Universidad Nacional Abierta y a Distancia

# Tarea 4 - Actividad Práctica Alterna frente a la contingencia

de COVID 19
Anexo #1.
Microbiología Ambiental
358010

1. Descripción de la actividad
Laboratorio Laboratorio Simulador
físico remoto

Tipo de Experiencias
Trabajos de Software
práctica profesionales
campo especializado
dirigidas

Otro X Cuál Taller práctico virtual

Tipo de x Número de
Individual Colaborativa x
actividad: ☐ semanas

Momento
Intermedia, X
de la Inicial ☐ Final ☐
unidad: 2
evaluación:

Peso evaluativo de la actividad: Entorno de entrega de actividad:

90 evaluaciòn y seguimiento

Competencia a desarrollar: El estudiante aplica técnicas básicas de

manipulación y análisis de bacterias y hongos en el laboratorio.

Temáticas que aborda componente práctico:

Bacteriología – arqueas y bacterias

Micología – hongos y oomicetes

Fundamentos de metabolismo microbiano

Metabolismo especial - metanogénesis
Metabolismo especial – reducción del azufre
Fundamentos de ecología microbiana
Comunidades microbianas – agua
Comunidades microbianas – suelo
Comunidades microbianas – aire
Asociaciones – con plantas
Asociaciones – con animales
Pasos, fases o etapa de la estrategia de aprendizaje a
desarrollar

Actividades a desarrollar
El o la estudiante deberá preparar los recursos educativos requeridos
para la Unidad 2 con antelación a la práctica programada.

La práctica de laboratorio se divide en tres en 3 momentos:

- Momento 1. Desarrollo de Columna de Winogradsky . (la
realiza el estudiante antes de la segunda sesión mediada
por el tutor)
- Momento 2. Aislamiento de microorganismos de ambientes
naturales (sesión 1, con el tutor de práctica).
- Momento 3. análisis de resultados de microorganismos aislados
y sustentación de Columna de Winogradsky (sesión 2 con el
tutor de práctica).
Momento 1. Columna de winogradsky
Materiales:
- Botella plástica rotulada con su nombre y código o de vidrio
de boca ancha (pueden ser frascos de mayonesa o salsas
grandes). El material tiene que ser completamente
transparente para visualizar todos los fenómenos.
- Lodo negro (provenientes de una Planta de Tratamiento de
Aguas Residuales).
- Agua de charca, estancada de varios días o de lago (en la
medida de lo posible, para tomar las muestras tener en
cuenta las medidas de protección personal).
- Papel periódico picado, materia orgánica, hojas secas de
árboles.
- Plástico de Vinipel o bolsa plástica transparente.
- Puntilla de hierro o hierro rallado.
Procedimiento:
1. El estudiante Individualmente deberá realizar el montaje de la
columna de winogradsky teniendo en cuenta los pasos que se
describen a continuación.
2. En el recipiente deben colocar en el fondo una mezcla del
fango o lodo recolectado, junto con las tiras de papel
periódico, las hojas secas, procurando que quede una capa
compacta de lodo (sin formación de burbujas). La mezcla
debe ser homogéneo y alcanzar una altura de 5- 10 cm.
(recordar marcar los frascos con el nombre y código del
estudiante.)
3. Agregar la puntilla de hierro o el hierro rallado.
4. Agregar cuidadosamente el agua de charca hasta que quede
 casi lleno el frasco, dejando un espacio de 4 cm
aproximadamente de aire. Nota: Al agregarlo contra la pared
del frasco evita el levantamiento del lodo.
5. Disponga el plástico de Vinilpel o plástico transparente para
tapar el recipiente y dejar en un sitio donde reciba abundante
luz solar. Puede acelerar el proceso colocando una fuente de
luz amarilla, pero tenga en cuenta que esta luz es de alto
consumo energético y puede repercutir en la cuenta de la
luz. Ver Figura a continuación:

Imagen 1. Montaje de Columna de Winogradsky.

