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Instituto Politcnico Nacional

Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa

Electroqumica II

Biosensores

Estudiante: Padilla Ramos Daniel Michell

Grupo: 4MM2

Profesor: Luis Martn Morn Snchez

29 de noviembre de 2017

0
INTRODUCCIN
Definicin
En general, un sensor es un dispositivo que recibe y responde ante una seal o estmulo. Un sensor
electroqumico es un dispositivo qumico que responde a cambios especficos en el potencial o en
la corriente elctrica como consecuencia de la presencia de una especie qumica que interacta con
l. Cuando el elemento sensor est constituido por un elemento qumico inorgnico u orgnico, se
tiene un sensor qumico. El elemento qumico sensor se selecciona de tal manera que interacta
con la especie a analizar (analito) de manera muy exclusiva o selectiva. Para aumentar la
selectividad del sensor se pueden utilizar elementos bioqumicos o biolgicos (enzimas, anticuerpos,
cidos nucleicos, clulas, tejidos, microorganismos) como elementos sensores de tal manera que
se obtiene un biosensor. (1)

Principios electroqumicos
La interaccin sensor-diana puede generar cambios electroqumicos, luz, cambios en la
temperatura, sonido. En cada caso se tienen transductores electroqumicos, pticos, acsticos,
termomtricos, etc. (1)
Estos transductores transforman la seal que se produce por la interaccin entre el analito y el
sistema de reconocimiento en una seal elctrica, y proporcionan una informacin analtica
cuantitativa o semicuantitativa. Existen diferentes tipos de biosensores electroqumicos:
conductimtricos, potenciomtricos, amperomtricos e impedimtricos, en funcin de si los sistemas
transductores detectan cambios en la conductividad, en el potencial, en una corriente generada o
en la impedancia. Por norma general, los sensores electroqumicos suelen emplearse con elementos
de reconocimiento biocatalticos ya que las reacciones enzimticas dan lugar a sustancias activas
elctricamente, a cambios en el pH, en el potencial, etctera. (2)
Los sensores qumicos y biosensores de transduccin potenciomtrica presentan un
comportamiento con respecto de la concentracin que se conoce como comportamiento Nikolsky:

1
Los sensores qumicos y los biosensores de transduccin amperomtrica presentan un
comportamiento con respecto de la concentracin de forma directamente lineal:

Caractersticas
Los elementos biolgicos mencionados funcionan como elementos de reconocimiento, es decir,
entran en contacto directo con el compuesto qumico que nos interesa detectar (llamado analito),
generando un cambio particular que otro componente del sensor, el elemento transductor, convierte
en una seal fcilmente medible. En algunas ocasiones, entre el elemento de reconocimiento y el
transductor se establece un tercer componente: una interfase para amplificar ms la seal o hacer
ms estable el dispositivo. En la Figura 1 se esquematiza un biosensor con los componentes bsicos
que lo integran. (3)

Figura 1. Representacin esquemtica de las caractersticas de un biosensor.

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Requisitos
Uno de los requisitos que le confieren gran poder a los sensores como herramienta analtica es la
posibilidad de utilizar biomolculas que reaccionan muy selectivamente con diversos analitos. el uso
de enzimas o anticuerpos, en forma pura o en forma de extractos crudos, clulas o tejidos completos,
permite construir biosensores altamente selectivos hacia un sustrato especfico.
Uno de los problemas a resolver en el diseo de un biosensor es investigar la forma de inmovilizar
la biomolcula de eleccin sin que esta pierda su actividad biolgica. entre estas formas se
encentran la adsorcin sobre un soporte (conductor metlico), unin qumica covalente sobre el
sustrato (carbn vtreo), unin qumica a una red inerte, atrapamiento sobre un gel o polmero
conductor, encapsulamiento dentro de una membrana de dilisis, pastas de carbn formadas
mezclando la biomolcula con polvo de carbn conductor con un aglomerante inerte como el aceite
mineral o una solucin salina de pH controlado. (1)

Tabla 1. Requisitos (transductores) para analizar las variables de inters (analitos)

APLICACIONES

Biosensores para diabticos


Con la tutora de Mathieu Hautefeuille y Catalina Stern, Mariana Centeno y Jeh Lpez realizaron la
traduccin de la reaccin electroqumica de una muestra sangunea en una seal elctrica que
permita almacenar y enviar a diversos dispositivos los datos de los niveles de glucosa e insulina.
La seal se genera a partir de una reaccin electroqumica que se procesa para transformarla en
elctrica. La glucosa reacciona con una enzima (glucosa oxidasa) y esto crea una pequea corriente
elctrica que se amplifica para luego medirla Al mismo tiempo, se mide la insulina, que no requiere
la enzima para reaccionar, pero emplea celdas electroqumicas. Ambas producen un pequesimo
flujo de iones que captamos y amplificamos en un circuito.

