TEMA 8

POLARIMETRÍA
8.1. FUNDAMENTO TEORICO

La rotación óptica puede definirse como la capacidad de una sustancia de desviar el

plano de luz polarizada. Para que la molécula posea actividad óptica debe ser asimétrica,
la magnitud y dirección de la desviación del plano de la luz polarizada que atraviesa una
sustancia simétrica en solución son reproducibles y pueden medirse.

En la figura se muestra esquemáticamente la desviación del plano de luz polarizada por

una solución ópticamente activa.

Fuente: Bioquímica Experimental G. Litwack

Las sustancias que desvían el plano de la luz polarizada en el sentido de las manecillas
del reloj se denominan dextro rotatorias(+) y para alinear el analizado (medida de la
desviación) debe girarse a la derecha como indica la figura 8.2, las sustancias que
desvían el plano de la luz polarizada hacia la izquierda se denominan levo rotatorias (-
).
Para producir este fenómeno la molécula debe poseer un centro asimétrico, para ello el
átomo de carbono no debe poseer dos grupos sustituidos iguales, es decir el carbono
sustituido debe tener cuatro grupos diferentes.
La rotación óptica se expresa por la siguiente fórmula:

Donde: [α] = 100 A/ l c

[α] = Rotación específica a la temperatura y longitud de onda

luminosa.
A = Rotación angular observada en grados.
c = Concentración del soluto en g. por 100 ml. de sol.
l = Longitud en decímetros del paso óptico a través de la solución, en decímetros.
Fuente: Bioquímica Experimental G. Litwack

8.2. OBJETIVOS

a) Aprender a utilizar los diferentes tipos de polarímetros

b) Determinar la rotación específica de la sacarosa, glucosa y fructuosa.

8.3. REACTIVOS Y MATERIALES

Polarimetro y LabQuest o interfaz de la computadora

Polarímetro Vernier y celda de muestra
Matraces aforados
- Solución de Sacarosa O.5 M
- Solución de Glucosa 0.5 M
- Solución de Fructuosa 0.5M
- Hidróxido de amonio

8.4. MONTAJE EXPERIMENTAL

En los polarimetros tradicionales se debe tener mucho cuidado en colocar la muestra de
manera correcta dentro del tubo polarimétrico
De la manera correcta como se prepare la muestra problema de análisis en los tubos del
polarímetro dependerá el tener una lectura cierta. La presencia de burbujas en los tubos
con la solución y el mal ajuste de los mismos da lugar a la existencia de fenómenos de
refringencia, que deben evitarse.

Llenado del tubo polarimétrico para evitar la formación de burbujas

Fuente: Bioquímica Experimental G. Litwack

En el polarímetro que trabaja con el LabQuest o interfaz de la computadora, no es

necesario tener en cuenta este detalle.

POLARÍMETRO
8.5.- PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL.-

8.5.1. DETERMINACION DE LA ROTACION ESPECÍFICA.

Estimar la rotación óptica de cada solución azucarada al 0.5 M. empleando agua como
blanco para la lectura del polarímetro. Hacer seis lecturas individuales de cada solución
y emplear su media aritmética para calcular la rotación específica. Anotar la
temperatura del entorno y comparar los datos obtenidos con tablas.

Nota: A las soluciones de glucosa y fructuosa agregar 4 gotas de hidróxido de amonio,

antes de tomar las lecturas.

Ángulo blanco (°): _____

Concentraci altur Ang. α1 Ang α2 Ang α3 Rotac
on (g/mL) a ulo 1 (°) ul o2 (°) ulo 3 (°) ión
(cm) (°) (°) (°) Espec
ífica(°
)

Sacarosa

Glucosa

D-(–)-
fructosa

8.5.2. DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DESCONOCIDA.DE UNA

SOLUCIÓN DE FRUCTUOSA .

1.- Conecte los dos cables polarímetro Vernier a sus respectivos puertos de su interfaz de
adquisición de datos. Inicie el programa de recopilación de datos y seleccione Nuevo en
el menú Archivo.
Nota: En Logger Pro, esperar hasta que un gráfico de la Iluminación (rel) en el eje y, y
Ángulo (°) en el eje x aparece antes de continuar.
2. Calibrar el polarímetro.
a. Verter el agua destilada en la celda Polarímetro a una altura de 10 cm. Es importante
leer la altura con una precisión de 0,1 cm.
b. Conectar el polarímetro al Lab Quest
c. Iniciar la recopilación de datos y gire lentamente el analizador en sentido horario o en
sentido antihorario, como se muestra en la Figura , hasta que deje de recogida de datos
(15 s). Nota: Si está utilizando una interfaz LabPro, sólo girar el analizador mientras que
la recolección de datos activa. Permitir unos pocos segundos tanto en el comienzo y el
final de la recolección de datos sin mover el analizador.
3. Registre el primer ángulo por encima de 0 °, donde la iluminación es máxima para el
blanco. Hay varias maneras de localizar este ángulo mediante funciones de análisis en
Logger Pro o LabQuest aplicación.
Una manera de localizar este ángulo es el uso de un ajuste gaussiano.
4. Guarde la carrera. En Logger Pro, hacerlo seleccionando la tienda Novedades Ejecutar
del menú experimento. En App LabQuest, puede almacenar una carrera tocando el icono
archivador.
5. Ahora está listo para añadir la muestra ópticamente activa en la celda del Polarímetro.
Enjuague la celda Polarímetro con unos pocos mililitros de solución de fructuosa. Verter
la muestra en la célula Polarímetro a una altura de 10 cm. Registre este valor con una
precisión de 0,1 cm en la tabla de abajo.
b. Colocar la cubeta en el polarímetro.
c. Inicie la recolección de datos y gire lentamente el analizador hacia la derecha o hacia
la izquierda hasta la recolección de datos se detiene.

Realizar cinco lecturas de una solución de fructuosa para determinar el promedio de la

concentración.

8.6. CUESTIONARIO

1.- Como influye la diferencia de temperatura en el registro de datos para el punto 8.5.1.,
considerando temperaturas mayores y menores a las que se tienen en tablas?
Compare los resultados obtenidos experimentalmente con los existentes en tablas y
explique las variaciones.

2. A que se llama refringencia y cómo afectaría las lecturas del polarímetro?

3.- Explique la diferencia entre los dos tipos de polarímetros empleados.