6. Permita la incubación durante 4 semanas. Realice registro

fotográfico y anote los cambios que se vaya presentando.
7. Prepare una presentación que evidencie el desarrollo de la
columna a lo largo de las 4 semanas y sustentar ante el tutor
de componente práctico en la segunda sesión (momento 3
sesión 2 práctica tutor). La defensa de su montaje debe
poder responder las siguientes preguntas:
▪ ¿Por qué se forman manchas negras en el lodo?
▪ ¿Por qué la parte superior de la columna es verde?
▪ ¿Cuáles son las fases anaeróbica, aeróbica y
microaerofílica de la columna?
 ▪ ¿A qué se debe el olor a “huevo podrido” en dichos
sistemas?

▪ ¿Qué aplicabilidad tiene el experimento o que le

permite entender dentro del ejercicio de la
ingeniería ambiental?
NOTA: El tutor de práctica es el encargado de calificar este
momento, la forma de entrega debe ser coordinada por él y los
estudiantes, pueden hacer uso de skype, web conference,
zoom o entrega de videos en screencast, youtube, donde se dé
cumplimiento a lo solicitado en la guía.

Momento 2 ( primer sesión con tutor práctico). Preparación y

cultivo de microorganismos.

BIOSEGURIDAD
1. Observar el siguiente video referente a Bioseguridad en el
laboratorio. Es importante recalcar que en su ejercicio
profesional tendrá que familiarizarse con los EPP o elementos de
seguridad personal. Link del video:
https://youtu.be/g9cmQXjpRAI

2. Presentar cuestionario corto (qüiz) sobre bioseguridad que será

entregado por el tutor de práctica al finalizar la charla y el
video, este quiz deberá desarrollarse en los tiempos que defina
su tutor.
ACTIVIDADES A REALIZAR- RECUPERACIÓN DE
MICROORGANISMOS.

A. Crecimiento bacteriano

El estudiante simulará desde su hogar un medio de cultivo para el

crecimiento de microorganismos. En microbiología es frecuente hacer
uso de medios de cultivos nutritivos y especiales para simular las
condiciones de crecimiento de Hongos y bacterias.

El agar, es sin duda el medio comúnmente utilizado, similar a una

gelatina, es posible recrear las condiciones para el crecimiento.

- Para esta fase los estudiantes deberán disponer de 3 recipientes

no muy profundos (tipo plato pequeño, puede ser de vidrio o
plástico). Preparar la gelatina (preferiblemente sin sabor) y
disponerla en los recipientes anteriormente descritos. La
gelatina debe prepararse con una concentración mayor,
es decir con menos agua, la gelatina debe prepararse EL
DÍA ANTES de la sesión.
- NOTA: si el estudiante se encuentra en clímas cálidos,
debe dejar los experimentos en un lugar fresco y seco (no
nevera), alejados de alimentos o fuentes de
contaminación cruzada.
- Para evitar la presencia de insectos (hormigas) deben
 tapar con vinilpel o un plato el recipiente, igualmente
pueden disponerlo en un plato con un poco de agua en la
base.

- Tomar 4 granos de suelo o tierra de jardín, puede tomarla de

una matera o sustrato que tenga a disposición en su hogar.
Disponer los 4 granos en uno de los recipientes ( ver ejemplo) ,
cubrir con papel transparente, bolsa plástica transparente, dejar
en un espacio fresco y seco a temperatura ambiente. Dejar
incubar por 6 días (depende del clima). Tomar evidencia
fotográfica de los cambios que se observen, teniendo en cuenta
las indicaciones anteriormente presentadas (rotulado de
experimentos, con nombre y código)
Ejemplo:

Granos de suelo

B. Crecimiento de Hongos/levaduras

- Tomar un trozo de pan y partirlo en trozos de 2 cm x 2 cm.

 - Con ayuda de un gotero, jeringa tomar agua de la llave y
humedecer los trozos de pan.

- Colocar 4 trozos de pan en un recipiente con gelatina

previamente preparada como se indica en el paso anterior.
Dejar a temperatura ambiente en un lugar fresco y seco por 5
días. Tomar registro y nota de los cambios observados.

