INFORME DE LABORATORIO NÚMERO 11

PRÁCTICA No. 12
PERMEABILIDAD DE MEMBRANA

PRESENTADO POR:
PAUL ANDERSON MAURICE ORTIZ TORRES
DIEGO FERNANDO PEÑA VALERO
CRISTIAN YAMID ENRIQUE MOSSO ARIAS

PRESENTADO A:
DOCENTE: CESAR M. BARACALDO

Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia

Facultad Ciencias de la Salud
Primer Semestre
Medicina
INTRODUCCIÓN:

A lo largo del informe se expondrán las diferentes características de las membranas

celulares y su bicapa lipídica con el fin de evidenciar lo que se realizó en la práctica
la cual tuvo como principal objetivo el poder comprender los tipos de interacciones
que se dan a nivel de la membrana y la importancia de estas a la hora de suplir las
necesidades básicas de la célula, ya que la célula necesita recibir constantemente,
materiales para llevar a cabo sus funciones vitales, y también debe desechar los
detritos que se van produciendo a lo largo de varios ciclos, a su vez es importante
resaltar en este informe las características más importantes de una membrana
celular y su permeabilidad selectiva tales como la doble capa de fosfolípidos los
cuales constan de un alcohol al cual se le unen dos ácidos grasos y un grupo de
fosfato, poseen una cabeza hidrofílica y una cola hidrofóbica , proteínas y
carbohidratos que permiten paso de ciertas sustancias al interior o al exterior de la
célula debido a su permeabilidad, que es la facilidad de las moléculas para
atravesarla.

RESUMEN:

Esta práctica se desarrolló con el objetivo de aprender a identificar las diferentes

reacciones e intercambios que se dan a nivel de la membrana lipídica, así como la
importancia de estas a la hora de mantener en correcto funcionamiento las células
de nuestro cuerpo mediante la entrada y salida de sustancias a la célula se verán
regulados por la membrana plasmática y en los que se presentan diversos sucesos
físicos y químicos que llevan a la membrana a sufrir modificaciones estructurales
que afectan el funcionamiento normal de la membrana y llegar a la destrucción total
de la célula, para el buen funcionamiento celular se tiene en cuenta cuatro
principales características que son, la relación con el entorno, la comunicación
celular, la nutrición, la reproducción. Cuando la célula está encuentra en un
ambiente estable se conoce como homeostasis, La regulación del transporte de las
moléculas depende de su gradiente de concentración, las moléculas se mueven
constantemente dependiendo de su energía cinética y se inmersa a un fluido esto
se conoce como movimiento browniano se caracteriza por ser continuo y muy
irregular, otros aspectos que se ven afectados por la membrana es la ósmosis y la
difusión.

Palabras claves:

Membrana permeable, membrana celular, liposoluble, hidrosoluble, hidrofílico,

hidrofóbico, permeabilidad, carga eléctrica, polaridad, masa molar de la molécula,
fosfolípidos, proteínas y carbohidratos.
ABSTRACT:

This practice was developed with the goal of learning to identify the different
reactions and exchanges that occur at the level of the lipid membrane, and the
importance of these when it comes to maintaining correct functioning cells of our
body through the inlet and outlet substance into the host cells will be regulated by
the plasma membrane and in which various physical and events chemicals leading
to membrane undergo structural changes affecting the normal operation of the
membrane and reach the total destruction of the cell present, for proper cell function
takes into account four main features are, the relationship with the environment,
cellular communication, nutrition, reproduction. When the cell is in a stable
environment is called homeostasis.

Keywords: Permeable membrane, cell membrane, lipid soluble, water soluble,

hydrophilic, hydrophobic, permeability, electric charge, polarity, molar mass of the
molecule, phospholipids, proteins and carbohydrates.

MARCO TEÓRICO:

La permeabilidad de las membranas es la facilidad de las moléculas para

atravesarla. Esto depende principalmente de la carga eléctrica y, en menor medida,
de la masa molar de la molécula. Pequeñas moléculas y moléculas con carga
eléctrica neutra pasan la membrana más fácilmente que elementos cargados
eléctricamente y moléculas grandes. (1) La membrana es selectiva, lo que significa
que permite la entrada de unas moléculas y restringe la de otras. La permeabilidad
depende de los siguientes factores:

 Solubilidad en los lípidos: Las sustancias que se disuelven en los lípidos

(moléculas hidrófobas, no polares) penetran con facilidad en la membrana
dado que está compuesta en su mayor parte por fosfolípidos. (2)

 Tamaño: La mayor parte de las moléculas de gran tamaño no pasan a través

de la membrana. Sólo un pequeño número de moléculas no polares de
pequeño tamaño pueden atravesar la capa de fosfolípidos.

