INFORME

PRÁCTICA DE LABORATORIO No. 3

BIOMOLÉCULAS: CARBOHIDRATOS, LÍPIDOS Y PROTEÍNAS

Universidad Libre – Seccional Cali. Facultad de Ciencias de la Salud.

Programa de Medicina / Primer Semestre / Biología.
Equipo No. 5 Grupo B
Marzo de 2022

Mina Rengifo Laura Isabel

Montes Miguel Ángel
Muñoz Ospina Angela
Orjuela Moreno María Alejandra
Ortega Checa Angela

Observaciones

Protocolo 1. Pruebas de Benedict y Lugol. Comparación entre

monosacáridos, oligosacáridos y polisacáridos / Detección de azúcares
reductores y no reductores.

En el caso de aquellos tubos que deban llevarse al baño maría, las

observaciones deben ser POSTERIORES a la exposición.

Glucosa + Benedict
Observación:
Cuando se realizó la prueba de Benedict en la glucosa, y se sacó el tubo después de
10 minutos del baño maría, se observó un notorio cambio en el color, y en el olor. Se
tornó a un color, naranja- rojizo, de un olor fuerte y penetrante, demostró así que es un
azúcar reductor.

ANTES DESPUÉS

Imagen 1. Antes Imagen 2. Reacción

de agregar Benedict con Benedict.
después del baño
María.
Sacarosa + Benedict
Observación:
En el caso de la sacarosa, cuando se agregó 1ml de Benedict tomo el color azul claro
del reactivo Benedict, sin embargo, al meterla el tiempo indicado a el baño maría, no
se notó ningún cambio en esta.

CUANDO SE AGREGÓ DESPUÉS DEL BAÑO

ANTES
1ml DE BENEDICT MARÍA

Imagen 3. Imagen 4. Imagen 5.

Almidón + Benedict
Observación:
Cuando se agregó el mililitro de Benedict a él almidón también se observó un cambio
en su color. Antes de agregarse el reactivo Benedict, el almidón era transparente al
igual que los demás carbohidratos usados en esta práctica, y después de que se
realizó la prueba su color fue un azul claro y traslúcido.

CUANDO SE AGREGÓ DESPUÉS DEL

ANTES
BENEDICT BAÑO MARÍA

Imagen 6. Imagen 7. Imagen 8.

Almidón + Lugol
Observación:
Se agrego dos gotas de Lugol a el segundo tubo de almidón, se observó rápidamente
un cambio en su coloración. El almidón, que al principio se visualizó un color
transparente, cuando se realizó la prueba del Lugol cambio inmediatamente a un color
azul intenso.

ANTES --------------------------> DESPUÉS

Imagen 9. Imagen 10.

Protocolo 2. Prueba del Lugol para diferenciar ácidos grasos saturados e

insaturados.

Describa sus observaciones antes y después de adicionar el Lugol (no más

de 5 renglones)

Imagen 11. protocolo 2. En el tubo número 1 (T1) se encontró Aceite de omega 3 puro y en el
Tubo 2 (T2) se encontró aceite de coco sin sustancias añadidas.
El tubo 1 se encontraba en una tonalidad amarilla y era denso,el tubo 2 se
encontraba en un tono transparente,era y mas maleable que el contenido del tubo
1.Luego de adicionar el lugol en el tubo 1 se observó que se dividió en dos fases,
arriba el omega 3 y abajo el lugol de color ambar,en el tubo 2 se divide igualmente
en dos fases,pero se observan viseles de lugol en el aceite de coco.

Imagen 12. Tubo 1 (T1) aceite omega 3 con adición de lugol divisón de lugol y aceite, tubo 2 (T2)
aceite de coco con lugol, se observa difernecia de tonalidades, pero mas incorporado el lugol con
el aceite que omega 3.

Describa sus observaciones Luego de los 5 minutos en el baño de maría

¿En cuál de los dos aceites se desvaneció primero el color del Lugol?
Imagen 13. Aceite omega 3 (T1) con adición de Lugol, aceite de coco (T2) con Lugol, después de
5 minutos de baño maría.

Se desvanció primero el lugol en el omega 3 (T1) se encontró mas imperseptible el

lugol, incluso se siguió apreciando un color amarillo no tan intenso, a comparación
del aceite de coco (T2) en el cual su tonalidad cambió drasticamente tomando el
color del lugol, un color rojo ladrillo.

¿Cualitativamente, cuál sería el porcentaje estimado de ese cambio, comparado

con el otro aceite?
En un porcentaje estimado, el cambio de coloración en el omega 3 con el lugol fue
de un 30% a diferencia del aceite de coco (T2)

Protocolo 3. Reacción de Salkowski. Reconocimiento del colesterol.