C. Recuperación Microorganismos acuáticos.

Nota: Si usted ya realizó el experimento de la columna de

winogradsky, puede tomar la muestra de agua de la
columna.

- Tome con un gotero un poco de agua residual, de la columna o

de charca y disponerlas de la misma manera que los granos de
suelo y trozos de pan en los experimentos anteriores. Deje
incubar a temperatura ambiente en un lugar fresco y seco por 5
días. Tomar registro y nota de los cambios observados

D. Recuentos Bacterianos
Una de las técnicas cuantitativas más utilizadas en laboratorio para
aislamiento y conteo de microorganismos se realiza por medio
de diluciones seriadas en base 10, donde a partir de una
 muestra, se diluye hasta una concentración más diluida, para
posteriormente inocular sobre un medio de cultivo específico y
poder cuantificar. Para este ejercicio el tutor de práctica
explicará la teoría de recuentos, diluciones en base 10 y
los estudiantes deberán desarrollar los cálculos para ser
entregados en el informe final.

Imagen 2. Ejemplo de diluciones seriadas

Muestra de suelo.
Al laboratorio de Microbiología Ambiental ACME ha llegado una
muestra de suelo proveniente del pozo petrolero el almirajó
ubicado en el municipio de Tangamandapio. En el pozo petrolero
se presentó un derrame de hidrocarburos, por lo cual los
ingenieros residentes desean conocer la población de
microorganismos antes y después del derrame, a continuación,
se presentan las colonias que crecieron en las cajas de Petri y
realizar los cálculos correspondientes. Tenga en cuenta que por
cada dilución se realizó un duplicado
Unidades formadoras de colonia UFC antes del derrame
Dilución 10-2

210 198
UFC UFC

204x102x10=2.0x106 20x105 UFC/g

Dilución 10-4

184 190
UFC UFC
Dilución 10-6

54 75
UFC UFC
Unidades formadoras de colonia UFC después del derrame
Dilución 10-2

138 100
UFC UFC

Dilución 10-4
46 45
UFC UFC
Dilución 10-6

23 20
UFC UFC

Los cálculos a realizar son:

UfC/g = N° de colonias en placa (entre 30 y 300 para bacterias) x

inverso de la dilución x 10. Los resultados deberán expresarse en dos
cifras significativas, si es necesario debe correr la coma (,) y
aumentar o disminuir el exponencial según sea el caso. (notación
científica). No olvidar sacar promedio por duplicado.

Momento 3.( Segunda sesión con el tutor) Análisis de

resultados y sustentación columna de Winogradsky.

1. Participar en el segundo encuentro de taller práctico de acuerdo

al lugar y fecha establecidos en sus respectivas zonas y centros.
(Skype, web conference, zoom o la herramienta que el
tutor establezca)

Observación Macroscópica Crecimiento Bacteriano.

El/la estudiante deberá realizar una descripción macroscópica del

crecimiento alrededor del grano de suelo. Observar si se encuentra
presencia de exudados, mucosidad o las características típicas del
crecimiento bacteriano sobre un medio de cultivo. Adicionalmente, el
estudiante deberá investigar sobre las morfologías existentes en
bacterias y responder las siguientes preguntas orientadoras:

- Qué compuestos en las membranas celulares de las bacterias,

permiten la tinción de las mismas, y qué relación tienen estas con la
tinción gram?
- Cuál es la utilidad de la tinción de gram en el desarrollo de la
microbiología?

- Busque imágenes de microscopía bacteriana e indague en que

objetivo del microscopio comúnmente se enfoca para observarlas.

-Consulte y describa brevemente sobre una bacteria de suelo que

tenga aplicabilidad en el área ambiental.

Observación Macroscópica Hongos/levaduras.

