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enzimas naturales. Estas prácticas son comunes en los casos en
que los productos van a ser congelados ya que la congelación en
FRUTAS Y sí no detendrá completamente la actividad enzimática.

HORTALIZAS Según el grado en que sea aplicado, el escaldado también


destruye algunos microorganismos, lo mismo que la
pasteurización inactivamente, pero probablemente sea mejor
CONSERVACIÓN, reservar el término de pasteurización para los tratamientos
térmicos destinados específicamente a la destrucción de los
PROCESOS DE microorganismos patógenos.

TRANSFORMACIÓN Y La eficacia del escaldado se puede controlar según la


inactivación o persistencia de dos enzimas ampliamente
extendidas en los vegetales y microorganismos: la catalasa y la
GENERALIDADES peroxidasa. La actividad de la primera se pone de manifiesto
triturando el producto precocido y mezclándole con carbonato
cálcico y peróxido de hidrógeno; un desarrollo gaseoso
(oxígeno) indica una actividad catalásica. La actividad
A. J. Ayala, N. J. 1056931048, Sánchez,B 1049650725. peroxidásica se manifiesta por la aparición de un color de
A. Vargas. Tandioy, A, Y, García. K. M 1014278294 aspecto parduzco, cuando se ponen en contacto con el producto
(Universidad nacional aberta y a distancia guayacol y peróxido de hidrogeno. La catalasa es menos
UNAD,Ajayalar@unad.edu.co, resistente al calor que la peroxidasa; en realidad, ésta última es
obavargasd@unadvirtual.edu.co, la más termorresistente entre las enzimas de deterioro. Se ha
njsanchezpe@unadvirtual.edu.co,kmgarciamar@unad.ed observado que en tratamientos térmicos moderados la
u.co ) inactivación de la peroxidasa es reversible (probablemente por
cambio reversible de los enlaces disulfuro).
Pardeamiento enzimático
Resumen—Estas instrucciones son una guía básica para
Se atribuye a la acción de la enzima Polifenol Oxidasa (PFO)
la preparación de un trabajo para ser presentado ante la sobre compuestos fenólicos, causando su oxidación y
Revista Argentina de Trabajos Estudiantiles*. Este
polimerización, el resultado global de las reacciones es la
documento es en si mismo un ejemplo del formato deseado
generación de una coloración café en el producto pardeado, de
(inclusive este Resumen) y puede ser usado como una
allí el nombre de pardeamiento, (“browning” en inglés). En el
plantilla.
caso de las frutas y vegetales el pardeamiento enzimático resulta
El Resumen esta limitado a 150 palabras y no debe un problema cuando genera coloraciones indeseables en el
contener ecuaciones, figuras, tablas, o referencias. Debe producto, adicionalmente puede llegar a producir perdida de
concisamente enunciar que fue hecho, como fue hecho, proteínas si el ácido ascórbico reacciona con productos
resultados principales, y su trascendencia. intermedios de la reacción de oxidación. A nivel general en el
pardeamiento enzimático ocurre una transformación de los
Palabras claves compuestos fenólicos en polímeros coloreados con tonos
generalmente oscuros, en una primera fase tiene lugar la
Abstract--Basic guidelines for the preparation of a hidroxilación enzimática de los fenoles a la forma orto-
technical work for the Revista Argentina de Trabajos difenoles, luego, estos son oxidados a orto-quinonas que serán
estudiantiles* are presented. This document is itself an las responsables de la generación espontánea de los polímeros
example of the desired layout (inclusive of this abstract) and pardos. En los tejidos vegetales que no han sufrido ninguna
can be used as a template. alteración de tipo corte la PFO y su sustrato, los compuestos
The abstract is limited to 150 words and cannot contain fenólicos, se encuentran separados por las paredes celulares, la
equations, figures, tables, or references. It should concisely enzima se ubica en los cloroplastos y cromoplastos mientras que
state what was done, how it was done, principal results, and el sustrato se encuentra en las vacuolas o células especializadas.
their significance. En el momento en que ocurre un daño al interior de los tejidos,
la enzima y el sustrato entran en contacto en presencia del
Keywords oxígeno generando la cadena de reacciones.

