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17 pag.

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 MUESTRAS DE CULTIVO
HISOPADO CERVICAL
Esta muestra se utiliza para el diagnóstico etiológico en caso de alguna infección como la
cervicitis, la toma de muestra se debe realizar en el laboratorio de Microbiología.
MATERIAL NECESARIO
● Camilla ginecologica
● Especulo esteril
● Torundas para limpieza
● Hisopos de alginato cálcico o Dacron con medio de transporte tipo Stuart o Amies
● Hisopos con medios de transporte específicos para Mycoplasma y/o Chlamydia.
Toma de Flujo vaginal
TÉCNICA
Con la paciente en posición ginecológica introducir
suavemente el espéculo sin lubricar (o lubricado con
agua tibia.
Limpiar el exocervix se secreciones vaginales con
una torunda seca
Bajo visión directa comprimir cuidadosamente el
cérvix con palas del espéculo y introducir un hisopo
en el canal endocérvix con un suave movimiento de
rotación
Repetir la operación con el segundo hisopo.

MUESTRAS
● Deberán recogerse dos torundas, una destinada
al examen microscópico y otra al cultivo. Para
investigación de Mycoplasma y Chlamydia se recogerá
una tercera torunda con medio de transporte específico
● En niñas y mujeres virgenes puede tomarse la
muestra introduciendo directamente el hisopo a través
del orificio himeneal sin espéculo
TRANSPORTE Y CONSERVACIÓN
● El envío de la muestra debe ser inmediato. Si no
es así se compromete la viabilidad de Neisseria gonorrhoeae
● Para análisis micológico si no se puede procesar inmediatamente puede conservarse
hasta 2 horas en la heladera
● Para análisis parasitológico si no se puede procesar inmediatamente puede
conservarse a 37º C no más de una hora.
MEDIO DE TRANSPORTE STUART
● se conserva a temperatura ambiente
PROCESAMIENTO
PRIMER DIA
● Solución fisiológica, ensayo bioquímico (Toma de ph (Neutro), test de las aminas
(solución fisiológica una gota de K(OH) al 10%)

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 ● observación en fresco (gota entre el cubre y porta objeto, objetivo de 40x y ocular de
10x (presencia de TRICHOMONAS, levaduriforme o pseudomicelio) leucocitos,
células epiteliales
● Coloración de Gram (objetivo
de 100x ocular de 10x)
Leucocitos, células guía,
gérmenes, morfología y tinción.
Bacilos gram positivos
Cocobacilos gram negativos
Diplococos gram negativos
levadura
● Siembra (medio de transporte
Stuart sembrar en agar sangre y agar chocolate tratando de aislar
● Colocar en atmósfera de CO2(lata) e
incubar a 37º C durante 48 horas
● Frotar el hisopo en un extremo de la
placa haciéndolo girar para descargar toda
la muestra
● Extender el inóculo inicial con el ansa
sobre la descarga.
● Con el ansa extender el inóculo sobre
otro segmento sin tocar el anterior/repetir el
paso
anterior

SEGUNDO DIA
● Observación macro y micromorfología (si no hay
desarrollo claro incubar 24 horas más a 37º C en
atmósfera de CO2
LACTOBACILLUS SPP
GARDNERELLA VAGINALIS
NEISSERIA GONORRHOEAE
STREPTOCOCCUS AGALACTIAE
● Largar Pruebas Bioquímicas
LACTOBACILLUS SPP catalasa negativa
GARDNERELLA VAGINALIS catalasa negativa,
oxidasa negativa

TERCER DIA
● Lectura de pruebas Bioquímicas
GARDNERELLA VAGINALIS inhibición por polietanol sulfonato de sodio al 5%
● informe de resultados
OBSERVACIONES
Debe evitarse el uso de torundas de algodón ya que contiene ácidos grasos instaurados que
pueden inhibir el crecimiento de Neisseria gonorrhoeae

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PREPARACIÓN PARA EL EXAMEN
● No utilice cremas ni otros
medicamentos en la vagina
● No use duchas vaginales
(infección de la vagina o el
útero)
● Vacíe su vejiga e intestino
● Seguir las instrucciones de
preparación para el examen
vaginal
● Abstinencia sexula de 48 horas
● 72 horas sin antibiótico
● No estar menstruando

