TEMA 14

DETERMINACION DE UREA

DEFINICION:

La UREA es un compuesto químico cristalino e incoloro.

Se encuentra abundantemente en la orina  y en la materia
fecal. Es el principal producto terminal del metabolismo
de proteínas  en el hombre y en los demás mamíferos La
orina humana contiene unos 20g por litro, y un adulto
elimina de 25 a 39g diariamente.
En cantidades menores, está presente en la sangre, en
el hígado, en la linfa y en los fluidos serosos, y también en
los excrementos de los peces y muchos otros animales.
También se encuentra en el corazón, en los pulmones, en
los huesos y en los órganos reproductivos así como el
semen. La urea se forma principalmente en el hígado como
un producto final del metabolismo. El nitrógeno  de la
urea, que constituye el 80% del nitrógeno en la orina, procede de la degradación de los
diversos compuestos con nitrógeno, sobre todo de los aminoácidos de las proteínas en
los alimentos. En los mamíferos la urea se forma en un ciclo metabólico
denominado ciclo de la urea.
La urea está presente también en los hongos así como en las hojas y semillas de
numerosas legumbres y cereales.

FUNDAMENTACION TEORICA:

La UREA (NH 2 – C = NH2) es el principal producto del catabolismo proteico,

químicamente es una carbamida que tiene un peso molecular de 60 gr/ml, es una
molécula pequeña donde el Nitrógeno representa aproximadamente el 50 % de su
peso total.

Se presenta como un polvo blanco, completamente soluble en el agua que atraviesa

fácilmente las membranas celulares y capilares. Desde el punto de vista farmacológico
actúa como un diurético suave.

La UREA constituye el principal producto del catabolismo proteico, se enfoca el interés

en su metabolismo, en su absorción, transporte, almacenamiento y excreción de las
proteínas y de los aminoácidos.

Las proteínas son introducidas al organismo mediante la alimentación, sufren una

transformación enzimática a lo largo del tubo gastrointestinal hasta degradarse a
polipeptidos pequeños y aminoácidos, los cuales luego de atravesar las vellosidades
intestinales llegan al hígado donde van a sufrir una nueva transformación.

En el hígado los aminoácidos sufren 2 procesos:

1. Desaminacion
2. Transaminacion

En ambos casos se libera amoniaco (NH3) que va a constituir el compuesto

fundamental para la formación de la Urea.

SINTESIS DE LA UREA:

En la síntesis de la UREA intervienen 4 A.A. que son: Argirina, Citrulina , Ontina, y el

Ácido Aspártico.

Sintetizamos el ciclo de la UREA conocido con el nombre de Ciclo de Krebs Henseleid

en los siguientes pasos.

1. El NH3 se une con el CO2 y el ATP en presencia de la enzima sintetaza de

fosfato de carbamilo para formar el FOSFATO DE CARBAMILO.

2. El fosfato de carbamilo reacciona con la Ornitina en presencia de la enzima

sintetaza de Ornitina para formar Citrulina.

3. La Citrulina reacciona con el ácido aspártico en presencia de la enzima

arginosuccinica para formar el ácido arginosuccinico.

4. El ácido arginosuccinico es atacado por la enzima arginosuccinasa originando

argirina y ácido fumarico.

5. La Argirina es atacada por la enzima arginasa, formando Urea y Ornitina la que

iniciara nuevamente el Ciclo.

 La formación de Urea constituye un proceso fisiológico sumamente rápido y

eficaz que permite utilizar grandes cantidades de NH3, que es un compuesto
toxico ya que diluciones hasta de 1 en 70.000 ocasiona la muerte de los
mamíferos.

La Urea como tal no es toxica se encuentra contenida en diversos líquidos biológicos

siendo eliminada por medio de la orina con facilidad.
Los A.A. a nivel del intestino son atacados por las bacterias intestinales originando
NH3, el que por medio del sistema porta llega al hígado donde va a ser utilizado para
sintetizar Urea , cuando existen alteraciones anatómicas y funcionales del hígado, el
NH3 no penetra en el tejido hepático, por lo que retorna a la sangre, como presenta
una gran afinidad por el tejido nervioso va a localizarse a nivel del sistema cerebral
ocasionando el cuadro patológico, conocido con el nombre de shock Híper urémico,
coma Urémico que se caracteriza por onnibulaciones , alteraciones mentales,
produciéndose trastornos graves que pueden ocasionar la muerte.

