL OBJETIVO DE MENOR AUMENTO.
 NO PASAR DEL MENOR AL MAYOR AUMENTO PORQUE PUEDE ROMPERSE EL LENTE Y/O LOS
PORTA Y CUBRE OBJETOS.
 TENER ESPECIAL CUIDADO AL ENFOCAR UN PREPARADO YA QUE PUEDE ROMPERSE O
CAUSAR DAÑOS EN EL LENTE (OBJETIVO)
 SI NO SE SIENTEN CON SEGURIDAD AL MANIPULAR LOS MICROSCOPIOS, CONSULTEN SUS
DUDAS CON EL EQUIPO DE DOCENTES AYUDANTES DE TRABAJOS PRÁCTICOS.
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Procedimiento y observaciones

Este práctico se organiza en 3 partes:

A: Reconocimiento del microscopio y observación de preparados fijos de diferentes


tipos celulares.

B: Observación de preparados frescos realizados por estudiantes.

C: Instrucciones para realizar los dibujos y la elaboración del informe.

PARTE A
1- Conociendo el funcionamiento del microscopio:

a) Con ayuda de la guía teórica, observar y reconocer cada una de las partes del
microscopio y el material que se utiliza para el montaje de los objetos a observar.

b) Dibujar una letra “A” en un trozo de papel, colocar en un porta objeto sobre la platina
del microscopio. Observar y enfocar con los distintos aumentos ¿Cómo se calcula el
aumento total? ¿Por qué la imagen se ve invertida?

2-Observación de células procariotas:

Se utilizará la técnica de coloración de Gram para la identificación de bacterias. Colocar


el preparado en el microscopio y observar. Distinguir entre tipos de bacterias Gram + y
Gram-. ¿Estos 2 grupos de bacterias se diferencian solo por el color?

Pensemos las siguientes situaciones:

1) Una ayudante de laboratorio realizó la tinción de Gram sobre una muestra de yogurt
y no logró observar ningún organismo al microscopio. ¿Por qué piensas que no pudo
observarlos?

2) Si un/x estudiante encuentra en el campo de su microscopio bacterias teñidas de un


color violeta con forma esférica, otras refringentes de forma bastonada y un tercer
tipo de forma espiralada de color rosado. De acuerdo a la morfología y envoltura celular:
¿de qué tipo de bacterias se trata?

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3- Observación de células vegetales:

a) Pulpa de tomate: Observación de Cromoplastos.

Ubicar el porta objetos en el microscopio óptico y observar la muestra.


Identificar las siguientes estructuras: pared celular, citoplasma, cromoplastos y núcleo.

b) Epidermis de cebolla

Ubicar el porta objetos en el microscopio óptico y observar la muestra.

Identificar las siguientes estructuras: pared celular, citoplasma y núcleo. ¿Por qué se
deben teñir con azul de metileno?

c) Epidermis de hoja.

Colocar en el microscopio óptico y observar las capas de células. ¿Qué estructuras


lograste ver?

4- Observación de células animales:

a) Mucosa bucal
Colocar en el microscopio óptico y observar. ¿Qué estructuras visualizaste? ¿Las
células estaban teñidas?

b) Frotis de sangre humana

Células sanguíneas: Colocar en el microscopio óptico un extendido sanguíneo fijo y


observar, tratar de identificar las distintas células sanguíneas.

Al microscopio se verán con un dominio predominante los glóbulos rojos, hematíes o


eritrocitos teñidos de color rojo por la eosina. No tienen núcleo y son más delgados por
el centro que por los bordes. Tienen una forma cóncava-convexa. Los glóbulos blancos o
leucocitos se identifican fácilmente por la presencia de núcleo, teñido de morado por la
hematoxilina. Hay varias clases de leucocitos: los linfocitos que son de tamaño
aproximado al de los glóbulos rojos, tienen un solo núcleo que ocupa casi todo el
glóbulo. Los monocitos que son los leucocitos mayores, poco frecuentes, núcleo grande,
redondo, son los más móviles y su función principal es la fagocitosis (“digieren” células
más grandes como por ej. bacterias) y los polimorfonucleares (que tienen el núcleo
fragmentado o arrosariado) estos pueden ser eosinófilos, con abundantes
granulaciones teñidas de rojo por la eosina, neutrófilos y basófilos. Las plaquetas no son
visibles ya que precisan una técnica especial de tinción.
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PARTE B
1) Observación de cloroplastos en hojas de Elodea sp.

Los cloroplastos son organelas especializadas presentes exclusivamente en las células


vegetales y algas protistas, siendo fundamentales para llevar a cabo su metabolismo.
Estos orgánulos están limitados por una doble membrana y contienen su propio material
genético.

a) Lxs invitamos a montar un preparado:

1- Tomar con una pinza una hoja de Elodea sp., colocarla en el porta objeto y agregar una
gota de agua. Apoyar un borde del cubre objeto sobre el líquido y dejarlo caer sobre el
porta objeto con cuidado y sin presionar, dejarlo deslizar para que desplace el aire.
Colocar en el microscopio y enfocar.