 Carga: Las moléculas cargadas y los iones no pueden pasar, en condiciones

normales, a través de la membrana. Algunas sustancias cargadas pueden
pasar los canales proteicos o con la ayuda de una proteína transportadora.(5)

De esta forma, pueden entrar a la célula aquellas partículas que necesite la misma
y se evita que ingresen las que no le sean útiles. De la misma forma, la célula puede
eliminar las partículas que ha generado como desecho. Así se regula la entrada y
salida de sustancias a través de la membrana y se logra el correcto funcionamiento
de la célula.
Para que una partícula pueda atravesar la membrana plasmática debe tener un
tamaño igual o menor a los poros de la membrana, debe tener la carga opuesta a
la carga de la membrana o simplemente tener carga neutra, y si es más grande que
los poros debe ser disuelta en una solución, disminuyendo su tamaño y así podrá
entrar en la célula por medio de la membrana. (3)

Lípidos: Los lípidos son un conjunto de moléculas orgánicas (la mayoría

biomoléculas), que están constituidas principalmente por carbono e hidrógeno y en
menor medida por oxígeno. También pueden contener fósforo, azufre y nitrógeno.
Debido a su estructura, son moléculas hidrófobas (insolubles en agua), pero son
solubles en disolventes orgánicos no polares como la bencina, el benceno y el
cloroformo lo que permite su extracción mediante este tipo de disolventes. A los
lípidos se les llama incorrectamente grasas, ya que las grasas son solo un tipo de
lípidos procedentes de animales y son los más ampliamente distribuidos en la
naturaleza. (4)

Si bien la bicapa es relativamente impermeable a los iones, las células necesitan

desplazar iones y moléculas polares grandes y pequeñas, como aminoácidos y
azucares, a través de las membranas. La permeabilidad de estas últimas a
sustancias de esos tipos se debe sobre todo a actividades de proteínas de
membrana especializadas. Las membranas biológicas que rodean a células,
núcleos, vacuolas, mitocondrias, cloroplastos y otros organelos subcelulares son
semipermeables a diferentes tipos de moléculas.

En respuesta a las condiciones ambientales o a las necesidades celulares

cambiantes, una membrana plasmática puede constituirse en barrera para una
sustancia dada en un momento y promover de modo activo su paso en otro instante.
Al regular el tránsito químico de esta manera, la célula ejerce algún control sobre su
propia composición iónica y molecular interna, que puede ser diferente de la que
corresponde al medio extracelular. (5)

La bicapa lipídica está organizada en forma de micelas, siendo más fácil la

penetración de lípidos a través de la membrana. Se denomina micela al conjunto
de moléculas que constituye una de las fases de los coloides. Es el mecanismo
por el cual el jabón solubiliza las moléculas insolubles en agua, como las grasas.

En la formación de una micela de jabón en agua, las moléculas de jabón (una sal
de sodio o potasio de un ácido graso) se enlazan entre sí por sus extremos
hidrófobos que corresponden a las cadenas hidrocarbonadas, mientras que sus
extremos hidrófilos, aquellos que llevan los grupos carboxilo, ionizados
negativamente por pérdida de un ion sodio o potasio, se repelen entre sí. De esta
manera las cadenas no polares del jabón se ocultan al agua, mientras que los
grupos carboxilo, cargados negativamente, se hallan expuestos a la misma.
De forma semejante, los lípidos polares en disolución acuosa diluida se dispersan
formando micelas. En estas las cadenas hidrocarbonadas se ocultan del entorno
acuoso y forman una fase hidrófoba interna, con los grupos hidrófilos expuestos
en la superficie. Estas micelas pueden contener millares de moléculas de lípidos y,
por tanto, su masa es muy elevada.