Completa la siguiente tabla de acuerdo con lo observado para la suspensión de

yema de huevo, la suspensión de clara de huevo y la solución de colesterol 10
minutos DESPUÉS de haberle agregado el ácido sulfúrico.

Observaciones cualitativas

Solución
Clorofórmica Color Intensidad
de…
 En este primer tubo de ensayo se pudo observar
Colesterol como la sustancia se dividió en 3 capas, la primera 1
puro (100 ubicada en la parte superior que presentó una
mg/L) coloración marrón, en la capa de la mitad un color
rojizo fuerte y en la capa inferior un tono amarillo.
En este tubo de ensayo se pudo observar
aproximadamente tres colores correspondientes a 2
Extracto de
las capas visibles, el primero con un tono amarillo
Yema de
muy leve, en el centro un color naranja fuerte y
Huevo
finalmente en la parte inferior una coloración
totalmente transparente.
En este tubo de ensayo se apreciaron dos capas,
Extracto de
ambas incoloras muy poco perceptibles, sin 3
Clara de
embargo, se pudo observar una línea divisoria
Huevo
entre estas.
Protocolo 4. Prueba de Ninhidrina para aminoácidos y prueba de Biuret para
péptidos.

Ninhidrina.

Observaciones Cualitativas
Exposición de soluciones de aminoácidos a la ninhidrina luego de 5 minutos en el
baño maría.

AMINOACIDO + NINHIDRINA
La solución de Glicina al 2% cuando se agregó ninhidrina, se
esperaron 5 minutos en el baño maría presentaba un cambio de
color; antes del baño maría tenía un color transparente, al sacar el
Glicina
tubo de ensayo se observó que la solución de Glicina tiene un color
purpura intenso

La solución de Ácido aspártico 2% cuando se agregó ninhidrina luego

de 5 minutos en el baño maría presento un cambio de color; antes del
baño maría tenía un color transparente, cuando se sacó el tubo de
Ácido aspártico ensayo se observó que la solución de Ácido aspártico tenía un color
azul.

La solución de lisina con

antes de ser llevada a baño maría por 5 minutos presentaba una
Lisina
coloración transparente, después de sacarla del baño maría se
observó un color morado en la Lisina

Biuret.

En este caso el reactivo empleado fue BIURET y para reconocer su acción, se

agrego 5 gotas de biuret a una solución de colágeno al 4% donde se dejo por unos
minutos a temperatura ambiente y se obtuvo un color violeta como producto final. 6

Resultados y Discusión

Protocolo 1:

 En esté protocolo se realizó tres pruebas, una en cada tubo, los cuales
contenían cada uno glucosa, sacarosa, y almidón, estas pruebas se
realizaron con el reactivo Benedict. El resultado en la sacarosa y el almidón
fue el mismo (imagen 14), pues no se observaron cambios cuando se
 sacaron los tubos del baño maría, lo que quiere decir que no son azúcares
reductores; En cambio, en la glucosa si se observó una alteración en su
color, inicialmente era transparente, al agregar 1ml de Benedict tornó a un
azul claro, traslúcido y al pasar 20 minutos en el baño maría se sacó el tubo
y este ya era de un color naranja- rojizo, con esto quedó demostrado que la
glucosa es un azúcar reductor, ya que la prueba dio positivo. En cuanto al
almidón al que se le agregó las dos gotas de Lugol tuvo un cambio
inmediato, de transparente pasó a ser de un color azul - violeta intenso. El
Lugol se puede utilizar para reconocer la presencia de almidón, porque esta
sustancia adsorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa  1

Imagen 14. Glucosa 1%, Sacarosa 2% y Almidón 2% al agregar la prueba

Benedict antes de ingresar al baño maría

Protocolo 2:
Al agregar el Lugol, se pudo apreciar la diferencia de aceites saturados e
insaturados dado a que hubo cambio en la coloración después de agregar el Lugol
y someterlo a baño termostatado. El aceite de coco (T2) que se caracteriza por ser
saturado, se evidenció inmediatamente el cambio de color. En el caso del omega 3
al ser poliinsaturado, es decir, pues a sus múltiples dobles enlaces de carbono, fue
más susceptible a ser atacado por halógenos. En el reactivo usado, que fue el
Lugol, este está compuesto por solución acuosa de yodo y yoduro potásico,
siendo el yodo quien actuó como halógeno.
Imagen 15. cadena poliinsaturada omega 3

Al ser atacado por halógenos, estos se adhieren a los dobles enlaces de carbono,
mediante una reacción de Halogenación. Esta reacción origina la decoloración de
la solución del halógeno. ² la cantidad de halógeno que absorbe un lípido puede emplearse
como índice del grado de insaturación”

