INSTITUTO TECNOLOGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE OCCIDENTE

CONCENTRACIÓN Y PURIFICACIÓN DE BIOPRODUCTOS

Pre-reporte 3

Bioseparaciones

Profesor: Guillermo Flores cosio

Alumno: Jesús Israel Campos Hueso ib703835

Fecha: 22 de marzo de 2022

 I. Cuestionario
1. ¿Cuáles son las distintas técnicas para concentrar y purificar bioproductos de interés?
Los tipos de operaciones que se requieren para la concentración y purificación de
bioproductos están descritas en la tabla 1. (Tejada, Cisneros, & Zamudio, 2011)

Tabla 1. Operaciones dedicadas a la concentración y purificación.

Tipo Técnica Propiedad
Concentración Extracción Distribución entre fases
Adsorción Sorción superficial
Destilación Presión de vapor
Purificación Cromatografía Fase estacionaria
Precipitación Solubilidad
Ultrafiltración Tamaño molecular
Ósmosis inversa Difusividad y solubilidad

2. Describe brevemente el fundamento de cada técnica de la pregunta anterior.

Extracción: por medio de un solvente se separa el metabolito en una fase entre dos fluidos inmiscibles.

Adsorción: Adhesión de iones que contiene un flujo en la superficie de un sólido mediante fuerzas
moleculares.

Destilación: por medio de ebullición de un líquido con un soluto volátil, se precipita por medio de
diferencia de temperatura.

Cromatografía: Depende de la fase estacionaria que se utilice, purifica moléculas por afinidad
molecular, cargas iónicas, tamaños, composiciones, incluso pH.

Precipitación: El soluto se aglomera formando solidos insolubles debido a cambios de temperatura,

pH, fuerza iónica, y la constante dieléctrica del medio.

Ultrafiltración: Separa moléculas de tamaños pequeños empleando membranas con arreglos

especiales y gradiente de presión.

Ósmosis inversa: El paso de un solvente a través de una membrana semipermeable por medio de un
gradiente de presión.

3. ¿Qué criterios determinan las técnicas de concentración y purificación que se

emplean en un proceso biotecnológico?

Generalmente los productos que se venden en el mercado son sujetas a un conjunto de normas,
estándares, pruebas, que regulan como se debe presentar finalmente el metabolito. Pensando en el
grado, características y propiedades del producto, se puede diseñar y determinar las técnicas de
concentración y purificación que se emplea en un proceso biotecnológico
 4. ¿Cuáles son las técnicas de concentración y purificación que proveen la mejor relación
costo-beneficio?

La cromatografía, destilación y precipitación son de los equipos más esenciales y baratos que nos
puede rendir mejores beneficios. La cromatografía es utilizada ampliamente y se puede utilizar para
separar impurezas y contaminantes vitales para el desarrollo de un producto comerciable. La
destilación y precipitación no requiere de equipos muy elaborados, caros, y sus rendimientos de
recuperación y concentración de soluto o metabolito es alta.

5. ¿Cuáles son las técnicas de concentración y purificación de la enzima invertasa a nivel

industrial?

Se sónica, homogeniza o muele con perlas de vidrio la biomasa con la invertasa intracelular, se
centrifuga, se separa el líquido con las enzimas, se filtra, luego con microfiltración y se precipita con
sulfato amónico, se vuelve a centrifugar y se extrae el precipitado, se resuspende en buffer de
acetato, se usa membranas UF para difiltración, se remueve la sal con una cromatografía de
columna, y finalmente se ultra filtra. (Oleg Dipl Chem Kirjuschkin, 1987)

II. Diagrama de flujo

Concentración de la muestra

Tomar 1 tubo Evaporar totalmente

Inicio hexano. Equipo Speedvac Fin
muestra guardada
o aire

Visualización del metabolito

Tomar placa Etiquetar

Trazar línea Dejar 1
TLC cortar "aplicació
Inicio horizontal 1 cm entre
(aluminio- 10x10 cm n de
cm de la muestra
silica-gel) mustra"
base
20x20 cm

Cámara Depositar 10 y Línea hztl.

Depositar 10 y 50 μL muestra Etiquetar
migración. fase lapiz 0.5
50 μL muestra no "frente de
movil cm, parte
concentrada. concentrada. solvente"
hexano:aceton superior.
a (70:30 v/v)
Dejar migrar
Sumergir hasta 0.5 cm
Reposar placa TLC antes del borde
15 min dentro de la superior
cámara