DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BÁSICAS

GESTION DEL CONOCIMIENTO VERSIÓN: 02

APRENDIZAJE Y DOCENCIA PAGINA No. 1
MANEJO DEL COMPONENTE PRÁCTICO
DIVISION SALUD
AREA CIENCIAS
MICROBIOLÓGICAS ESPACIO ACADÉMICO: MICROBIOLOGIA
TÍTULO DE LA PRÁCTICA:
GUÍA LABORATORIO
IDENTIFICACION DE PARASITOS
AUTOR GLORIA ELSSY VALENCIA PRINCE- BLC- MSc

1. INTRODUCCIÓN
El diagnóstico de las enfermedades parasitarias, como el de cualquier otra enfermedad inicia con la sospecha
clínica basada en la anamnesis (datos demográficos, laborales, familiares, etc.) y la exploración física. Sin
embargo, para identificar al agente causal (es decir realizar el diagnóstico etiológico) de determinada
enfermedad parasitaria, se pueden emplear múltiples pruebas, unas más específicas que otras. La elección del
método depende de múltiples factores como, por ejemplo: ubicación del parásito, número, tiempo de evolución
del cuadro clínico, oportunidad de los resultados, costos de la prueba, acceso a tecnología, etc.
El diagnóstico de las parasitosis es uno de los complementos necesarios para llevar a cabo, en forma adecuada
y oportuna, el tratamiento de las mismas. Entre las técnicas utilizadas para tal efecto están los métodos directos,
en los cuales se identifica a los parásitos o fases parasitarias en productos biológicos del paciente y que se
conocen como exámenes parasitológicos o parasitoscópicos. Dentro de los métodos directos encontramos el
examen macroscópico y microscópico tanto en fresco como por Tinciones, los cultivos en medios específicos, y
la inoculación experimental. Otras técnicas son las que llevan a cabo la identificación indirecta de los parásitos;
aquí se encuentran la mayoría de las inmunológicas, de detección serológica tanto de antígenos como de
anticuerpos; por último, están las técnicas moleculares.
2. OBJETIVOS
Objetivo general:

• Distinguir los métodos de identificación de parásitos que afectan la salud humana.

Objetivos específicos:

• Probar los diferentes métodos directos de identificación de parásitos

• Detallar las diferencias entre los métodos de diagnóstico de enfermedades parasitarias.

3. ACTIVIDAD DE PRE-LABORATORIO:
Previo al desarrollo de la práctica y para presentar al inicio del Laboratorio desarrollar la siguiente
actividad:
❖ Diseñe un MAPA MENTAL que muestre la clasificación de los parásitos que puedan afectar
la salud humana y relacione las técnicas que permitan diagnosticar los parásitos

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 4. MARCO TEORICO

METODOS PARA INVESTIGACIÓN DE PARASITOS

METODOS DIRECTOS
Los exámenes parasitoscópicos se pueden clasificar según diversos parámetros, y si se toma en cuenta el tipo y
procedencia del producto biológico en:
a) Coproparasitoscópicos (CPS) mediante los que se diagnostican las parasitosis intestinales y cuyo
producto biológico es la materia fecal
b) Los de cavidades, en los que los productos biológicos son exudados
c) Los tisulares, en los cuales los productos biológicos pueden ser una biopsia, el raspado de una
úlcera, sangre, secreciones de lesiones, etcétera.

Estos métodos permiten demostrar el agente causal o sus componentes; constituyéndose como la prueba “gold
estándar” de la investigación parasitológica, tienen una característica que son especiales para la fase aguda de
la enfermedad. Dentro de estos métodos directos se incluyen:
✓ La observación microscópica y macroscópica de las formas parasitarias
✓ El cultivo
✓ La detección de antígenos parasitarios
✓ Técnicas de biología molecular para detección de secuencias nucleotídicas específicas del parásito
directamente sobre la muestra.