SANGRE
TIPO DE MUESTRA HEMOLÍTICO
Sangre obtenida a través de punción periférica
● Realizar lavado de manos quirúrgicos adecuadamente
● técnica aséptica realizado durante todo el
procedimiento
● uso de campo esteril para evitar tener contacto con
áreas circundante que ofrezca el riesgo de
contaminación
● colocará adecuadamente la mascarilla al paciente
● realizar antisepsia adecuadamente en la zona donde se
realizará la punción, no palpe la vena sin guantes
estériles una vez preparada la piel
● utilizar otros guantes en cada punción realizada
● No cambiar la aguja para envasar la sangre en los frascos colectores
● en pacientes que reciban tratamiento antibiótico, recolectar las muestras en botellas
con resina

● La dilución debe ser mantenida en

botellas de hemocultivos de 1:5 para pacientes
pediátricos y 1:10 para pacientes adultos de
acuerdo con la recomendación del fabricante
● Para buscar micobacterias es necesario
tomar la muestra y colocarla en heparina; se
recomienda tomar muestra durante dos días
● Colocar la muestra en botella con rotulo
específico para cultivos de hongos. No se

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 recomienda obtener muestra mediante punción arteria porque la tasa de recuperación
de microorganismo es baja

TECNICA DE RECOLECCION
● Limpiar el tapón del frasco colector con
alcohol al 70% antes de puncionar para
envasar la muestra
● Obtener 8 a 10 cc de sangre para cada
frasco en pacientes adultos
● obtener cada muestra de sitios
anatómicos diferentes y con un intervalo
de 10 a 15 minutos.
● Para la detección del microorganismo en
sangre en sospecha de bacteriemia se
recomienda recolectar entre 20 y 40 ml de sangre (2 a 4 botellas de hemocultivos). En
sospecha de endocarditis pueden ser suficientes 20 ml de sangre (2 botellas de
hemocultivos)
● En sospecha de bacteriemia a
mayor volumen recolectado, mayor
volumen recolectado, mayor la
probabilidad de recuperación
microbiológica (12)
En pacientes pediátricos el volumen de
los hemocultivos se ajusta de acuerdo a
la edad:
● Prematuros extremos (menos de
1000 gr) 0.5 ml
● Neonatos hasta 1 ml
● Lactante y niños hasta 6 años 2-3
ml.
● Mayores de 6 años 5-10 ml
El número de botellas a tomar depende de la situación clínica en pacientes pediátricos:
● En prematuros extremos (menos de 1000 gr) 2 botellas
● Sospecha de bacteriemia: 2 botellas
● sospecha de endocarditis 4-6 botellas (a tomar entre 6 y 24 horas) (12, 13)
EQUIPO
● Bata y campos estériles
● gorro y mascarilla con protección ocular
● guantes estériles
● Equipo de asepsia (antiséptico, gasas y guantes estériles)
● Frascos para hemocultivos. Frascos para hemocultivos con rótulo específico para
hongos,
● Jeringas estériles

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TRANSPORTE
● Se recomienda en los primeros 15
minutos de la recolección a temperatura
ambiente. De 15 días a dos meses con
hongos miceliales.
● Para levaduras de acuerdo con el tiempo
de positividad del microorganismo puede
crecer en las primeras 24 horas.

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HEMOCULTIVO
Desinfectamos la botella para el hemocultivo
Dispersión de la sangre en la botella
lo agitamos para homogeneizar la muestra
Incubamos nuestra muestra durante de 7 días
realizando un cultivo ciego al tercer y quinto
día en un agar de sangre para observar el
desarrollo bacteriano
se realiza un estrellado extenso
en caso de observar un crecimiento
significativo se va a resembrar la muestra en
los medios necesarios para aislar e identificar
el microorganismo al igual que también se
realiza una tinción Gram y pruebas
bioquímicas finalmente se realizará un
antibiograma una vez identificado las colonias
significativas para determinar qué antibióticos
dar al paciente

LÍQUIDO
CEFALORRAQUÍDEO
El líquido cefalorraquídeo actúa como un
amortiguador, protegiendo el cerebro y la columna de
lesiones. Por lo regular, el líquido es
transparente.Tiene la misma consistencia que el
agua.el examen también se utiliza para medir la
presión en dicho líquido.

Existen diferentes formas de obtener muestras. Una

punción lumbar (punción raquídea) es el método más
común.