El/la estudiante deberá realizar una descripción macroscópica del

crecimiento alrededor de los trozos de pan. Observar si se encuentra
presencia de crecimiento de Levaduras (similar a bacterias) u Hongos
filamentosos (Mohos) sobre un medio de cultivo. Adicionalmente, el
estudiante deberá investigar sobre la morfología de los hongos y
levaduras a nivel microscópico, las estructuras microscópicas (hifa,
septo y esporas/conidios), y responder las siguientes preguntas
orientadoras:

- Qué tipo de tinción comúnmente se utiliza para identificar hongos en

laboratorio?

-Busque imágenes de microscopía en hongos e indague en que

objetivo comúnmente se enfoca para observarlos.

- Consulte y describa brevemente sobre un hongo que tenga

aplicabilidad en el área ambiental.

Observación Macroscópica de microorganismos acuáticos.

El/la estudiante deberá realizar una descripción macroscópica del

crecimiento alrededor de las gotas de agua, o donde estas se
encontraban (debido a la evaporación). Observar si se encuentra
presencia de crecimiento de hongos, colonias bacterianas o levaduras
sobre un medio de cultivo. Adicionalmente, el estudiante deberá
investigar sobre los posibles microorganismos que allí se puedan
encontrar. Revisar el siguiente video denominado “ la vida en una
gota de agua” https://www.youtube.com/watch?v=cAHtTbVP45A y
responder la siguiente pregunta orientadora:

- Escoja un organismo que se menciona en el video, describa su

clasificación taxonómica, fisiología y describa su importancia
ambiental en el ecosistema dulceacuícola.
Recuentos Bacterianos
De acuerdo a los cálculos realizados en los recuentos bacterianos del
caso propuesto, los estudiantes deberán analizar y responder las
siguientes preguntas
- De acuerdo a los análisis realizados en el laboratorio, puede
inferir que se vió afectada la población de microorganismos?
Ésta aumentó? O disminuyó?
- Teniendo en cuenta la presencia de microorganismos en la
muestra posterior al derrame, deberán consultar la información
sobre una bacteria que soporte esas condiciones y pueda estar
allí presente.

Informe de resultados.

Consolide todos los resultados y presente un informe de acuerdo a la

fecha estipulada por el docente a cargo y la metodología que él
defina.

El documento debe contener: Portada, Introducción o resumen,

objetivos de la práctica, descripción metodológica de cada una de las
etapas, conclusiones.

Contenido del documento:

a. Consolidado de las imágenes individuales con evidencias del

montaje de experimentos en casa ( momento 2).
 b. Dibujos de “Crecimiento de Bacterias” y “crecimiento de Hongos
y levaduras”, “Crecimiento de microorganismos en agua”. Debe
señalar y nombrar las estructuras microscópicas que estos
organismos poseen.
c. Respuestas a cada una de las preguntas orientadoras.
d. Conclusiones.

El tutor dispondrá de diferentes espacios durante esta

sesión (segunda sesión) para realizar la sustentación de
la Columna de Winogradsky. Aunque la presentación y la
defensa deben fundamentarse en las preguntas
orientadoras dispuestas en el Momento 1, el tutor podrá
basar su calificación en preguntas que puedan relacionar
los Momentos 2 y 3, y demás contenidos del curso que
pueda tener relación con la fisiología de los
microorganismos presentes en la columna, y su potencial
aislamiento.

El tutor de componente práctico tendrá la autonomía para

definir si el informe es sustentado sincrónicamente
( web) o asincrónicamente ( video)

E entornos
para su
desarrollo Entorno de componente práctico
 In informe de laboratorio

Informe de laboratorio.
● Portada.
● Resultados obtenidos (fotografías, dibujos y
tablas).
● Discusión de resultados (deben tener relación con
el origen de la muestra, por lo que se recomienda
establecer hipótesis de carga microbiana
esperada; también deben contener soporte
bibliográfico).
● Referencias (Formato APA). Nota: recuerde que
debe citar también.
Pr productos
S El informé deberá ser sustentado por parte del
a entregar estudiante sincrónicamente ( web) o asincrónicamente (
por el video)
estudiante