METODOS INDIRECTOS
Detectan componentes de la respuesta inmunitaria (anticuerpos) desencadenada por el parásito (antígenos).
Se basan en la realización de pruebas serológicas.
TIPOS DE MUESTRAS PARA LA INVESTIGACIÓN DE PARÁSITOS:
Para la investigación de parasitosis se pueden utilizar diversas muestras cuya escogencia dependerá del parásito
en cuestión, así como de su ciclo de vida y los tejidos parasitados.
ALGUNOS PARASITOS DE IMPORTANCIA PARA LA SALUD HUMANA
Algunos agentes parasitarios que pueden ser objeto de investigación en aguas de consumo pueden ser algunos
protozoarios como: Entamoeba spp, Giardia lamblia, Cryptosporidium spp. y algunos helmintos como: Áscaris
lumbricoides, Trichiuris trichiura, Taenia solium, Enterobius vermicularis, etc. En aguas estancadas (naturales,
piscinas, sistemas de calefacción y refrigeración, etc.), pueden vivir facultativamente en forma parásita: amibas
de vida libre como Acanthamoeba sp. y Naegleria sp. que suelen provocar inflamaciones de mucosas.
A continuación, vamos a describir rápidamente algunos de los parásitos de importancia clínica para odontología
como para optometría.
Entamoeba gingivalis: Vive en la boca especialmente cuando existen procesos supurativos o inflamatorios. No
produce patología, no requiere tratamiento, su presencia indica la necesidad de mejorar la higiene oral. El
diagnostico se establece al observar microscópicamente los trofozoítos, presentes en muestras de placa

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bacteriana principalmente, en el montaje de preparaciones en fresco, donde incluso puede apreciarse el
movimiento característico de los trofozoítos. También se puede apreciar en preparaciones de frotis teñidos con
coloraciones especiales como gomori metenamina de plata (GMS), ácido peryódico – Schiff (PAS), hematoxilina
férrica, giemsa y papanicolaou; pero estos necesitan de una experticia para su identificación. No se conoce un
estadio de quiste para Entamoeba gingivalis; los trofozoítos miden entre 10 y 20 µm. Los trofozoítos poseen un
solo núcleo que contiene un cariosoma pequeño de ubicación central y una fina cromatina periférica. El
citoplasma a menudo contiene leucocitos, bacterias y otros desechos ingeridos, muy raramente glóbulos
rojos. Los trofozoítos también pueden extender los pseudópodos agranulares mientras que el citoplasma de la
célula principal permanece en apariencia granular. Los especímenes vivos pueden moverse rápidamente. Ver
Figura 1.
Figura 1. Entamoeba gingivalis

Tomado de https://www.lifeder.com/entamoeba-gingivalis

Trichomona tenax: Es un parasito flagelado con hábitat preferentemente en las encías y nasofaringe; se
incrementa en condiciones de mala higiene bucal. Se aísla en la saliva, surco gingival enfermo, margen ulcerado
de pacientes con infección de Vincent. Este protozoario vive en el cálculo dental y forma parte integrante de la
microbiota que conforma la placa dental subgingival alrededor de los dientes que se encuentran en la cavidad
bucal humana. También es posible encontrarlo en las células de la mucosa necrótica de los márgenes gingivales
de las encías, en los abscesos purulentos de las amígdalas y puede sobrevivir durante varias horas en el agua de
beber. Este protozoo presenta cuatro flagelos anteriores libres y un flagelo posterior o recurrente que se
encuentra pegado a una membrana ondulante y a la cual envuelve por los lados. Estos flagelos se originan del
complejo cineostomal. Ver Figura 2.
Figura 2. Trichomona tenax