I. INTRODUCCIÓN
E

l escaldado es un tipo de pasteurización que se emplea


generalmente en las frutas y hortalizas con el fin de inactivar las

1*
Revista Argentina de Trabajos Estudiantiles. Patrocinada por la IEEE.
2

Ácido Cítrico, tal como se muestra en la tabla

II. RESULTADOS

1. Experiencia - Reconocimiento de las características


fisicoquímicas de
frutas y verduras

1.1. % de ácido = ∗
100 (ecuación 1)

Donde;

N=Normalidad de hidróxido de sodio


V=volumen hidróxido de sodio consumido en la titulación (ml)
Meq=Miliequivalentes del ácido (en g/mEq)
W= masa de la muestra (g)

2. Experiencia - Determinación de compuestos de interés


presentes en frutas y hortalizas

2.1. El estudiante investiga algunos compuestos de interés de las


frutas y hortalizas, de igual manera expone y describe los
métodos de extracción en la tabla 2.

✔ El ácido predominante del lulo y el mango: es el Compuestos de interés de frutas y hortalizas:

Las frutas y hortalizas son alimentos indispensables en nuestra


alimentación, aportan energía y son ricas en fibra, vitaminas y
minerales, además de poseer Fito nutrientes que ofrecen
protección frente a las enfermedades degenerativas, dando lugar
a una menor mortalidad total y a una mayor expectativa y
calidad de vida. El consumo de al menos,5 raciones de frutas y
hortalizas al día, contribuye a llevar una alimentación
equilibrada, y juega un papel importante en cualquier etapa de
la vida. Son alimentos bien aceptados por las personas mayores,
básicas durante la edad adulta e imprescindible para la
formación de buenos hábitos alimentarios en la infancia y
adolescencia

Las frutas y las hortalizas son los alimentos de la dieta que nos
aportan una mayor cantidad de vitaminas, minerales y otros
3

compuestos bioactivos, englobados en el término genérico de que caracterizan el proceso de senescencia (Limbo, S. y
fitoquímicos. Piergiovanni, L. 2006). Sin embargo, en los productos de IV
gama, la operación de corte provoca la pérdida de la
Aunque los compuestos activos en frutas y hortalizas compartimentalización celular con posterior contacto entre
responsables de esos efectos beneficiosos sobre la salud todavía sustratos y enzimas, que en presencia de O2 determina la
no están definidos, existen gran cantidad de referencias ocurrencia del pardeamiento, caracterizado por la presenciade
bibliográficas que señalan a los siguientes componentes: pigmentos marrones o pardos que afectan la apariencia
carotenoides, vitaminas C y E (compuestos antioxidantes), (Sugumaran, M;2000).
folatos, compuestos fenólicos (flavonoides, cinamatos y Se puede controlar a través del uso de métodos físicos y
taninos), glucosinolatos, fitosteroles y ciertos minerales (Fe, Zn, químicos, y en la mayoría de los casos, se emplean ambos para
Ca). (Infoalimenta, s.f.) logara una mayor eficiencia. Los métodos incluyen la reducción
de temperatura y/o oxígeno, uso de empaque en atmosferas
Entre los carotenoides comunes se encuentran el α-caroteno, ß- modificadas o recubrimientos comestibles, tratamiento con
caroteno, γ-caroteno, y criptoxantina, a las que se les denomina irradiación gama o altas presiones. Los métodos químicos
provitaminas A y son responsables del color amarillo- utilizan compuestos que inhiban la enzima, eliminen sus
anaranjado de algunas frutas y verduras. El ß- es el más sustratos (oxigeno y fenoles) o funcionen como un sustrato
importante como provitamina A preferido. (Bravo, A., & Vélez, P. 2016).

• ¿Químicamente cuál es la función de los ácidos en la


Tabla 2. Métodos de extracción para algunos compuestos de conservación e inhibición del pardeamiento de las frutas y
interés de las frutas y hortalizas hortalizas?