En disoluciones acuosas, las moléculas anfifílicas forman micelas en las que los
grupos polares están en la superficie y las partes apolares quedan inmersas en el
interior de la micela, en una disposición que elimina los contactos desfavorables
entre el agua y las zonas hidrófobas y permite la solvatación de los grupos de las
cadenas polares. (6)

PROCEDIMIENTO:

FIGURA 1. Sustancias con las cuales se hicieron prueba de permeabilidad, otros

más como agua destilada e instrumentos como pipetas.

FIGURA 2. Reactivos con los cuales se hicieron prueba de permeabilidad, también

se usó tubos de ensayo, como se muestra en la figura, esto para hacer la prueba.
MATERIALES:

 Mechero.
 Probeta.
 Vaso de precipitado de 500ml.
 Embudo.
 Película de gel.
 Tubos de ensayo.
 Caja de Petri.

REACTIVOS:

 Lugol.
 Reactivo de Benedict.
 Solución de albúmina.
 Ácido nítrico concentrado.
 Agua destilada.
 Reactivo de Biuret.
 Solución de almidón al 1%.
 Solución de glucosa al 30%.
 Solución de nitrato de plata al 1%.
 Solución de cloruro de sodio al 5%.

TÉCNICA:

1. Se preparó la película de gel utilizando gelatina libre de azúcares,

bacteriológica Bioxon 2g en 50ml de agua destilada o gelatina sin sabor. Se
colocó en un molde circular para obtener la forma de éste, procurando que la
capa sea delgada (máx. 5 mm) puede ser una tapa, cristalizador o caja de Petri
colocando entre este y el gel un pedazo de bolsa de plástico para que no pegue
el gel en el recipiente.

2. Una vez que se tuvo la película de gel, se colocó en el embudo y agregó 5 ml

de las soluciones de almidón, glucosa, NaCl y albúmina.

3. Se colocó el embudo con la película de gel en un vaso con agua destilada

hasta tener contacto con la película, al agua se le habrán practicado previamente
las pruebas para almidón, glucosa, proteínas y cloruros, para asegurarse que el
agua no contenga ninguna de éstas sustancias.

4. Se dejó reposar el embudo con el vaso, en posición vertical durante 24 horas.

 FIGURA 3. Película de gel preparada con 24 horas de anterioridad.

5. Los procedimientos para realizar las pruebas de identificación de almidón,

glucosa y proteínas se describe a continuación:

PRUEBA DEL LUGOL PARA IDENTIFICAR ALMIDÓN:

a) Colocar una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.

b) Agregar 2 a 3 gotas de lugol.

c) Observar la reacción. Si la muestra contiene almidón con lugol adquirirá una

coloración azul oscuro (reacción positiva). (7)

PRUEBA DE BENEDICT PARA IDENTIFICACIÓN DE AZÚCARES

REDUCTORES:

a) Colocar una pequeña cantidad de la muestra en un tubo de ensayo.

b) Agregar 1 ml de solución de Benedict.

c) Calentar a ebullición por 2 minutos (en baño maría). Observar la reacción.

d) Si en la reacción existen azúcares reductores con el reactivo de Benedict

se formará un precipitado café-rojizo (reacción positiva) o por lo menos la
solución debe tomar ésta coloración. (8)
PRUEBA DE BIURET PARA IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS:

Es una prueba general para proteínas y polipéptidos de cadena no menor de tres

unidades de aminoácidos.

a) Colocar una pequeña porción de la muestra en un tubo de ensayo y agregar

3 a 5 gotas de reactivo de Biuret.

b) Observar la reacción. Si en la muestra existen proteínas se observará que

el reactivo agregado adquirirá una coloración violeta (reacción positiva). (9)

PRUEBA PARA IDENTIFICAR CLORUROS:

a) Colocar 1 ml de muestra en un tubo de ensayo.

b) Agregar 5 gotas de solución de nitrato de plata.

c) Agitar y observar.

d) La presencia de un precipitado blanco indica la presencia de cloruros. (10)

NOTA: Si el resultado de las pruebas anteriores es positivo indica que la sustancia

se encuentra en la muestra que se está analizando; de no ser así, quiere decir que
no se encuentra, si es negativo. En el cuadro de reacciones de identificación se
indican las características de los resultados de las pruebas para cuando son
positivas y/o negativas.

