Extracción casera de ADN

de banano y saliva
Introducción
La información hereditaria básica que constituye las células está ubicada en el material
genético nominado ácido desoxirribonucleico (ADN). Este material genético puede ser
utilizado como herramienta útil en procedimientos de identificación genética, pruebas de
paternidad, entre otros. El ADN de la célula puede ser separado de otros componentes
celulares y ser aislado a partir de múltiples técnicas de extracción como la extracción fenol-
cloroformo o salting-out. Las pruebas se diferencian principalmente en la adición de
reactivos que agilizan el proceso (salting out), o que conservan el material genético por más
tiempo (fenol-cloroformo). No obstante, la extracción de ADN es una técnica simple y de fácil
manejo, de forma que puede incluso llegar a realizarse de una forma artesanal, con
elementos preparados de forma casera.

Objetivos:
Familiarizarse con el proceso de extracción de ADN a partir de células de origen animal o
vegetal.
Entender el papel que desempeña cada una de reactivos y procesos empleados en la
extracción del ADN.

Materiales
Banano (Musaceae)
Muestra de saliva
Licuadora
Gasa o algodón
Tasa para medir 100 ml
Agua destilada (si no tiene agua destilada o mineral, puede usar agua del grifo)
Lavaplatos o detergente líquido
Sal de cocina
Colador
Alcohol a -20°C * (idealmente al 95% pero sirve el Alcohol etílico al 70%)
Una cuchara sopera
Zumo de piña

*El punto de congelación está por debajo de esta temperatura.

 Procedimiento para extraer el ADN de banano
1. Preparación de solución jabonosa: Preparamos una solución salina-jabonosa
compuesta con 100 ml de agua (media taza), 10 ml de lavaplatos o detergente (1
cucharada) o 20 ml de champú sin acondicionador (dos cucharadas) y 13g de sal de
cocina (una cucharada).
2. Pelar el Banano y licuarlo o macerarlo (en una bolsa plástica o mortero) y verterlo en
un recipiente.
3. Adicione la solución salina –jabonosa al banano triturado. Continúe el proceso de
romper el banano (podemos colocar el preparado en un baño de María a 37ºC
durante 15 minutos para facilitar la extracción).
4. Pase la mezcla por un colador o papel de filtro para retirar la parte más gruesa del
macerado de la fruta y luego, a través de una gasa o trozo de algodón, hasta obtener
5ml del líquido filtrado en un frasco de 50 ml.
5. Luego filtre nuevamente la mezcla para quitar sólidos, proteínas y lípidos
remanentes.
6. Vierta de forma delicada etanol frío sobre el filtrado obtenido, sin alterar o agitar el
filtrado. Deje reposar unos minutos. Debe aparecer una capa blanquecina gelatinosa
que corresponde al ADN.
7. Puede introducir un palillo de madera, con movimientos circulares sutiles para
atrapar el ADN.

Preguntas
Luego de leer sobre el proceso de extracción de ácidos nucleicos,
1. ¿Cuál cree que sea el papel de la trituración?
2. ¿Cuál es el papel del detergente?
3. ¿Cuál es el papel de la sal?
4. ¿Para qué sirve el etanol en este proceso y cómo funciona?

Procedimiento para extraer ADN de saliva

1. Para obtener una muestra de saliva realice un enjuague bucal con agua durante 30 a
40 segundos y luego vierta el enjuague en un vaso. Evitar hacer este procedimiento
justo después de haber comido o de haberse lavado los dientes.
2. Prepare solución salina mezclando en un vaso unas 4-5 cucharadas soperas (unos 120
ml) de agua destilada o mineral y media cucharada sopera de sal común hasta
disolver la sal completamente.
3. En otro vaso, prepare solución jabonosa mezclando una cucharada de lavaplatos o
detergente líquido y 3 cucharadas de agua destilada o mineral.
 4. Tomar el vaso que contiene el enjuague, agregue dos cucharadas de zumo de piña y
mezcle.
5. A la mezcla de zumo de piña y saliva, adicione una cucharada de solución jabonosa y
una cucharada de solución salina.
6. Seguidamente, adicione alcohol frío (el doble de volumen de alcohol que de mezcla),
vertiéndolo suavemente por las paredes del frasco.
7. Dejar reposar hasta que en la interface de ambas soluciones aparezca pequeñas
fibras blanquecinas, correspondientes al ADN.
8. Pesque el ADN con un palillo de madera.

Preguntas
1. ¿Para qué sirve la disolución salina que se puso en la mezcla?
2. ¿Para qué se añade el zumo de piña?
3. ¿Cuál es el papel del alcohol?

Extracción virtual de ADN

Siga la siguiente simulación o protocolo virtual de extracción de ADN, donde se familiarizará
con el procedimiento en el laboratorio.

https://learn.genetics.utah.edu/content/labs/extraction/?fbclid=IwAR2QxG9zu498uthZTs_
R5Nyxf4EyNO_cC1wgqrvUUjS6mH2wOP9G6i7duTc

Preguntas
1. A pesar de las diferencias, ¿qué procesos químicos son comunes a los tres
procedimientos de extracción de ADN?
2. ¿Cree que alguno de estos procedimientos es idóneo para extraer ADN de todo tipo
de material vegetal? Investigue y argumente.