Materias primas Compuestos a obtener El uso de aditivos químicos es la técnica más empleada para la
Uva Polifenoles, resveratrol, reducción del pardeamiento enzimático. Estos productos pueden
antoncianos (variedades rojas), actuar sobre la enzima, el sustrato o los productos de la reacción,
catequinas y procianidinas, por ejemplo, mediante la reducción de las o-quinonas formadas.
derivados del cafeico, flavonoles Dentro de los compuestos que actúan a nivel de las enzimas
aparecen los que modifican el pH y los agentes quelantes. Puesto
Espinaca que la PPO tiene una actividad óptima a valores de pH entre 5 y
Carotenoides (luteína y beta- 7, la acidificación del medio, a través de la utilización de ácidos
caroteno, luteína maszeaxantina), orgánicos tipo GRAS (cítrico, ascórbico, málico, etc.) a valores
flavonoles, derivados del cafeico, de pH por debajo de 4, determina un control del pardeamiento.
folatos En el caso de los agentes quelantes actúan eliminando los iones
Zanahoria cobre del sitio activo de la enzima (Du, Dou y Wu, 2012).
Carotenoides (alfa y beta-
caroteno), cumarinas, derivados Entre los agentes quelantes aparecen el ácido kójico y el ácido
del cafeico, folatos etilendiaminotetracético (EDTA). Otro potente inhibidor de la
actividad de la PPO es el 4-hexilresorcinol que interactúa con la
PPO formando un complejo inactivo incapaz de catalizar la
reacción de pardeamiento (Jiménez y García-Carmona, 1997).
3. Experiencia – Pardeamiento Enzimático Por otra parte, los agentes complejantes tales como
hexametafosfato y la ciclodextrina reducen la actividad de la
• ¿Cuáles son las principales enzimas que afectan los productos PPO al formar un complejo con el sustrato de la enzima
hortofrutícolas, que efectos causan en el producto, en que (Ghidelli et al., 2013).
productos se encuentran presentes y como se pueden controlar?
El pardeamiento enzimático también puede ser controlado a
El pardeamiento enzimático se produce como resultado del
través del uso de agentes antioxidantes y complejantes, capaces
proceso de oxidación de los compuestos fenólicos ao-quinonas,
de formar complejos con los sustratos de la PPO, o de
compuestos altamente reactivos que polimerizan formando
interaccionar con los productos de la reacción. La principal
melaninas de coloración parda. Esta reacción catalizada por
acción de los antioxidantes químicos es evitar el pardeamiento
enzimas del tipo oxidasas, polifenol oxidasa (PPO) y peroxidasa
mediante la reducción de las o-quinonas a sus o-difenoles
(POD).
precursores. Los principales antioxidantes descritos en la
Se encuentran En los productos enteros, los compuestos
literatura son el ácido ascórbico, ácido eritórbico, ácido elágico,
fenólicos (sustratos de la reacción) se encuentran en el
N-acetil cisteína, clorhidrato de cisteína, y glutatión (Arias et al.,
citoplasma de la célula, separados de las enzimas responsables
2007). El ácido ascórbico es el agente reductor más comúnmente
del pardeamiento, que se encuentran unidas a la membrana
utilizado. En lechuga (Lactuca sativa var. capitata), el uso de
tilacoide de los cloroplastos y las membranas mitocondriales. Y
ácido ascórbico redujo la actividad PPO en alrededor de 90 %
productos mínimamente procesados.
(Landi et al.,2013).
En esta situación, al no haber contacto entre enzimas y sustratos,
el pardeamiento puede ocurrir ocasionalmente y estaría asociado
a los cambios en la permeabilidad de las membranas celulares
4

• ¿Qué tipos de reacciones catalizan las fenolasas? y frutas y hortalizas en la tabla 3?


explicarlas.

Enzimas que catalizan las reacciones

• ¿Cómo se puede medir la actividad enzimática de las


polifenoloxidasas?