6. Se tomó cuatro muestras del agua destilada donde estuvo sumergida la película
de gel en tubos de ensayo numerados y efectuar las reacciones para las sustancias
de la mezcla, anotando en cada caso, si la reacción fue positiva y/o negativa de
acuerdo con la información del cuadro que se presenta a continuación:

REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN

SUSTANCIA REACTIVOS REACCIONES REACCIONES

POSITIVAS NEGATIVAS

Glucosa Benedict Coloración o Solución del color del

precipitado café- reactivo.
rojizo
 Almidón Lugol Solución color Solución del color del
azul oscuro reactivo.

Albúmina Xantoprotéica Precipitado Solución del color de la

amarillo huevo albúmina

Péptido mayor a Biuret Solución violácea Solución del color del

2 aminoácidos. reactivo.

Cloruro de Nitrato de Precipitado Solución transparente e

sodio plata blanco incolora.

Informe de resultados:

En el siguiente cuadro anotar los resultados de las pruebas realizadas al agua

donde se sumergió la película de gel.

PRUEBA ANTES (POSITIVA Y/O DESPUÉS (POSITIVA Y/O

NEGATIVA) NEGATIVA)

Benedict Negativa Positiva

Lugol Negativa Positiva

Biuret Negativa Negativa

Nitrato de plata Negativa Positiva

Xantoprotéica Negativa Positiva

OBSERVACIONES:

FIGURA 4: Muestra de almidón. Se FIGURA 5. Muestra de glucosa. La

puede reconocer debido a su cambio presencia de azúcares reductores se
de coloración a un tono azul oscuro, lo muestra por la coloración rojiza de la
que indica presencia de almidón. solución.

FIGURA 6: Muestra de albúmina. El FIGURA 7: Muestra de cloruro de

precipitado amarillento nos indica una sodio. Se observa un precipitado
reacción positiva, esto debido a la blanco grisáceo, lo que indica
reacción Xantoprotéica producida y presencia de cloruro, esto debido al
detección de aminoácidos aromáticos. nitrato de plata.
DISCUSIÓN:

En esta práctica de laboratorio se pudo observar cómo las características, tanto

físicas como químicas, puede afectar la permeabilidad de una molécula a través de
una membrana celular,

Esta práctica se realizó con 4 moléculas, con propiedades tanto físicas como
químicas muy distantes: Glucosa, almidón, albúmina y cloruro de sodio.
Con el cloruro de sodio se observó que una gran parte logró pasar por el gel, a pesar
de ser una molécula relativamente grande, contrario a lo ocurrido con el almidón y
la glucosa, que no pasaron el gel, posiblemente se deba a que no fue suficiente el
tiempo para lograr pasar, una pequeña cantidad de albúmina logró pasar. Hablando
estructuralmente, la glucosa es un aldehído en estado alifático, en estado cíclico de
igual manera tiene muchos extremos hidroxilos, haciéndola polar; el almidón al ser
una molecula muy grande se dificulta más su permeabilidad, entonces puede durar
más tiempo. (10) Al contrario con el cloruro de sodio que es una molécula pequeña,
y la albúmina que es una proteína que transporta fárcamos, pueden entrar a la
membrana celular con cierta facilidad, dependiendo del gradiente de concentración.
Esta práctica nos dio una idea de cómo las sustancias que poseemos o que
ingerimos, son absorbidas por nuestro organismo. (11) (12)

Para agregar, Desai y Park describieron una liberación más lenta del fármaco al
aumentar la concentración del polímero. La viscosidad de la solución de quitosano
utilizada para la formación de las microesferas es un factor que afecta a la velocidad
de liberación. Al aumentar la concentración de quitosano y, con ello, la viscosidad
de la solución, el fármaco queda más atrapado en la matriz polimérica y la velocidad
deliberación es menor. (13)

