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compartimentos celulares
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Marien Alvear-Marrugo1 , Diego Bolaño Moreno1 , María Leonila Fajardo-Méndez 1 ,
* * * *
Braizon Quintero1 , Natalia Rodríguez Santa1 , David Vergara-Moreno1 , Shirin Wilner1
* malvearm@unicartagena.edu.co; dbolanom@unicartagena.edu.co;
mfajardom@unicartagena.edu.co; bquinterog@unicartagena.edu.co;
nrdodriguezs@unicartagena.edu.co; dvergaram@unicartagena.edu.co;
swillner@unicartagena.edu.co
Abstract
The plasma membrane is found in all cells and separates the inside of the cell from the
outside environment. The cell membrane consists of a lipid bilayer that is semi-permeable,
which means that some molecules can diffuse through the lipid bilayer, but others cannot.
Small hydrophobic molecules and gases such as oxygen and carbon dioxide pass through
membranes rapidly. Small polar molecules, such as water and ethanol, can also cross
membranes, but do so more slowly. On the other hand, cell membranes restrict the diffusion
of highly charged molecules, such as ions, and large molecules, such as sugars and amino
acids. The passage of these molecules depends on specific transport proteins embedded in the
membrane. In this practice, PhysioEx version 8.0 software was used to understand the
mechanisms of cellular transport and permeability. Four types of membrane transport
mechanisms were simulated, defining and internalizing the different concepts associated with
these phenomena and recognizing the driving forces involved in each one.
Resumen
La membrana plasmática se encuentra en todas las células y separa el interior de la célula del
entorno exterior. La membrana celular está formada por una bicapa lipídica que es
semipermeable, lo que significa que algunas moléculas pueden difundirse a través de la
bicapa lipídica, pero otras no. Las pequeñas moléculas hidrofóbicas y los gases como el
oxígeno y el dióxido de carbono atraviesan las membranas rápidamente. Las pequeñas
moléculas polares, como el agua y el etanol, también pueden atravesar las membranas, pero
lo hacen más lentamente. Por otro lado, las membranas celulares restringen la difusión de
moléculas muy cargadas, como los iones, y de moléculas grandes, como los azúcares y los
aminoácidos. El paso de estas moléculas depende de proteínas de transporte específicas
incrustadas en la membrana. En esta práctica se empleó el software PhysioEx versión 8.0 con
el propósito de comprender los mecanismos de transporte y permeabilidad celular. Se
simularon cuatro tipos de mecanismos de transporte a través de membrana, definiendo e
interiorizando los diferentes conceptos asociados a estos fenómenos y reconociendo las
fuerzas impulsoras involucradas en cada uno.
Introducción
Las células animales se encuentran aisladas de su medio externo gracias a una bicapa lipídica
denominada membrana celular [1], esta membrana no es solo una simple barrera que separa
el exterior del interior de una célula y aporta permeabilidad selectiva, ya que también está
estructurada por diferentes constituyentes que pueden ser: lípidos, proteínas e hidratos de
carbono [2,3]. Entre los diferentes tipos de componentes lipídicos están los fosfolípidos, los
glucolípidos y el colesterol conformando así un 50% de la membrana celular [4]. En cuanto a
las proteínas, se sabe que son las que desempeñan la mayor parte de las funciones en la célula
y se clasifican en periféricas e integrales, mientras que los carbohidratos se encuentran en su
mayoría en cadenas laterales de oligosacáridos, unidos a proteínas y también a lípidos (en una
menor proporción), cabe mencionar que la membrana citoplasmática también se encuentra
dotada de un grupo de microdominios funcionales qué facilitan una variedad de procesos
fisiológicos asociados con la superficie celular [2,5].