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Consta de cuatro partes: la microfludica, que lleva la gota de sangre por una ruta precisa y controla
el volumen til; el biosensor, con la tcnica de deteccin que realiza reaccin qumica que da
especificidad; la conversin electrnica, donde se adquiere la seal y se traduce el proceso qumico
a uno elctrico y de procesamiento de datos. (4)

Figura 2. Medidor de glucosa e insulina.

Alcoholmetro
La concentracin de alcohol en el cerebro de una persona que haya consumido bebidas alcohlicas
es proporcional a la de su orina, su sangre o el aire exhalado. El anlisis de alcohol en el aliento
requiere una toma de muestra no invasiva, ms fcil, segura y rpida de obtener que una muestra
de sangre o de orina y el resultado del anlisis se obtiene de forma inmediata. Por esta razn se
suele recurrir al anlisis en este medio.
En la dcada de los 60 aparecieron los primeros dispositivos para detectar la presencia de alcohol
en el aliento; como se basaban en una reaccin qumica del alcohol, se llamaron alcoholmetros
qumicos. Al introducir una muestra de aliento con alcohol en el dispositivo que contiene cromo (VI)
se produce un cambio de color. El etanol contenido en el aliento se oxida hasta cido actico, y el
cromo (VI) presente en el dispositivo se reduce a cromo (III). (5) La reaccin global es la siguiente:

4
Medidor de cantidad de colesterol en la sangre
La deteccin electroqumica de colesterol de la sangre requiere una primera hidrlisis del colesterol
esterificado. Este paso es catalizado por la enzima colesterol esterasa (CE). El colesterol producido
es oxidado por el colesterol oxidasa (CO) para producir colestenona y perxido de hidrgeno. Es
posible determinar la cantidad de colesterol en la muestra midiendo la corriente asociada a la
oxidacin del perxido de hidrgeno. (3)

Figura 3. Medidor de colesterol.

PROBLEMAS

1.- El complejo cis-platino, [Pt(NH3)2Cl2], ha sido utilizado como anticancergeno ya que este
reacciona con el DNA. Para cuantificar el cis-platino en el plasma sanguneo, se toma una alcuota
de 10.0 mL de este fluido (previa separacin de otros componentes) y mediante polarografa se
obtiene una seal cuyo corriente lmite de difusin es de 2.5 A. A esta misma muestra se le
adicionan 2.0 mL de un estndar de cis-platino en concentracin 1.20 mM, la seal que se obtiene
es de 6.4 A. Cul es la concentracin molar de cis-platino en el plasma sanguneo?

Datos:

1 = 10 = 0.01, 2 = 2 = 0.002

1 = 2.5, 2 = 6.4

= 1.2

5
Se establece que,

+
=

1 = 0 y 2 = 0

1 = 2

1 = 2

Tambin,

= 1 y =

Adems,

= +

= 2 = (1.2)(0.002) = 2.4

+
= , = =
1

1 1 2
=
+

1 1 ( + ) = 2 ()

1 1 + 1 1 = 2

2 1 1 = 1 1

(2 1 1 ) = 1 1

1 1
= ,
2 1 1

Se sustituyen valores para obtener los moles de solucin para el cis-platino:

2.5 0.01 2.4


= = 1.1583
6.4 0.012 2.5 0.01

Finalmente, para obtener la concentracin del cis-platino en plasma,

1.1583
= = = .
1 0.01

2.- Una muestra de sangre de pH = 7.4 tiene una reserva alcalina (RA) de 27.3 milimoles de CO2

total/litro. Distribuirlos entre las formas cida y salinas, si el pK del amortiguador bicarbonato es 6.1.