2- Observar el preparado al microscopio y tratar de individualizar una célula con el


tornillo macrométrico para ello deberán deslizar el portaobjeto suavemente (tener en
cuenta que están observando la hoja entera, eso significa que hay varias capas de células
superpuestas que forman los distintos tejidos). Mover el tornillo micrométrico del
microscopio hasta lograr el enfoque preciso.

3- Observar dentro del citoplasma las esferas de color verde: son los cloroplastos.
¿Pudieron observar la estructura interna del cloroplasto? ¿Por qué?

4- Esquematizar una de las células observadas y marcar en ella las siguientes


estructuras (que se hayan visualizado) y sus referencias: pared celular, citoplasma,
núcleo, cloroplastos, cromoplastos, tricomas.

2) Observación de microorganismos acuáticos (algas, protozoos o pequeños


animales):

a) Colocar una gota de agua de cultivo de lechuga, estanque o florero en un portaobjetos.

Colocar el cubreobjetos y observar al microscopio óptico con distintos objetivos


comenzando con el de menor aumento. ¿Se pudo observar algún microorganismo? Si tu
respuesta es SÍ, ¿era pluricelular o unicelular? ¿Identificaron su dominio/reino? Si la
respuesta es SÍ, ¿Cuál/les?

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PARTE C:
En este bloque encontrarás las pautas de entrega para la evaluación del TP.

1- Esquemas individuales.
Elegir 3 tipos celulares diferentes entre los que has observado y esquematizar cada
observación en el campo óptico correspondiente (como el modelo de más abajo*), luego
anotar: el título relacionado, sus referencias (presta atención al sentido de la flecha,
debe señalar hacia la estructura que quieras identificar siguiendo el sentido de las
agujas de un reloj), cada rótulo debe ir por fuera de la circunferencia y no superponer
la imagen que debe ser clara y sin sombrear. Colocar el aumento correspondiente a cada
observación. Indicar en cada esquema: ¿Qué tipo de células observas? ¿Qué
características tienen? y ¿A qué Dominio/Reino pertenecen? Entregar los esquemas
realizados a lxs docentes ayudantes antes de retirarse del salón de TPs.

*Campo óptico

Título:

Referencias

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Informe grupal
Realizar un ESCRITO de TODO LO REALIZADO en el TP. Se espera recibir un texto
narrativo de hasta 3 carillas en donde debe explicarse todo el desarrollo teniendo en
cuenta los objetivos, materiales utilizados, procedimientos y descripción de las
observaciones, también deben responderse a las preguntas presentes en cada parte (A,
B y C) y completar un cuadro comparativo entre todos los tipos de células observados.

El informe debe ser realizado en forma grupal, mínimo 4 integrantes y máximo 6


elegidos por ustedes y entregado el día que indiquen lxs docentes ayudantes.

Preguntas grupales sobre microscopia:

1) ¿Cuáles son las distintas partes del microscopio que atraviesa el haz de luz desde la
fuente hasta formarse la imagen que percibes con tus ojos? ¿En qué contribuye cada
componente del microscopio a la formación de la imagen final? ¿Todos estos
componentes pertenecen al sistema lumínico únicamente?

2) Si pretendo aumentar el tamaño de la imagen con un microscopio óptico. ¿Cuáles serán


los pasos a seguir según la relación aumento - distancia al preparado? ¿Cómo varía el
diámetro del nuevo objetivo? ¿Por qué?

3) Si observaras un supuesto punto en el ángulo superior izquierdo del campo del


microscopio. ¿Dónde se encuentra ese punto en tu preparado? ¿En qué sentido moverías
el preparado para poder enfocar la imagen en el centro del campo?

4) ¿Qué significa que el límite de resolución y el poder resolutivo de una lente sean
inversamente proporcionales? ¿En qué caso podrán apreciarse más detalles de la
muestra?

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Preguntas sugeridas para tener en cuenta a la hora de completar el cuadro


comparativo:

1) De acuerdo a las imágenes de las células observadas al microscopio y los esquemas que
realizaste en la sección anterior, ¿Identificaste diferencias? Si así fue, ¿A qué piensas
que se deban estas diferencias? ¿Para qué resultan útiles los esquemas?

2) ¿Qué estructuras celulares pudiste reconocer en una célula animal al observar al


microscopio luego de teñir con azul de metileno? ¿Por qué no es necesario teñir las
células de pulpa de tomate? ¿Qué elementos celulares pueden reconocerse en una célula
vegetal al observar al microscopio óptico?

4) ¿En qué aumento final se observa cada tipo celular? ¿Qué puedes decirnos sobre los
tamaños celulares si comparamos la célula vegetal y animal con un mismo aumento?

5) ¿Pueden distinguirse fácilmente la membrana celular y la pared celular en una célula


vegetal? ¿Qué crees que sucederá con estas estructuras si la célula se deshidrata
(pierde agua)?

Completar cuadro comparativo

Preparado Tipo celular / Reino Características


observadas

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