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para llevar a cabo el examen se realiza de la siguiente manera:

● Usar máscara y guantes

● El paciente debe recostarse de lado con las
rodillas encogidas hacia el abdomen y la
barbilla pegada al tórax. Algunos veces,
este procedimiento se realiza con la
persona sentada, pero doblada hacia
adelante
● Se realiza una limpieza en la espalda, el
proveedor de atención médica inyectará
anestesia local en la región lumbar.
● Se introducirá una aguja espinal
● Se penetra en el espacio subaracnoideo
punción L3 y L4 o entre L4 y L5 (la cresta
iliaca queda a nivel de la apófisis espinosa de la L4)
● En algunos casos se toma la presión de la abertura, un resultado anormal en la presión
puede sugerir una infección u otro problema.
● Infiltrar anestesia local, un
pequeño habón el la piel en el
tejido celular subcutáneo con la
aguja calibre 25 e infiltrar con
lidocaína al 1% el área
intervertebral con la aguja calibre
22, a mitad de dos vértebras
inyectando aproximadamente 3
cm3.
● Introducir el trocar de punción en
el tejido subcutáneo

● Avanzar el trocar hasta dentro del

espacio subaracnoideo
Introduce el trocar calibre 20 con bisel
paralelo al eje de la vértebra
Pacientes obesos o artríticos, utilizar el
trocar de calibre 18; los puntos de
referencia se encuentra con agujas
mayores
Ángulo de la aguja 10 grados en el plano
horizontal (inclinación cefálica)
Avanzar lentamente hasta que se
produzca un pequeño chasquido, caundo el trocar atraviese el ligamento amarillo a

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 una profundidad de 4cm en un adulto hasta que haya expulcion de LCR, retirar el
fiador y avanzar a intervalos de 2 mm de 2 mm hasta lograr la salida de liquido
cefalorraquideo
Puede producirse una segunda sensación cuando el trocar pase a través de la
duramadre 1 mm después de alcanzar el saco dural. si se encuentra resistencia ósea,
retirar el trocar hasta el tejido subcutáneo, cambiar de ángulo y volver a avanzar

● Una vez
que se
haya
ubicado
la
aguja, se medirá la presión
del LCR y se recogerá una
muestra de 1 a 10 mililitros
(ml) en 4 viales.
● Se conecta la aguja a un
manómetro para medir la
presión intracraneal el valor
normal de presión de apertura
para líquido cefalorraquídeo
es de 70 a 180 mm H2O
Compruebe que no existen bloqueos espinales mediante las maniobras de
VALSALVA y Queckeddt (Comprensión de yugulares), en estos casos debe subir la
presión.

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 ● Se llenan 3 tubos con LCR
separadas de 5 Cm3 cada
una para: recuento celular;
determinacion de proteinas,
glucosa y serología; examen
bacteriológico, cultivo y
antibiograma; estudios
especiales, si se requieren
● Se determina la presión
● Retirar el trocar con el diador
puesto
presionando suavemente la
zona de puncion con
compresa esteril con
betadine
● Aplicar apósito
● Luego, se retira la aguja, se
limpia la zona y se aplica un
vendaje sobre el sitio. le
pueden pedir que
permanezca acostado por un corto periodo de tiempo después del examen durante
12 a 24 horas.

ANÁLISIS DEL LCR

Características físicas (aspecto y color)
Citológico (Sedimento)
● Estudio celular (conteo, tinciones, fórmula diferencial)
Químico (sobrenadante)
● Glucorraquia (⅔ glucemia)
● Proteinorraquia (15-45 mg/dl)

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SECRECIÓN CONJUNTIVAL
FUENTE DE LA MUESTRA
Secreción conjuntival
Raspado corneal
Aspirado de fluido vítreo
CUIDADOS Y RECOMENDACIONES
● No usar gotas oftálmicas en lapso de 18 a 24 horas antes de la muestra
● Ausencia de cualquier cosmético
● No tomar antibióticos durante 24 a 48 horas antes
● No usar anestésicos que posean actividad antimicrobiana
● Caso obtención de la muestra intraoperatoriamente, el médico especificará el sitio de
donde se tomó la muestra: corneal, del humor acuoso, etc.
● Caso sospecha de endoftalmitis envíe muestras de aspirado intraocular.
● Caso sospecha queratitis tomar dos muestras con escobillones impregnados con
alginato de calcio.
● Los virus más comúnmente aislados son HSV, adenovirus, CMV y VZV.
TECNICA DE RECOLECCION
● SECRECIÓN CONJUNTIVAL: tome una muestra por cada ojo con escobillón
separados, previamente humedecidos con solución salina. rote el escobillón en cada

