Actividad Practica:

Bacterias.
Identificación bacteriana
en el laboratorio
PROFESORA ANTONIETA ESTÉVEZ 5TO BIOLÓGICO.
Identificación
bacteriana
Microscópica:
Frotis bacteriano
¿QUÉ ES UN ES LA EXTENSIÓN DE UNA SUSPENSIÓN
CORPUSCULAR EN FASE LÍQUIDA O SEMISÓLIDA,

FROTIS? EN UNA LÁMINA DE VIDRIO, DE FORMA TAL QUE

LOS ELEMENTOS QUEDEN ESPACIADOS EN UNA
MONOCAPA PARA SU POSTERIOR VISUALIZACIÓN
AL MICROSCOPIO
Si aplicamos el Se denomina frotis bacteriano a la extensión que se
realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo que
concepto de contiene bacterias, con objeto de separar lo más posible
los microorganismos, para poder observarlos al
frotis a frotis microscopio.
Permite la identificación microscópica de las bacterias
bacteriano lo
definimos
como:
Frotis de bacterias del yogurth
¿Cómo se
elabora un
frotis?
Observación
de bacterias
del yogurth
Coloraciones

Las coloraciones se usan para teñir a las células aumentando así su contraste, de tal
manera, que puedan observarse más fácilmente en el microscopio de campo claro. En
general, consisten en cubrir el frotis seco y fijado con una o más soluciones de
colorantes.

Los colorantes son compuestos orgánicos que tienen una afinidad particular por
sustancias celulares específicas.
 Colorantes de tinción simple: Las propiedades ácidas o básicas de los
colorantes permiten su fácil clasificación en:

 Colorantes ácidos: Por ejemplo: eosina, rojo Congo, fucsina ácida.

 Colorantes básicos. Dichos colorantes tienen afinidad por el material nuclear
y otros componentes. Estos son los más usados en microbiología, ya que
debido a la gran cantidad de ribosomas que contienen ácido ribonucleico en
todo el protoplasma de la célula bacteriana, éstas se tiñen fácilmente. Por
ejemplo: azul de metileno, fucsina básica, cristal violeta, safranina.
En este tipo de tinción aparecen los microorganismos de color oscuro o
coloreado sobre un fondo luminoso o claro
  Se denominan así los procedimientos de coloración que
ponen de manifiesto diferencias entre las células
microbianas o entre subestructuras de una misma
célula.
Tinción
diferencial  Ejemplos: tinción de Gram, tinción de endosporas,
cápsulas, flagelos, etc.

 A la sustancia que tiñe se le llama mordiente.

Tinción de endosporas:
Objetivo
de
inmersión
Macroscópica:
Medios de cultivo
¿Qué es un medio de
cultivo bacteriano?
 Son soluciones acuosas estériles

Permite la
identificación
Aporta los nutrientes tales como carbohidratos (azúcares
macroscópica de y ´polisacáridos), proteínas, lípidos, sales minerales,
bacterias, vitaminas y agua
observando las
colonias.
El sustrato más empleado es el agar- agar.
La proliferación bacteriana abarca

Multiplicación
Crecimiento
bacteriana
 ¿Qué factores inciden en la proliferación bacteriana?

1- 3- Temperatura: Toda
Disponibilidad 2- Consistencia 4- pH: Generalmente
bacteria tiene una
crecen en un pH neutro
de nutrientes adecuada del medio. temperatura óptima de
o levemente ácido.
crecimiento
adecuados.

6- Luz ambiental: 7- Grado de humedad:

5- Oxígeno: es un factor crecen más en la Es imprescindible para 8 - Esterilidad del
determinante. oscuridad, a no ser q el crecimiento medio
sean fotosintéticas bacteriano.
Elaboración  https://www.youtube.com/watch?v=YGoPu0cn9ms&ab_
channel=UniversidadMiguelHern%C3%A1ndezdeElche
de un medio
de cultivo  Siembra en medios de cultivo:
https://youtu.be/zVqrSpIFe_M
bacteriano
 Tipos de
 https://www.youtube.com/watch?v=5RfkDptrxVs
cultivos
bacterianos
 Medio enriquecido: es un medio que contiene, además, de los nutrientes básicos de un
medio de cultivo sustancias altamente nutritivas, como son, suero, sangre, etc. (Agar sangre,
etc.)
 Medio selectivo: es un medio que sólo permite el crecimiento de un grupo de
microorganismos e inhibe el crecimiento de otros tipos de microorganismos (Agar eosina
azul de metileno o EMB), etc.)
 Medio diferencial: es un medio que permite revelar características fisiológicas de los
microorganismos (Agar Mac Conkey, etc.)
 La mayoría de las bacterias se desarrolla en un medio de cultivo básico que contiene
agua, extracto de carne y peptona (producto soluble que resulta de la autólisis o de una
hidrólisis enzimática de proteínas de origen animal o vegetal). Este medio se denomina
medio nutritivo, y puede ser líquido (caldo nutritivo) o sólido (agar nutritivo).
 AGAR SANGRE
•Medio de cultivo sólido
•Medio general enriquecido de aislamiento
•Compuesto por Agar base
•Sangre de carnero o caballo
•Se añade la sangre después de esterilizar

-Aislamiento de bacterias exigentes

-Detección de hemólisis
Está adaptado para el cultivo de la mayoría
de las especies bacterianas, con
independencia de su metabolismo.

Estreptococo alfa-hemolítico en
medio Agar sangre
 •Lleva cristal violeta, lo que
hace que sea selectivo y
AGAR MACCONKEY
Medio de cultivo sólido diferencial
•Inhibe el crecimiento de m.o
Gram +

LAS COLONIAS SOSPECHOSAS

DE SHIGELLA NO FERMENTAN A
LA LACTOSA
SON INCOLORAS Y
TRANSPARENTES
Otros microorganismos que
fermentan a la lactosa (coliformes)
son colonias rosas o rojizas( Ejem:
E.coli).
 AGAR CHOCOLATE
•Medio de cultivo enriquecido
Se añade sangre de carnero o caballo
antes de esterilizar
•Aislamiento de bacterias
exigentes

El agar chocolate se usa para cultivo de

bacterias respiratorias fastidiosas como por
ejemplo Haemophilus influenzae
AGAR CLED
•Medio sólido
•Medio de cultivo diferencial para
aislar
•Indicado para el procesamiento de
urocultivos

Favorece el crecimiento de los

patógenos y contaminantes
urinarios.
La Escherichia coli fermenta la
lactosa.

M.O que fermentan la lactosa

pone el medio amarillo
Los que no fermentan lo ponen azul
AGAR MUELLER HINTON
•Medio sólido
•Susceptibilidad a antibióticos
y sulfonamidas

Es un medio para realizar pruebas de

susceptibilidad antimicrobiana mediante
método de difusión en disco
 Es una población de bacterias que
se originan de una bacteria madre.

¿Qué es una Son visibles a simple vista y se

colonia diferencian en cuanto a:
bacteriana? Forma, tamaño, aspecto del
borde, presencia de brillo, color,
olor en algunos casos, turbidez,
superficie, textura, etc
 Estreptococo SP Estafilococo aureus Estreptococo pyogenes

COLONIAS BACTERIANAS
Neumococo, bacteria patógena.
 https://www.youtube.com/watch?v=G7VXQ2vwA4M

Antibiogramas-
Antibióticos https://www.youtube.com/watch?v=TLaY6rFwIJA
Halo de inhibición
Interpretación de un examen de orina y
del urocultivo