Utilizando tecnología de envasado activo, con materiales que


incorporan agentes antioxidantes activos contra la
polifenoloxidasa, espectrofotómetría UV/Vis, densidad óptica
(DO). ¿Qué ventajas puede brindar el escaldado a las frutas y
hortalizas?
También mediante el método propuesto por Espin et al., (1995)
utilizando un espectrofotómetro Shimadzu UV 160-A, de doble Las ventajas que nos brinda el escaldado son mejoramiento del
haz, con control de temperatura, equipado con celdas de cuarzo color en el producto, aunque algunos obtienen una disminución
de 1 cm de camino óptico. Se determinó experimentalmente la del mismo, Inactivación de enzimas para prevenir el desarrollo
longitud de onda correspondiente a la máxima absorción para de sabor desagradable y la decoloración, causados por la
ambos pigmentos, formados por la oxidación de catecol presencia de clorofilas y carotenos; lixiviación del almidón lo
por PFO de la fruta. Estos valores están de acuerdo con el rango que evitará productos con aspecto turbio; mayor control de
de máxima absorción (390-480 nm) para quinonas reportado por calidad ya que las partes defectuosas se harán más visibles;
Stauffer (1989). De esta manera, se determinó la actividad de la remoción de aire atrapado inter o intracelular; reducción
enzima midiendo el aumento de absorbancia a 420 nm (pera) y del tiempo de cocinado.
a 400 nm.
¿El tiempo y la temperatura pueden influir?
Si influyen ya que lo que se busca en el escaldado es el
ablandamiento de tejidos la temperatura próxima de
4. Experiencia – Escaldado calentamiento es de 95-100°C en cuanto al tiempo con aire
Actividad caliente o agua, por aproximadamente de 1 a 3 minutos,
dependiendo de la naturaleza y el tamaño del producto
4.1. ¿Qué tiempo de escaldado se recomienda para las concerniente (Steinbuch, 1984; IFT, 1986; Rosenberg y Bolg,
1987). Esto nos da razón a que el tamaño del producto influye
su presentación es la que da el tiempo de escaldado ya que a
menor tamaño menor tiempo de escaldado.

Experiencia 5 – Osmodeshidratación

Introducción

La Deshidratación Osmótica (DO), es una técnica de


conservación que permite la reducción de la humedad e
incrementar el contenido de sólidos solubles. El proceso consiste
en poner en contacto una solución de sales y/o azúcares,
generando una doble transferencia de materia, perdida de agua
y ganancia de solubles, a través de los tejidos buscando el
equilibrio de concentraciones mediante el principio de
transferencia de masa, este fenómeno es conocido como
osmodeshidratación, ya que la fruta y/o verdura pierde humedad
disminuyendo la posibilidad de generar las reacciones de
deterioro que se propician debido a la actividad de agua. Es
importante destacar, los diversos factores que influyen sobre el
éxito de la osmodeshidratación como mecanismos de
conservación, la concentración del jarabe debe ser tal que
5

garantice una diferencia adecuada de concentraciones de forma


que permita la existencia de la fuerza impulsora requerida para Rta: Al revisar cada una de las variables se puede deducir entre
la transferencia de masa. la concentración de NaCl (sal) y temperatura es mas alta el
contenido de humedad de las cebollas reduce notoriamente, y el
Actividad peso de la materia seca (cebolla) aumenta y mucho mas si la
5.2. Selecciona el proceso secado osmótico de alimentos como temperatura es mayor.
se visualiza en el pantallazo.
Realizan la simulación, consideran el procedimiento y las
variables propuestas (NaCl: 5, 10 y 15 % y Temperatura: ¿Por qué pueden influir los sólidos en la masa del producto y en
30, 40 y 50ºC). Analizan los resultados y contestan las siguientes el agente osmótico?
preguntas:
Rta//Porque el agente osmótico debe tener una alta solubilidad
con el producto, para este caso, se empleó NaCl para el proceso
de deshidratado de la cebolla mas la temperatura hace que exista
un alto poder depresor de la actividad de agua.
IMAGEN 1: NACL: 5% Y TEMPERATURA 30°C

Posterior consideran los datos brindados en la tabla 4, para


calcular la pérdida de peso y pérdida de agua, tener en cuenta las
ecuaciones propuestas (2 y 3), se recomienda considerar las
hojas de cálculo en Excel.