Tomado de https://es.wikipedia.org/wiki/Trichomonas_tenax
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Toxoplasma gondii: Es un parasito de trasmisión oral y congénitamente; produce toxoplasmosis. Este protozoo
parásito intracelular obligado de distribución mundial. Tiene tres formas de presentación: Ooquistes,
Taquizoítos y Bradizoitos. Los ooquistes se producen en el hospedero definitivo y son excretados al medio
ambiente, allí pueden permanecer hasta 18 meses en la tierra húmeda. Los humanos pueden adquirir la
infección por ingestión de ooquistes desde las heces de gato o por ingestión de carne infectada o bien por
infección intrauterina, transfusión o trasplante de órganos. Posee una enorme capacidad para invadir células
del anfitrión gracias a la forma invasora móvil (taquizoíto o trofozoítos) caracterizada por un complejo apical
exclusivo, desde el punto de vista evolutivo, y un mecanismo de motilidad basado en actina; después de varios
ciclos de replicación pueden diseminarse por vía sanguínea para infectar otros tejidos. Los taquizoítos se
transforman en bradizoitos para formar quistes, una vez concluida la fase aguda de la infección. Ver Figura 3.
Figura 3. Formas de presentación de Toxoplasma gondii

OOQUISTES TAQUIZOITOS BRADIZOITOS

(Formas tisulares quísticas)

Tomado de https://es.wikipedia.org/wiki/Toxoplasmosis

Acanthamoeba sp: Especie patógena humana. Produce meningoencefalitis amibiana y cuadros oculares en
personas que usan lentes de contacto. Es un género de Amoebozoa, uno de los protistas más comunes del
suelo y también frecuentes en agua dulce y otros hábitats. Las células son pequeñas, usualmente de 15 a 35 μm
de longitud y de forma oval o triangular cuando se mueven. Los seudópodos forman un claro lóbulo semiesférico
en la parte anterior y tiene varias extensiones filosas cortas a los lados del cuerpo. Esto le da una apariencia
espinosa. Se pueden encontrar en estadio de Trofozoíto y en forma de Quiste. Ver Figura 4.
Figura 4. Estadios de Acanthamoeba sp
TROFOZOITO QUISTE

Tomado de https://bioinformaticaupf.crg.eu/2009/projectes09/Dx/introduccio.html

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 5. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS:
5.1 Materiales • Toallas de papel
• Papel de arroz 5.3 Equipos
• Láminas portaobjetos
• Láminas cubreobjetos • Mechero
5.2 Reactivos
• Palillos mondadientes • Microscopio óptico
• Lugol de parasitología
• Escobillones estériles • Recipiente material
• Solución salina al 0,9%
• Bajalenguas contaminado
• Solución limpiadora de
• Lápices marcadores
lentes
• Fósforos

6. PROCEDIMIENTO
A continuación, se plantean a modo de resumen los procesos que serán desarrollados durante la práctica. En
el informe de laboratorio se deben declarar los materiales y métodos empleados a modo de secuencia. Ver
Figura 5
Figura 5. Resumen Metodología Laboratorio Identificación Parásitos

Observacion
formas moviles
MONTAJE Agua de Charco
Observacion
Microscopica Observación
IDENTIFICACION Examen Directo
Placa Dental
PARASITOS
Preparaciones
Observacion Helmintos
Macroscopica
Acaros

Autor: Valencia-Prince, Gloria. 2021

Cada alumno realizará el montaje del examen directo de las formas microscópicas de los parásitos en forma de
quistes y trofozoítos, con solución salina para observarlos directamente y Lugol para teñir sus estructuras. Ver
Figura 6.
Figura 6. Montaje Frotis Observación Parásitos

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 Autor: Valencia-Prince, Gloria. 2021