Resultados y Discusión Protocolo 3:

Al momento realizar este protocolo se aplicó a los 3 tubos de ensayo, cada uno
con sus respectivas sustancias, la cantidad de 1ml de ácido sulfúrico (se debe
agregar la misma medida tanto de ácido sulfúrico como de la sustancia). Esta es
llamada la prueba Salkowski, mide los niveles de colesterol por medio de la
reacción entre una solución de colesterol disuelto en cloroformo y ácido sulfúrico,
sustancia que conduce a la deshidratación y formación de nuevos enlaces además
es el responsable de activar el proceso de coloración. ³
Transcurridos 10 minutos de haber aplicado el ácido sulfúrico en cada tubo de
ensayo se apreció la creación de anillos dentro de los mismos, cada uno se
diferenció gracias a que revelaron colores diferentes (imagen15 e imagen16), sin
embargo, a diferencia de las otras reacciones, en el tubo correspondiente a la
clara de huevo se produjo un cambio muy tenue de color (imagen17).
Imagen 16. Tubo de ensayo
con solución de colesterol
al aplicarle 1ml de ácido
Sulfúrico después de 10min.
Imagen 17. Tubo de ensayo
con yema de huevo al aplicarle
1ml de ácido sulfúrico después
de 10min.
Imagen 18. Tubo de
ensayo con clara
de huevo al aplicarle
1ml de ácido sulfúrico
después de 10 min.

Resultados y Discusión Protocolo 4:

Los aminoácidos como la Glicina, ácido aspártico y lisina que estaban en un 2%

cada uno, cambiaron de color lo que significó que dieron positivo para la prueba
de ninhidrina. Eso sucedió porque al añadir ninhidrina a una solución que
contenga aminoácidos esta experimenta una reacción de oxidación y reducción
con los grupos amino libres, desdoblándolos a en grupos carbonilo y amoniaco por
desaminación oxidativa y el compuesto final produjo en los aminoácidos variación
de colores desde un color azul a uno violeta (Imagen 20- Revista Cubana de
Química, págs. 66-74)
El tubo de ensayo que contenía 4% de colágeno reacciono con Biuret porque se
observó que el reactivo cambio de un color transparentoso a un color violeta en
una temperatura ambiente sin ser sometido a calor como se hizo con la prueba de
ninhidrina, confirmando así que hubo presencia de proteínas (Imagen 22)

Imagen 19. Frasco de sustancia Biuret

Imagen 20. Tubos de ensayo con sustancia glicina, lisina, ácido aspártico, que
reaccionaron con ninhidrina.
 Imagen 21. Frasco con sustancia Ninhidrina.

Imagen 22. Tubos de ensayo que contenía glicina al 2%, ácido aspártico 2 %,
lisina 2%, solución de colágeno al 4%.
CONCLUSIONES

1. La glucosa es el único azúcar reductor usado en el protocolo 1.

2. Según la cantidad de halógenos que un lípido pueda absorber, mediante una
reacción de halogenación se podrá inferir el grado de insaturación o saturación de
dicho lípido. En esta situación, se observó que el omega 3 tuvo mayor índice de
insaturación que el aceite de coco
3.
4. Se encontraron reacciones positivas en las pruebas realizadas con
ninhidrina y biuret, dando el cambio de color, se confirmaría la presencia de
aminoácidos en gran cantidad del protocolo 4.
Bibliografía

1. Martín-Sánchez M, Martín-Sánchez MT, Pinto G. Reactivo de Lugol: Historia de

su descubrimiento y aplicaciones didácticas. Educ quím [Internet]. 2013 [citado el
15 de marzo de 2022];24(1):31–6. Disponible en:
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-
893X2013000100006
2.
Propiedades químicas [Internet]. Portal Químico. Facultad de Ciencias Médicas. 2005
[citado 15 marzo 2022]. Disponible en:
https://medicina.usac.edu.gt/quimica/biomol2/lipidos/Propiedades_Qu_micas

3. "SCIENCE bio". www.coursehero.com. Retrieved 2021-05-10.

5. Uanl.mx. [citado el 15 de marzo de 2022]. Disponible en:

http://cdigital.dgb.uanl.mx/la/1020111502/1020111502_023.pdf 4 pro
http://scielo.sld.cu/pdf/ind/v26n1/ind09114.pdf 4 prot
6. 2.9: Proteins [Internet]. Biology LibreTexts. 2019. Available from:
https://bio.libretexts.org/Bookshelves/Biotechnology/Bio-OER_(CUNY)/
02%3A_Chemistry/2.09%3A_Proteins#:~:text=Biuret%20reagent%20is%20an%20alkaline
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