Sustentación columna de winogradsky

L la sustentación debe realizarse en el Momento 3

( segunda sesión) como se describe en la sección de
“Actividades a desarrollar”. La presentación debe
contener fotografías del desarrollo de la columna en las
cuatro semanas y debe responder a las preguntas
orientadoras estipuladas.
Formato de Rubrica de evaluación

Tipo de actividad: Independiente

Número de actividad: 4

Momento de la evaluación: Intermedio

La máxima puntuación posible es de 90 puntos

Criterios Desempeños
Nivel alto: Hace uso de las normas de bioseguridad,
Primer criterio reconoce los elementos propios y responde las preguntas
de evaluación: correctamente por medio de cuestionarios escritos.
 
Reconoce la Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
importancia y obtener entre 4 puntos y 5 puntos
hace uso de las
normas de Nivel medio: Utiliza los elementos de bioseguridad
Bioseguridad pero no hace uso correcto de ellos o no responde
correctamente las preguntas realizadas por el tutor.
Este criterio Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
representa 5 obtener entre 2 puntos y 3 puntos
puntos del
total de 90 Nivel bajo: No hace uso de los implementos de
puntos de la bioseguridad o no responde correctamente las preguntas
actividad. realizadas por el tutor.
Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
obtener entre 0 puntos y 1 puntos
 Nivel alto: El estudiante realiza el aislamiento de
Segundo Bacterias y Hongos a partir de sustratos definidos, a su
criterio de vez realiza análisis cuantitativo de bacterias. Describe las
evaluación: morfologías.
Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
Desarrolla obtener entre 25 puntos y 30 puntos
habilidades para
el aislamiento de Nivel medio: Realiza el aislamiento de algunos
microorganismos
microorganismos, sin embargo, no tiene en cuenta el
y reconoce las
recuento bacteriano o no realiza la descripción
estructuras que
los componen. morfológica microscópica.
Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
obtener entre 2 puntos y 24 puntos
Este criterio
representa 30 Nivel bajo: No lleva a cabo el aislamiento de
puntos del microorganismos ni hace uso correcto del
total de 90 microscopio para definir las estructuras celulares de
puntos de la los microorganismos, o no asiste a las sesiones
actividad contempladas.
Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
obtener entre 0 puntos y 1 puntos
Tercer criterio Nivel alto: Analiza las células que componen los
de evaluación: microorganismos a través de técnicas de tinción para
Hongos y Bacterias.
Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
Analiza los tipos
obtener entre 25 puntos y 30 puntos
de células que
conforman los
microrganismos y Nivel medio: Identifica los tipos de células y
hace uso correcto estructuras, sin embargo, no hace uso correcto de
de las técnicas de las técnicas de tinción para hongos y bacterias.
tinción en los Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
mismos. obtener entre 2 puntos y 24 puntos

Nivel bajo: No identifica las células de hongos y

Este criterio
bacterias, ni sus estructuras, no se evidencia la
representa 30
aplicación de las técnicas de tinción o no asiste a las
puntos del
sesiones programadas de laboratorio.
total de 90
Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
puntos de la obtener entre 0 puntos y 1 puntos
actividad
Nivel alto: Realiza el montaje de la columna de
Cuarto criterio winogradsky con el tiempo preciso para visualizar los
de evaluación: cambios, analiza las reacciones que allí se presentan
y responde correctamente las preguntas sugeridas
Reconoce los en la guía.
procesos Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
metabólicos obtener entre 20 puntos y 25 puntos
microbianos que
se desarrollan a Nivel medio: Se evidencia la construcción de la
través de la columna, sin embargo, ésta no se realiza con el
columna de tiempo para ver los cambios o no responde
Winogradsky. correctamente ni sustenta las preguntas sugeridas.
Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
Este criterio obtener entre 2 puntos y 19 puntos
representa 25
puntos del Nivel bajo: No entrega ni realiza la sustentación de
total de 90 la columna o no explica los procesos metabólicos
puntos de la que allí se presentan.
actividad Si su trabajo se encuentra en este nivel puede
obtener entre 0 puntos y 1 puntos

Entrega de informe en formato IEEE