Ingeniería Química

Asignatura: Diseño de reactores

Tema: Biorreactores

Unidad II
Biorreactores

Un biorreactor es un recipiente con condiciones controladas que fomentan el

crecimiento del microorganismo que se va a cultivar. Dichas condiciones son:
PH, presión, agitación, oxigenación, temperatura y concentración de gases.
Biorreactores

En la biosíntesis, las células (biomasa) consumen nutrimentos para crecer, producir

mas células y producir bioproductos, la célula logra estas reacciones de conversión
de nutrimentos en productos y energía utilizando enzimas (catalizadores) distintas
en una serie de reacciones para elaborar productos metabólicos, estos productos
pueden permanecer dentro de la célula (intracelulares) o ser secretados
(extracelulares), en el primer caso, las células deben romperse (lisarse) para
purificar el producto separándolo del caldo.
Biorreactores

De forma general, la reacción biológica de crecimiento de un microorganismo

aerobio es:

𝐹𝑢𝑒𝑛𝑡𝑒 𝐹𝑢𝑒𝑛𝑡𝑒 𝐹𝑢𝑒𝑛𝑡𝑒 𝐹𝑢𝑒𝑛𝑡𝑒

𝐶é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 + + + + 𝐶𝑂2 + 𝐻2 𝑂 …
𝑑𝑒 𝐶 𝑑𝑒 𝑁 𝑑𝑒 𝑂 𝑑𝑒 𝑓𝑜𝑠𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑝𝐻,𝑇

… + 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠 + 𝑚á𝑠 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠

Aunque puede representarse también de forma más simplificada como:

𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 + 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 → 𝑚á𝑠 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 + 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠

Fases del crecimiento bacteriano
Fases del crecimiento bacteriano

Fase 1. Latencia: las células se ajustan a su nuevo entorno, durante este periodo,
las células sinterizan proteínas de transporte para llevar el sustrato al interior de la
célula, sinterizan enzimas para aprovechar el sustrato e iniciar la copia del material
genético de la célula

Fase 2. Fase de crecimiento exponencial: durante esta fase la velocidad de

crecimiento de las células es proporcional a su concentración.

Fase 3. Fase estacionaria: no hay crecimiento celular debido a la escases de

nutrientes

Fase 4. Fase de muerte: Se han agotado los nutrientes o hay presencia de

sustancias que resultan toxicas para las células
Velocidad de reacción biológica (reacción única) Modelo de Monod
En una reacción biológica son varios los sustratos que participan en ella, las
bacterias crecen y utilizan muchísimas enzimas para llevar a cabo la reacción
biológica deseada.

Monod en 1942 desarrolló una ecuación muy simple para representar los procesos
biológicos que funciona en general muy bien. Para ello asumió que si bien pueden
existir muchos sustratos, uno de ellos será el limitante. En este modelo se asume
que la producción de biomasa depende exclusivamente de la concentración de este
sustrato limitante. Para una reacción biológica del tipo αS→γX, la velocidad de
crecimiento de biomasa puede representarse como sigue:

𝐶𝑠
𝜇 = 𝜇𝑚𝑎𝑥
𝐾𝑆 + 𝐶𝑠
Velocidad de reacción biológica (reacción única) Modelo de Monod

𝐶𝑠
𝜇 = 𝜇𝑚𝑎𝑥
𝐾𝑆 + 𝐶𝑠

Como puede observarse la ecuación anterior, es análoga a la de Michaelis-

Menten. En efecto se deriva de suponer que una única enzima con una
cinética del tipo Michaelis - Menten es la responsable del consumo de S y
conjuntamente que la cantidad de enzima o bien su actividad catalítica es lo
suficientemente baja como para controlar el crecimiento (pueden haber otras
reacciones enzimáticas, pero sólo controla una de ellas).
Cinetica del crecimiento microbiano

La cinética de crecimiento celular, para la mayoría de los casos viene dada por la ecuación de Monod

𝑟𝑔 = 𝜇𝐶𝑐

Donde 𝐶𝑐 es la concentración de células y 𝜇 es la velocidad de crecimiento especifica,

Si el producto inhibe el crecimiento bacteriano, la cinética de crecimiento microbiano suele expresarse

como:

𝑟𝑔 = 𝑘𝑜𝑏𝑠 𝜇𝐶𝑐

Donde
𝑛
𝐶𝑝
𝑘𝑜𝑏𝑠 = 1− ∗
𝐶𝑝

Donde 𝐶𝑝∗ es la concentración de producto en la que ya no hay crecimiento celular y n es una

constante empírica determinada de forma experimental
Cinética de muerte celular

La cinética de muerte celular viene dada por

𝑟𝑑 = 𝑘𝑑 + 𝑘𝑓 𝐶𝑓 𝐶𝐶

Donde 𝐶𝑓 es la concentración de sustancias toxicas para la célula, 𝑘𝑑 y 𝑘𝑓 se

refieren a constante por muerte natural y a una constante por muerte por toxinas
respectivamente
Estequiometria del crecimiento celular

La estequiometria del crecimiento celular es compleja y varia con la relación

microorganismos/nutrientes y el entorno del medio (pH, temperatura), sin embargo,
si se considera que solo un nutriente contribuye al crecimiento celular puede
plantearse el siguiente modelo

𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 + 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 → 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜𝑠 + 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠

𝑆 → 𝑌𝑐/𝑠 𝐶 + 𝑌𝑝/𝑠 𝑃
Donde

𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 𝑛𝑢𝑒𝑣𝑎𝑠 ∆𝐶𝐶

𝑌𝑐/𝑠 = =−
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑎 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑟 𝑛𝑢𝑒𝑣𝑎𝑠 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 ∆𝐶𝑆
 𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜
𝑌𝑝/𝑠 =
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑢𝑡𝑖𝑙𝑖𝑧𝑎𝑑𝑎 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑟 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜

Además de la masa necesaria para la formación de producto se debe considerar la

masa de sustrato necesaria para el mantenimiento de las células

La cinética de consumo de nutrientes para mantenimiento viene dada por

𝑟𝑠𝑚 = 𝑚𝐶𝑐

La cinética de formación de producto depende en que fase del crecimiento celular se

forma el producto, cuando el producto se genera durante la fase de crecimiento se
tiene:

𝑟𝑃 = 𝑌𝑝/𝑐 𝑟𝑔
La pregunta ahora es ¿Cómo pueden estimarse los coeficientes de rendimiento?
para ello considere el siguiente ejemplo:

En un biorreactor intermitente utilizado para la producción de etanol por medio de

levadura de Saccharomyces cerevisae y glucosa como fuente de nutrientes se
obtuvieron los siguientes datos:
Tiempo (hr) Células (g/L) Glucosa (g/L) Etanol (gr/L)

0 1 250 0

1 1.37 245 2.14

2 1.87 238.7 5.03

3 2.55 229.8 8.96

Obtenga los rendimientos de sustrato a células, de células a sustrato, de sustrato a

producto, de producto a sustrato y de producto a células además de los parámetros
de la ecuación de Monod
Cuando el producto se forma durante la fase estacionaria, se relaciona la velocidad de
formación de producto con la velocidad de desaparición de sustrato

𝑟𝑃 = 𝑌𝑝/𝑠 (−𝑟𝑠 )

Para establecer una ecuación de velocidad de desaparición de sustrato se tiene el

siguiente balance

𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜
= 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑝𝑜𝑟 𝑙𝑎𝑠 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠 + 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑜 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑓𝑜𝑟𝑚𝑎𝑟 𝑝𝑟𝑜𝑑𝑢𝑐𝑡𝑜
+ 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜 𝑝𝑎𝑟𝑎 𝑚𝑎𝑛𝑡𝑒𝑛𝑖𝑚𝑖𝑒𝑛𝑡𝑜

−𝑟𝑠 = 𝑌𝑠 𝑟𝑔 + 𝑌 𝑠 𝑟𝑝 + 𝑚𝐶𝑐
𝑐 𝑝
Ecuaciones de balance de masa

En un reactor por lotes los balances de masa para sustrato, células y producto vienen
dados por:

• Células

𝑑𝐶𝐶
= 𝑟𝑔 − 𝑟𝑑
𝑑𝑡

• Sustrato

𝑑𝐶𝑠
= 𝑌𝑠 −𝑟𝑔 − 𝑚𝐶𝐶
𝑑𝑡 𝑐

• Productos

𝑑𝐶𝑝
= 𝑌𝑝/𝑐 𝑟𝑝 = 𝑌𝑝/𝑐 ∗ 𝑟𝑔
𝑑𝑡
Ejemplo:

Se utiliza Saccharomyses cerevisiae para producir alcohol etílico a partir de

glucosa, si la concentración inicial de células es de 1 gr/L y de sustrato 250 gr/L,
obtenga la variación de sustrato, células y producto en función del tiempo

Datos
𝑔𝑟
𝐶𝑝∗= 93
𝐿
𝑛 = 0.52
𝜇𝑚𝑎𝑥 = 0.33 ℎ𝑟 −1
𝐾𝑠 = 1.7 𝑔𝑟/𝐿
𝑌𝑐/𝑠 = 0.08
𝑌𝑝/𝑠 = 0.45
𝑌𝑝/𝑐 = 5.6
𝑘𝑑 = 0.01ℎ𝑟 −1
𝑚 = 0.03
Solucion:

De las ecuaciones de balance de masa, para el sustrato

𝑑𝐶𝑠
= 𝑌𝑠 −𝑟𝑔 − 𝑚𝐶𝐶
𝑑𝑡 𝑐

Si
−𝑟𝑔 = −𝑘𝑜𝑏𝑠 𝜇𝐶𝑐
𝐶𝑠
𝜇 = 𝜇𝑚𝑎𝑥
𝐾𝑆 + 𝐶𝑠
𝑛
𝐶𝑝
𝑘𝑜𝑏𝑠 = 1 − ∗
𝐶𝑝
Entonces

𝑛
𝑑𝐶𝑠 𝐶𝑝 𝐶𝑠
= 𝑌𝑠 − 1 − ∗ 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝐶𝑐 − 𝑚𝐶𝐶
𝑑𝑡 𝑐 𝐶𝑝 𝐾𝑆 + 𝐶𝑠
Del balance de células

𝑑𝐶𝐶
= 𝑟𝑔 − 𝑟𝑑
𝑑𝑡

𝑟𝑑 = 𝑘𝑑 + 𝑘𝑓 𝐶𝑓 𝐶𝐶

En este caso, como no se tiene el valor 𝑘𝑓 𝐶𝑓 se asumen como 0, por lo que

𝑟𝑑 = 𝑘𝑑 𝐶𝐶
𝑛
𝐶𝑝 𝐶𝑠
𝑟𝑔 = 1 − ∗ 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝐶𝑐
𝐶𝑝 𝐾𝑆 + 𝐶𝑠
Entonces
𝑛
𝑑𝐶𝐶 𝐶𝑝 𝐶𝑠
= 1− ∗ 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝐶𝑐 − 𝑘𝑑 𝐶𝐶
𝑑𝑡 𝐶𝑝 𝐾𝑆 + 𝐶𝑠
Del balance de productos

𝑑𝐶𝑝
= 𝑌𝑝/𝑐 ∗ 𝑟𝑝 = 𝑌𝑝 ∗ 𝑟𝑔
𝑑𝑡 𝑐

𝑛
𝑑𝐶𝑝 𝐶𝑝 𝐶𝑠
= 𝑌𝑝/𝑐 ∗ 1 − ∗ 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝐶
𝑑𝑡 𝐶𝑝 𝐾𝑆 + 𝐶𝑠 𝑐

Como se observa se tiene un sistema de tres ecuaciones diferenciales con 3

incógnitas que son la concentración de células, sustrato y producto, el sistema
de ecuaciones completo se muestra a continuación
Las ecuaciones diferenciales son:

𝑛
𝑑𝐶𝑠 𝐶𝑝 𝐶𝑠
= 𝑌𝑠 − 1 − ∗ 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝐶 − 𝑚𝐶𝐶
𝑑𝑡 𝑐 𝐶𝑝 𝐾𝑆 + 𝐶𝑠 𝑐

𝑛
𝑑𝐶𝐶 𝐶𝑝 𝐶𝑠
= 1− ∗ 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝐶𝑐 − 𝑘𝑑 𝐶𝐶
𝑑𝑡 𝐶𝑝 𝐾𝑆 + 𝐶𝑠

𝑛
𝑑𝐶𝑝 𝐶𝑝 𝐶𝑠
= 𝑌𝑝/𝑐 1 − ∗ 𝜇𝑚𝑎𝑥 𝐶𝑐
𝑑𝑡 𝐶𝑝 𝐾𝑆 + 𝐶𝑠