También es importante tener en cuenta que gracias a que la membrana se organiza

como una micela, haciendo que sea más fácil de penetrar por moléculas no polares,
es decir, hidrofóbicas, permitiendo así que las moléculas que la célula normalmente
usa de energía sean fácilmente penetradas a través de difusión simple.
Adicionalmente, la difusión simple es la forma más sencilla de transporte pasivo. La
mayoría de los fármacos, por su peso molecular bajo a mediano, pueden cruzar la
bicapa lipídica venciendo la barrera de energía de ésta a favor del gradiente
electroquímico. Otra característica importante que debe presentar una molécula
para cruzar por difusión simple es su liposolubilidad, mientras mayor esta sea,
aumentará la velocidad de difusión. La liposolubilidad de una molécula está
expresada por su coeficiente de partición (o distribución) lípido/agua. Todas estas
características fisicoquímicas de las moléculas están incluidas en la ley de Fick, que
predice la velocidad de difusión (ds/dt) de una molécula al cruzar una bicapa lipídica:
ds/dt = (A D β [Ce-Ci]) 1/∆X donde A es el área de la bicapa sobre la cual ocurrirá
la difusión y ∆X la distancia que debe recorrer a través de la bicapa la molécula que
difunde. (14) Las características fisicoquímicas propias de la molécula están
representadas en D, la constante de difusión. Esto tiene su importancia en cuán
rápido se absorbe un fármaco y si es efecto para una situación de urgencia o incluso
de plazo largo, porque si un fármaco tiene menos velocidad de difusión, va a tender
a quedarse en el organismo sin entrar a membranas celulares, retrasando su
proceso y haciéndolo más prolongado. (15)

También, es importante sobre todo para comprender cómo afectan la temperatura

y concentración externa en reacciones fisiológicas a nuestro organismo y los
procesos fisiológicos que desencadena para establecer un equilibrio y una correcta
homeostasis. Siendo si hay más temperatura, hay más absorción. (16)

Para resumir, moléculas cuyo tamaño molecular sea pequeño, cuya estructura sea
no polar y cuya carga sea neutra va a penetrar la membrana celular con más
facilidad que otras moléculas cuyas algunas a todas las anterior características no
estén presentes. Siendo importante este concepto en administración de fármacos,
debido a que las anteriores características dan más efectividad de absorción y
perduración.

CONCLUSIONES:

De la práctica de laboratorio realizada, se pudo concluir lo siguiente:

 El transporte de sustancias a través de la membrana depende de varios

factores tales como: Las concentraciones tanto dentro como fuera de la
célula, la composición y estructura de la sustancia que vaya a atravesar, o el
tamaño de la molécula en cuestión. (17) (19)

 Las sustancias con menor peso molecular, realizan una difusión más fácil y
rápida. (18)

 La membrana celular es una bicapa lipídica, por tanto, tiene más afinidad a
sustancias más liposolubles, es decir, no polar (hidrofóbica).

 La membrana plasmática, constituye una barrera selectiva, regulando el paso

de agua, moléculas y otras sustancias, además, por su propiedad
semipermeable, posibilita la interacción entre los medios intracelular y
extracelular. (19) (17)

 La capacidad que tiene la célula de ser semipermeable posibilita la buena

interacción extracelular y una adecuada respuesta aciertos estímulos
externos de los cuales depende la célula para su subsistencia.

 Es de vital importancia conocer el mecanismo de ósmosis celular y la

concentración osmótica de ciertas sustancias químicas, pues con ello
 podremos establecer rangos de isotonicidad permisibles en el organismo y
una buena distribución de solutos en el mismo, esto mayormente en el caso
de NaCl.

 Un parámetro para medir el grado de difusión de las moléculas sería el tener

en cuenta su peso molecular, siendo así, un compuesto de menor peso
molecular, penetra más fácil las membranas.

CUESTIONARIO:

1) De las sustancias utilizadas incluyendo el agua, decir cuáles son de alto peso
molecular y de bajo peso molecular.

Alto peso molecular Almidón y albúmina.

Bajo peso molecular Cloruro de sodio y glucosa.

2) Indicar qué sustancias se encontraban en ambos lados de la membrana de gel

en el siguiente esquema:

Interior Exterior

Cloruro de sodio Almidón

Albúmina Glucosa

3) ¿Qué sustancias atravesaron la membrana de gel de afuera hacia adentro, así

como de dentro hacia fuera?

4) ¿Por qué dichas sustancias atravesaron la membrana?

Por su pequeña masa molecular, su no polaridad y su liposolubilidad. (21)
5) ¿Qué tipo de transporte se efectuó a través de la membrana durante el
experimento?
Difusión simple, ya que no se necesitó algún gasto de energía y va a favor de
gradiente, es decir, de mayor a menor concentración hasta obtener una
homeostasis. (22)

REFERENCIAS:

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