A. Frotis en fresco de Agua de Charco (Observación formas móviles)

a. Marque la lámina portaobjetos
b. Coloque a la izquierda de la lamina portaobjeto una gota del agua de charco
c. Coloque a la derecha de la lamina portaobjeto una gota de Lugol, coloque una gota de agua
pequeña y mezcle
d. Coloque laminillas sobre las preparaciones
e. Observe con el objetivo 40 X 10. Anote y dibuje los resultados
B. Frotis en fresco con solución salina y tinción con Lugol para observar parásitos en la placa dental
a. Marque la lámina portaobjetos
b. Coloque a la izquierda de la lámina portaobjeto una gota de solución salina al 0,9%, con el palillo
de dientes estéril, tome una muestra de la placa dental y haga una extensión de esa muestra
sobre la superficie del portaobjetos; mézclela
c. Coloque a la derecha de la lámina portaobjeto una gota de Lugol, con el palillo de dientes estéril,
tome una muestra de la placa dental y haga una extensión de esa muestra sobre la superficie del
portaobjetos; mézclela
d. Coloque laminillas sobre las preparaciones
e. Observe con el objetivo 40 X 10. Anote y dibuje los resultados
C. Observación macroscópica de Parásitos
a. Observe las características de los especímenes
b. Anote y dibuje lo observado

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 7. RESULTADOS
Los resultados se presentarán de acuerdo con los registros gráficos (dibujos y fotografías) de cada una de los
procedimientos realizados.
Registrar resultados en tabla: PRESENTAR RESULTADOS EN ESTA TABLA

SOLUCION SALINA LUGOL

TIPO DE MUESTRA

DIBUJO DE OBSERVADO
(color)

DESCRIPCION DE LAS
CARACTERISTICAS DE LO
OBSERVADO

8. ACTIVIDAD DE PROFUNDIZACIÓN
La actividad de profundización debe ser incluida en la sección de Anexos del Informe de Laboratorio. Resolver
los siguientes interrogantes:
a) Diligencie la siguiente tabla indicando tres de los parásitos que pueden ser encontrados allí

Tipo de muestra Parásitos que pueden ser investigados

(nombre 2parásitos)
SANGRE 1.
2.
MATERIA FECAL 1.
2.
CAVIDAD BUCAL 1.
2.

b) Ejercicio de aplicación. Diligencie la tabla con los datos faltantes sobre el parasito investigado y formas
parasitarias observadas.
Parásito investigado Forma parasitaria Características Cuadro clínico
Observada (IMAGEN)
Entamoeba gingivalis

Trichomonas tenax
Demódex folliculorum

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 Trichuris trichiura
Áscaris lumbricoides
Giardia intestinalis

c) Esquematiza 3 protozoarios (un sarcodario, un flagelado y un ciliado) e indica en cada uno de ellos las
estructuras características de cada uno

9. BIBLIOGRAFÍA
• Castrillón, J. Orozco, L. Acanthamoeba spp. como parásitos patógenos y oportunistas. Revista Chilena
Infectología. Volumen 30. N°2.
• Mendía de Campollo, E. 2014. Manual Practicas de Microbiología I. Universidad Mariano Gálvez.
Guatemala.
• Olivas, E. 2012. Manual de Practicas -Laboratorio Microbiología. Universidad Autónoma de ciudad de
Juárez. México.
• Pardi, G. 2002. Trichomonas tenax: protozoario flagelado de la cavidad bucal - consideraciones
generales. Acta odontológica venezolana. Volumen 40. N°1.
• Rendon, M. 2008. Manual de microbiología I. Universidad de Guayaquil. Ecuador.
• Sanz Cervera, S. 2011. Prácticas de Microbiología. Universidad de la Rioja. España. ISBN 978-84-0870-4
• Silva de Duarte, M. 2009. Manual de Laboratorio Microbiología. Editorial Santo Tomas. Colombia.

WEBGRAFIA
• Gil, M. (9 julio 2021). Entamoeba gingivalis: características, taxonomía, morfología.
https://www.lifeder.com/entamoeba-gingivalis/
• López. (9 julio 2021). Microbiología y parasitología. Toxoplasma gondii. https://sites.google.com/a/info-
farmacia.com/info-farmacia/microbiologia/toxoplasma-gondii