La Urea constituye la fracción de Nitrógeno no proteico más importante en la mayoría

de los líquidos biológicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo
proteico

Se produce en el hígado y es excretado por la orina a través de los riñones.

Una elevación de la concentración sérica de urea, se interpreta generalmente como

una posible difusión renal. Sin embargo no debe dejarse de lado el hecho de que los
valores séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados con la dieta y el
metabolismo proteico por lo que cualquier alteración en estas variedades se traducirá
en un cambio de la concentración de urea en suero.

FUNDAMENTOS DEL METODO:

La Ureasa descompone específicamente la Urea produciendo CO2 y NH3. Esta

reacciona en medio alcalino con salicilato e hipoclorito para dar Indofenol de color
verde.

PRACTICA:

DETERMINACION DE UREA SANGUINEA

OBJETIVOS:

Determinar fotocolorimetricamente la cantidad de Urea presente en el organismo

humano.

MATERIAL:

1. Espectrofotómetro
2. Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
3. Baño María
4. Tubos de ensayo
5. Vasos de precipitado
6. Jeringas, guantes, torundas de algodón, alcohol.
MUESTRA:

 Suero, plasma u orina.

METODOS Y PROCEDIMIENTOS:

Técnicas para suero o plasma

1. En 3 tubos B (Blanco), D (Desconocido) y S (Standard) colocar:

B S D
Standard - 10 ul -
Suero o Plasma - - 10 ul
Reactivo 1 + 1 ml 1 ml 1 ml
Ureasa

Mezclar: Incubar 5 min. A 37º C. o 10 min. A temperatura ambiente.

Luego agregar:

Reactivo 2 1 ml 1 ml 1 ml

Mezclar: Incubar 5 min. A 37º C. o 10 min. A temperatura ambiente. Leer

en espectrofotómetro a 570 nm.

VALORES DE REFERENCIA

Los valores normales esperados son:

Suero o Plasma: 0,10 - 0,45 gr/ Lt.

0,30 gr % en Suero 0,40 gr. %

30 mg % 40 mg. Límite máximo 50 mg %

RESULTADO:

Desde el punto de vista clínico tiene importancia únicamente el aumento de la urea

sanguínea ya que recibe el nombre de hiperuremia (hiperazotemia). La hiperuremia se
presenta en la insuficiencia renal orgánica.

HIPERUREMIA RENAL AGUDA:

Acompañada de anuria oliguria, generalmente se alcanzan cifras muy elevadas de

urea, sin embargo la mayor parte de los casos son fácilmente reversibles, volviéndose
fácilmente a los valores normales. Se presenta en los siguientes casos.

1. En la glomerulonefritis aguda, en la cual la reacción Xantoproteica es ( - ) ,

debido a que no hay retención de compuestos aromáticos.

2. En la necrosis maligna anurica que se presenta en ciertas alteraciones que

pueden ser ocasionadas por reacciones trans - funcionales.

3. En necrosis de tejido renal por intoxicación por cloruro de mercurio u otro

toxico.

4. En obstrucción por calculo renal o inflamación de la próstata.

HIPERUREMIA CRONICA:

Esta va acompañada de una eliminación normal de la orina o

incluso una poliuria compensadora. Los valores altos de la urea
son de tipo irreversible, presentándose en todas las
alteraciones crónicas del riñón. Se presenta en los siguientes
casos.

1. En la glomerulonefritis crónica, la que se diferencia de la

aguda porque la reacción xantoproteica es positiva.
2. En la esclerosis renal secundaria.
3. En intervenciones quirúrgicas
4. En mielomas múltiples de riñón
HIPERUREMIA EXTRA RENAL:

Este tipo de uremia no va acompañada de alteración renal orgánica, aunque en ciertos

casos puede presentarse una alteración renal funcional, en los siguientes casos:

1. Insuficiencia circulatoria, donde existe una deficiente irrigación de la sangre del

riñón.
2. Insuficiencia cardiaca congestiva que es una de las causas más frecuentes de
hiperuremia extra renal.
3. Insuficiencia cardiaca periférica
4. Deshidratación cloropenica, por deficiencia de Cl ocasionada por vómitos,
diarreas, lavados gástricos, en este caso la hiperuremia sede por la
administración de Cl.
5. En el coma diabético
6. En los TEC (traumatismo encéfalo craneano).