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 conjuntiva, coloque en escobillon en el medio de
transporte o en tubo esteril seco con tapa rosca o
tapón de caucho y con el otro realice extendido en
lámina de vidrio

● RASPADO CORNEAL: esta muestra es

recolectada por el especialista. Use
espátula esteril y raspe las lesiones o
úlceras e inocule la muestra en el medio de
transporte o en tubo esteril seco con tapa
rosca o tapón de caucho; realice extendido
en lámina de vidrio.
● Aspirado de fluido vítreo:utilice técnica para realizar punción por aspiración.

EQUIPO
● Guantes estériles
● Escobillones estériles, jeringa y aguja estériles
● Medio de transporte (agar sangre o chocolate) y lamina de vidrio.

TRANSPORTE
Inmediatamente luego de la recolección a temperatura ambiente

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SECRECIÓN ÓTICA
FUENTE DE LA MUESTRA
Paciente con secreción proveniente del oído

CUIDADOS Y RECOMENDACIONES
● No usar gotas óticas de 18 a 24 horas antes de la toma de la muestra.
● No tomar o aplicar antibióticos de 24 a 48 horas antes.
● Otitis supurativa requiere confirmación con cultivo de secreción.
● Pacientes con otitis supurativa con probable ruptura de tímpano no pueden practicar
lavado.
● Si la sospecha de infección es de otitis medida la muestra deberá ser tomada por un
especialista a través de timpanocentesis. No se recomienda hacer rutina, sino en
aquellos casos crónicos que no respondan a la terapia instaurada.
TECNICA DE RECOLECCION
● Este procedimiento lo debe realizar un médico especialista
● No se recomienda toma de muestras con escobillón rotado en otitis media o externas
supurativas
● De ser posible la muestra debe ser tomada con ayuda de microscopio por
otorrinolaringolo
● Si la membrana timpánica está intacta se hará con punción timpánica en casos de
otalgia intensa, paciente inmunosuprimido, neonato.

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 ● La toma por escobillon cuando hay otorrea está sujeta a mayor contaminado externa,
no ayuda mucho y por el contrario, confunde a quien no sabe cómo interpretar los
resultados.
OÍDO EXTERNO
PROCEDIMIENTO
● limpiar secreción purulenta con ssf esteril y
gasa, de adentro hacia afuera
● introducir el hisopo solo en la parte del oído
externo
● recolectar 1 muestra hisopada para la
coloración de gram y muestra hisopada
para realizar el cultivo

OÍDO MEDIO
PROCEDIMIENTO (TIMPANOCENTESIS)
afección: otitis media aguda/media crónica
muestra tomada por el médico O.R.L
● Se limpiará el canal auditivo externo con
un hisopo impregnado en yodo povidona al
10 %
● Se punciona el tímpano a través de un
otoscopio esteril
● Enviar la muestra en medio de transporte
o jeringa al laboratorio

BACTERIAS
PSEUDOMONAS AERUGINOSA
HAEMOPHILUS INFLUENZAE
MORAXELLA CATARRHALIS
STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE
STAPHYLOCOCCUS AUREUS

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EQUIPO
● Guantes no estériles.
● Solución antiséptica
● medio de transporte y lámina de vidrio.
TRANSPORTE
● Se recomienda en los primeros 15 minutos de la
recolección, no exceder de dos horas a temperatura
ambiente
PREPARACIÓN DE CULTIVO
Siembra en Agar
Con Sangre Maccoin quen

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BIBLIOGRAFÍA
1. Cultivo endocervical [Internet]. Medlineplus.gov. [citado el 20 de marzo de 2022].
Disponible en: https://medlineplus.gov/spanish/ency/article/003754.htm
2. EXUDADO ENDOCERVICAL [Internet]. Lebbyac.com. [citado el 20 de marzo de
2022]. Disponible en:
http://www.lebbyac.com/manual2/Procedimientos_tecnicos/bacterio/endocervical.html

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