Las características hidrofóbicas de la membrana son las que controlan el paso estricto de
algunos compuestos no polares y sustancias cómo ácidos grasos, alcoholes, agua, urea, N2,
O2, CO2 y bencenos que tienen la capacidad de atravesar la barrera libremente, lo cual se
considera como un transporte pasivo que no depende de energía. En el transporte pasivo está
la difusión simple (a través de la membrana), la difusión facilitada (a través de una proteína
de canal o portadora) y la ósmosis (a través de una membrana) [3,6,7]. El transporte activo
que requiere de energía, consta de un proceso en el que las pequeñas moléculas e iones viajan
a través de la membrana en contra de sus gradientes de concentración, pero por medio de
proteínas transmembrana, dentro de este tipo de transporte también se encuentran la
endocitosis y exocitosis [7,8,9]. Una vez que las sustancias ingresan en la célula, las
moléculas que sean de menor tamaño deben ingresar al citoplasma, antes de ser
metabolizadas, excretadas o que lleguen a brindar información nuclear. Es por eso que, sin un
transporte citoplasmático eficiente, la mayoría de las moléculas necesarias para el buen
funcionamiento de las células, saldrían antes y no cumplirían sus objetivos metabólicos
dentro de esta [10,11,12].
El programa PhysioEx 8.0 ofrece distintas prácticas de laboratorio que simulan procesos
fisiológicos. El tema empleado en esta práctica fue mecanismos de transporte y
permeabilidad celular, este contiene experimentos para la simulación de difusión simple,
difusión facilitada, ósmosis, filtración y transporte activo [13,14]. Los objetivos de esta
práctica de laboratorio fueron definir e interiorizar los diferentes términos asociados al
transporte de sustancias a través de la membrana celular, y describir los procesos
responsables del movimiento de sustancias a través de esta, reconociendo las fuerzas
impulsoras involucradas en cada uno.
Materiales y métodos
El análisis de los mecanismos asociados al transporte a través de la membrana celular se
realizó mediante el software PhysioEx 8.0. Se simularon cuatro tipos de mecanismos:
difusión simple, presión osmótica, transporte facilitado y transporte activo, descritos a
continuación.
Resultados
Tabla 1. Resultados de la difusión simple con una membrana MWCO de 20 (Run:1) y MWCO
de 50 (Run: 2). No se observó difusión en la membrana de 20, pero la membrana de 50 si tuvo
difusión de Na+/Cl-.
Tabla 2. Resultados de la difusión simple con una membrana MWCO de 20 (Run:3) y MWCO
de 50 (Run: 4). No se observó difusión de Urea en ninguna de las dos membranas.
Tabla 3. Resultados de la difusión simple con una membrana MWCO de 20 (Run: 5) y MWCO
de 50 (Run: 6). No se observó difusión de Albúmina en ninguna de las dos membranas.
Tabla 4. Resultados de la difusión simple con una membrana MWCO de 20 (Run: 5) y MWCO
de 50 (Run: 6). No se observó difusión de Glucosa en ninguna de las dos membranas.
Simulación: Presión osmótica.
Tabla 5. Resultados de la presión osmótica por parte del NaCl a una concentración de 8,00 mM
en diferentes membranas. Solo hubo presión osmótica en las dos primeras membranas.
Tabla 6. Resultados de la presión osmótica por parte de la albúmina a una
concentración de 9,00 mM en diferentes membranas. Hubo presión osmótica en todas las
membranas.
Tabla 7. Resultados de presión osmótica por parte de la glucosa a una concentración de
10 mM en diferentes membranas. Hubo presión osmótica en todas las membranas.
Glucosa 2.00 mM. Los resultados con los datos de las simulaciones de glucosa a una
concentración de 2.00 mM con membranas con 500, 700 y 900 proteínas transportadoras de
glucosa son presentados en la Tabla 8. En las tres simulaciones se pudo observar que se
alcanzó un equilibrio de concentración de glucosa entre los dos recipientes, con una tasa de
difusión que aumentó directamente con la cantidad de PPG en la membrana. Así, la
membrana que permitió el paso más rápido y eficiente de glucosa fue la membrana con 900
PPG.