IMAGEN 2: NACL: 10 % Y TEMPERATURA 40°C


Donde:

WR (%): Pérdida de peso

WL (%): Pérdida de agua

𝑀𝑜 (𝑔): Peso inicial de la fruta

𝑀𝑓 (𝑔): Peso final de la fruta

𝐻(𝑚𝐿/𝑔): Humedad inicial de la fruta

𝐻𝑓 (𝑚𝐿/𝑔): Humedad inicial de la fruta

IMAGEN 3: NACL: 15 % Y TEMPERATURA 50°C

¿Qué variables influyen en el proceso? Justificar la respuesta TIEMPO VS PERDIDA DE PESO EN 60°BRIX
6

Replica 1

TIEMPO VS PERDIDA DE PESO EN 70°BRIX

Replica 1
Replica 2

Replica 2

TIEMPO VS PERDIDA DE PESO EN 65°BRIX

Replica 1

TIEMPO VS PERDIDA DE AGUA EN 60°BRIX

Replica 1
Replica 2
7

Replica 2 TIEMPO VS PERDIDA DE AGUA EN 70°BRIX

Replica 1

TIEMPO VS PERDIDA DE AGUA EN 65°BRIX

Replica 1 Replica 2

5.6. Analizan el comportamiento de cada cinética y evalúan el


Replica 2 efecto de las diferentes concentraciones de la solución osmótica
en la pérdida de peso y pérdida de agua en el tiempo, finalmente
determinan el mejor o mejores tratamientos para lograr un
producto con humedad intermedia y mejorar las cualidades
organolépticas
Rta// según se puede apreciar en las graficas y la cinética
respectiva, los mejores tratamientos son a 65 y 70° Brix
respectivamente

ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS


Con el desarrollo de la practica se determinó los grados de
acidez del lulo y el mango, la forma como se calcula, la
8

normatividad que rige las frutas, determinando el acido citrico Bravo, A., & Vélez, P. (2016). Efecto de la temperatura y
como el predominante en estas frutas. adición de ácido ascórbico en el pardeamiento enzimático de la
pulpa de mate (Crescentia cujete). Escuela Superior Politécnica
El pardeamiento enzimático catalizado por la polifenoloxidasa Agropecuaria de Manabí Manuel Félix López, Calceta.
(PFO) es uno de los principales problemas en la preservación de
pulpas, mermeladas, jugos y de más. Afectando así la apariencia Sugumaran, M., Nellaiappan, K., & Valivittan, K. (2000). A
general del producto, y por tanto su calidad, pues el color es a new mechanism for the control of phenoloxidase activity:
menudo asociado con la frescura de la fruta y es uno de los más inhibition and complex formation with quinone
importantes atributos de calidad porque es percibido isomerase. Archives of Biochemistry and Biophysics, 379(2),
inmediatamente por el consumidor. El pardeamiento enzimático 252-260.
causa cambios en la apariencia y las propiedades organolépticas
de frutas y vegetales y, además, también una disminución en el Limbo, S. y Piergiovanni, L. (2006). Shelf life of minimally
valor de mercado processed potatoes: Part1. Effects of high oxygen partial
pressures in combination with ascorbic and citricacids on
enzymatic browning. Postharvest Biology and Technology,39,
El escaldado se lleva a cabo antes del método de conservación
254-264.
comúnmente la congelación,este se lleva a cabo en frutas y
verduras de diferentes presentaciones, el efecto del escaldado
ejerce sobre la pared celular la alteración de la textura por el Du, J., Dou, Q. y Wu,J. (2012). Efficacy of phytic acid as an
calor húmedo, el escaldado es usado en las frutas y hortalizas ya inhibitor of enzymatic andnon-enzymatic browning in apple
juice. Food Chemistry, 135, 580 - 582.
que estas son susceptibles a desarrollar cambios durante la
conservación el no emplear este método hace que el alimento
Jiménez, M. y García-Carmona, F.(1997). 4-Substituted
tenga un sabor desagradable por falta de la inactivación de
resorcinols (sulfitealternatives) as slow-binding inhibitors of
enzimas, presentará un aspecto turbio y cambios de coloración
y la cocción será mucho mayor, es por esto que se debe tyrosinase chatecholase activity. Journalof Agricultural
implementar este método. andFood Chemistry,45, 2061-2065.

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