6
[]
= + log ( )
[]

[]
log ( ) = 7.4 6.1 = 1.3
[]

[]
= 20
[]
Llamando x a la cantidad de cido, 20x ser la cantidad de sal.
+ 20 = 27.3
27.3
= = 1.3
21
La concentracin de cido ser de 1.3 mM y la de la sal, 26 mM.

3.- Los organismos aerbicos son utilizados en las plantas de tratamiento de aguas cloacales e
industriales. Su funcin bsicamente se lleva a cabo poniendo en contacto las aguas residuales con
una poblacin microbiana aclimatada, y controlando cuidadosamente las condiciones ambientales
(nutrientes, concentracin de gases, concentracin de txicos, etc.). Los organismos aerbicos
degradan la materia orgnica ms rpidamente y eficientemente que los anaerbicos, por lo que
generalmente son los utilizados en los procesos de depuracin de aguas, o lodos.

Establezca la reaccin general:


+ 2 + 2 + 2

4.- Un equipo de entusiastas investigadores se dispone a estudiar el enzima denominado felicidasa

( ). Encuentran que la de la felicidasa es de 600 1. Llevan a cabo diversos


experimentos. Cuando [Et] = 20nM y [Triste] = 40 M, la velocidad de reaccin (V0) es 9.6 M 1 .
Calcule la para el sustrato Triste.
Se conoce , [Et] y V0. Se busca obtener . En la ecuacin 0 = [ ][]/( + [S]) se
sustituye la de la ecuacin Michaelis-Menten por [Et]. Sustituyendo los valores conocidos,
se determina :
(600 1 )(0.020M)(40M)
9.6 M 1 =
+ 40M

4802 1
9.6 M 1 =
+ 40M

7
9.6 M 1 ( + 40M) = 4802 1

4802 1
+ 40M =
9.6 M 1

+ 40M = 50M

= 50M 40M

= 10 M

[]
5.- Calcule la razn mxima que puede obtener el transportador paralelo de +
[]
de la membrana plasmtica de una clula epitelial cuando la [+ ]en es de 19 mM, la
[+ ]sal, 145 mM, el potencial de membrana, -50 mV (negativo en el interior) y la temperatura, 37
C.

La energa inherente es un gradiente electroqumico de + , es decir, el coste de transportar un ion


+ contra este gradiente est dado por
[+ ]sal
= +
[+ ]en

Se sustituyen a continuacin los valores dados para [+ ] (expresados en concentraciones


molares), + 1 para Z (porque + tiene una carga positiva) y 0.050 V para . Cuando el ion se
traslada desde el interior al exterior es de 50 mV.
1.45 101
= (8.315 )(310 ) + 1(96.5 / )(0.05 )
1.2 102

= 11.2 /

Cuando + vuelve a entrar a la clula, libera el potencial electroqumico creado al ser expulsado
al exterior. para la reentrada es -11.2 kJ/mol de + . Dado que pasan dos iones de + a favor
de su gradiente electroqumico al interior de la clula por cada molcula de glucosa transportada en
kJ
el simport, la energa disponible para bobear 1 mol de glucosa es de 2 11.2 = 22.4 mol.

8
[Glucosa]en
=
[]sal

Reordenando y sustituyndolos valores de , R y T, nos da:

[] 22.4 /
= =
[]
(8.315 )(310 )

[]
= 8.69
[]

[]
= 5.94 103
[]

BIBLIOGRAFA

1. Baeza, Alejandro. Sensores y biosensores electroqumicos. Ciudad Universitaria : Facultad de


Qumica de la UNAM.
2. Advances in biosensors for detection of pathogens in food and water. Leonard, P, y otros. 32,
s.l. : Enzyme and Microbial Technology, 2003, Vol. 1, pgs. 3-13.
3. Biosensores enzimticos. Torres, Eduardo y Mndez, Alia. 12, s.l. : Revista digital
universitaria, 2014, Vol. 15.
4. Lpez, Patricia. Ciencias desarrolla biosensor para medir glucosa e insulina. Gaceta. 5 de
octubre de 2015, 4728, pg. 12.
5. Alcoholmetro qumico. Santa Cruz de Tenerife : Universidad de la Laguna. pg. 2.

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