Glucosa 8.00 mM. Los resultados con los datos de las simulaciones de glucosa a una
concentración de 8.00 mM con membranas con 500, 700 y 900 proteínas transportadoras de
glucosa son presentados en la Tabla 9. Se pudo observar un resultado similar que con la
anterior concentración de glucosa, entre más cantidad de PPG en la membrana, mayor la
rapidez con la que es difundida la glucosa de un recipiente al otro.
Tabla 8. Datos de las simulaciones de transporte facilitado para glucosa 2.00 mM con
membranas con 500, 700 y 900 PPG. Conc. Concentración de glucosa en mM. PPG. Proteínas
transportadoras de glucosa. RD. Recipiente derecho. RI. Recipiente izquierdo. TD. Tasa de difusión.
Núm de PPG en Conc. Conc. Conc. Conc. Equilibrio TD (mM/min)
la membrana inicial RI inicial RD final RI final RD (min)
500 2.00 0.00 1.00 1.00 Si - 43 0.0008
700 2.00 0.00 1.00 1.00 Si - 33 0.0010
900 2.00 0.00 1.00 1.00 Si - 27 0.0012
Tabla 9. Datos de las simulaciones de transporte facilitado para glucosa 8.00 mM con
membranas con 500, 700 y 900 PPG. Conc. Concentración de glucosa en mM. PPG. Proteínas
transportadoras de glucosa. RD. Recipiente derecho. RI. Recipiente izquierdo. TD. Tasa de difusión.
Difusión simple
Debido a esto, al realizar los distintos experimentos con diferentes membranas, ninguna de
ellas parecía lo suficientemente permeable como para que ni la urea ni la albúmina pudieran
difundirse. Los iones de ambas soluciones parecían ser demasiado grandes. Teóricamente,
habría que utilizar más membranas en el mismo montaje experimental para averiguar qué
membrana puede ser elegida selectivamente, ya que debe tener una permeabilidad única para
la urea, de modo que pueda ser eliminada del vaso izquierdo por difusión.
Presión osmótica
1. Explique la relación entre la concentración de soluto y la presión osmótica.
la concentración de un soluto repercute en la entrada y salida de aguda a través de la
membrana y sabiendo que la osmolaridad se establece por la cantidad de agua que al mismo
tiempo genera una presión, podemos decir que existe una relación intrínseca entre la
concentración de un soluto y la presión osmótica.
2. ¿Se generará presión osmótica si los solutos son capaces de difundirse? Explica tu
respuesta. NO, debido a que, si esto sucede, se llegará eventualmente a un equilibrio y por lo
tanto la entrada de agua a la célula pasará por osmorregulación y por lo tanto no habrá
presión osmótica.
3. Debido a que la molécula de albúmina es demasiado grande para pasar a través de una
membrana de peso molecular 100, usted debe haber notado el desarrollo de la presión
osmótica en el recipiente de la izquierda en la ejecución de la albúmina utilizando la
membrana de MWCO 100. ¿Qué es lo que usted piensa que pasaría a la presión osmótica si
reemplaza el agua desionizada en el recipiente de la derecha con albúmina de 9,00 mM en esa
medición? (Ambos vasos de precipitados contendrían albúmina 9,00 mM). Si, debido a que
las concentraciones en ambos recipientes están exactamente iguales por lo tanto la
osmolaridad será la misma para ambas partes y por lo tanto las concentraciones se
mantendrán constantes
Difusión facilitada
Las preguntas de esta sección fueron solucionadas en la parte de este mecanismo en la
discusión.
Transporte activo
1. ¿Qué pasaría si no se dispensa molécula alguna de ATP? La ausencia de ATP bloquea
el mecanismo de transporte activo: en el transporte activo, las sustancias se mueven a través
de la membrana al combinarse con una molécula de proteína transportadora. Este tipo de
proceso se asemeja a una interacción enzima-sustrato. Aquí, la hidrólisis del ATP
proporciona la fuerza impulsadora y, en muchos casos, las sustancias se mueven en contra de
gradientes de concentración, o de gradientes electroquímicos, o de ambos, por lo tanto, en
ausencia de esta molécula, la célula no podrá transportar la molécula que necesita [22].
Referencias
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