Medios de cultivo usados para las siembras.

Tripteína Soya Agar.(TSA). El medio que usamos para los controles que recibimos del PHOENIX.
Medio utilizado para propósitos generales, favorece el desarrollo y aislamiento de una gran variedad de
microorganismos aerobios, y anaerobios facultativos y estrictos. Al ser suplementado con sangre permite el
crecimiento de microorganismos exigentes y la clara visualización de reacciones de hemólisis.
Color Rojo.
Mueller Hinton.
Es un medio de cultivo rico, diseñado especialmente para hacer ensayos de sensibilidad y recomendado por el
Comité de la Organización Mundial de la Salud sobre estandarización de pruebas de susceptibilidad. Este
Comité lo propuso ya en 1970 para determinar la susceptibilidad de los microorganismos frente a los
antimicrobianos, por no llevar incorporados inhibidores de los antimicrobianos, como, por ejemplo, el PABA
(ácido p-amino benzoico), que anula la actividad de sulfamidas y antibióticos y debido a su reproducibilidad y
aceptación por las personas que trabajan en este campo. Desde entonces su empleo se ha generalizado. El agar
Mueller-Hinton se utiliza para la realización del ensayo de difusión en placa, en tanto que el caldo Mueller-
Hinton se emplea para la determinación de la concentración mínima inhibidora en el ensayo de diluciones
seriadas.

Color transparente.

Mueller Hinton Fastidioso.

Cuando este agar se suplementa con sangre de carnero al 5% permite realizar pruebas de sensibilidad
antimicrobiana en especies de estreptococos. También con el agregado de sangre se puede utilizar para el cultivo
y aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.

Color rojo.
Agar MacConkey ( Lactosa + (rojas) Lactosa - (transparentes)
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios
facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa. Por lo tanto es un medio de aislamiento,
selectivo y diferencial.
Las bacterias fermentadoras de lactosa formas colonias de diferentes tonos de rojo. Los fermentadores fuertes de
lactosa pueden provocar la precipitación de las sales biliares por la gran cantidad de ácidos formados, lo que se
observa fácilmente en el medio por la aparición de zonas opacas alrededor de las colonias. Las bacterias que no
fermentan la lactosa forman colonias incoloras o transparentes.
Lac+ como lo son Escherichia coli, Enterobacter y Klebsiella
Lac- Salmonella, Proteus y Shigella

color rojo rosado, ligeramente opalescente.

CNA. Cocos +

Agar CNA (colistina, ácido nalidíxico) Agar base de Columbia adicionado de

colistina y ácido nalidíxico que suprimen por completo el crecimiento de
enterobacterias y de Pseudomonas, pero permiten el desarrollo de estafilococos,
estreptococos, enterococos y levaduras.

Agar Chocolate

Este medio usa la misma base que el agar sangre. En un principio, los
eritrocitos se adicionaban a la base fundida y luego se elevaba la temperatura
(alrededor de 85°C) para lisar parcialmente las células, lo que otorgaba al
medio el color pardo-chocolate. Actualmente, la hemoglobina y otros
nutrientes presentes en los lisados de los glóbulos rojos, como hemina (factor
X) y coenzima NAD (factor V), se añaden como suplementos a un agar base
muy rico. También se puede agregar IsoVitaleX, un suplemento definido que
proporciona el factor V, vitaminas, aminoácidos, coenzimas, glucosa, iones
férricos y otros factores que favorecen el crecimiento de especies exigentes.
Color chocolate
Tipos de siembra a realizar en urocultivos dependiendo de la parte del proceso en la que nos
encontremos.

A esto se llama recuperar el microorganismo. Si como resultado de esta siembra obtenemos colonias aisladas que
nos permiten obtener cultivos puros, decimos que hemos aislado este microorganismo.
Este tipo de siembra la vamos a realizar cuando realizamos resiembras
de placas de cultivo.

Técnica de aislamiento de colonias.

La técnica de aislamiento más utilizada en los laboratorios de microbiología es la
siembra por agotamiento de una porción de la muestra o del cultivo en la
superficie de una placa de Petri, que contiene un medio de cultivo sólido. Esta
siembra se realiza con un alambre especial (nicron o platino), que forma un bucle
en la punta. Este dispositivo de siembra se denomina asa de platino o asa de
siembra; las asas de siembra que suelen utilizarse hoy día son de plástico
desechable. Por este procedimiento, cada bacteria viable (viva) aislada en la
superficie del medio sólido se desarrollará hasta formar un cúmulo.
Técnica para el recuento de colonias.

“Meada de gato”
Este tipo de siembra se va usar para sembrar las placas con las orinas del día que irán a incubación a la
estufa, así como con los controles del Phoenix.
Tras pasar los tubos de orina por el ordenador tras el análisis del citómetro Symex, el cual nos indicará las placas
a sembrar usaremos la citada técnica para aislar bacterias

Siembra para antibiogramas.

Embadurnamiento o técnica de Kirby-Bauer. Para antibiogramas. Se diluye una colonia aislada de un cultivo en
suero. Se echa una gota de esta al agar (1) y se extiende con un un asa de digralsky (2) o un hisopo (3) hasta que
quede por completo embadurnada. Inocule la placa mediante un hisopo estéril utilizando una suspensión del
germen de 18 a 24 horas de incubación con una turbidez equivalente a 0,5 de la escala Mc Farland. (primero
medimos en el aparato el tubo en el que lo vamos a inocular y a lo que nos de le sumamos 0.5) Para la
inoculación sumerja un hisopo estéril en el cultivo y elimine el exceso rotándolo firmemente contra la pared
interna del tubo. Frote el hisopo sobre la superficie del medio de cultivo. 5. Repita esta operación por tres veces
sucesivas, rotando la placa para obtener una dispersión uniforme del inóculo en toda la superficie.